【摘要】： 疼痛是臨床上常見的癥狀，常給病人帶來極大的痛苦。組織損傷及外周神經(jīng)損傷后可導(dǎo)致痛及痛過敏。目前認(rèn)為，痛及痛過敏的發(fā)生機(jī)制有兩方面：一是外周傷害性信息不斷傳入，二是脊髓內(nèi)感覺神經(jīng)元興奮性發(fā)生改變。但其詳細(xì)機(jī)制并未完全闡明。近年來研究表明，脊髓后角神經(jīng)元內(nèi)蛋白激酶C(PKC)的激活和位移與痛感覺及痛過敏的形成有關(guān)。鞘內(nèi)注射PKC激動(dòng)劑如PMA，動(dòng)物表現(xiàn)出明顯的痛過敏和自發(fā)性疼痛。而給予PKC抑制劑如H-7，動(dòng)物對(duì)傷害性刺激反應(yīng)遲鈍，明顯減輕福爾馬林足底注射引起的熱痛覺過敏現(xiàn)象，熱輻射實(shí)驗(yàn)潛伏期延長(zhǎng)。而在缺乏PKCγ的小鼠神經(jīng)損傷后完全不產(chǎn)生痛覺過敏�？梢�，PKC的激活是產(chǎn)生痛及痛過敏的重要因素。海馬作為邊緣系統(tǒng)的重要部分，其功能尚未完全闡明。雖然已有較多的研究證明海馬參與情緒，記憶及應(yīng)激調(diào)節(jié)，但是有關(guān)海馬與疼痛關(guān)系研究報(bào)道較少。近年來的一些研究表明，海馬有可能參與痛感覺及痛調(diào)制過程，但其詳細(xì)機(jī)制尚不清楚。 因此，本實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠袃煞矫�，一是系統(tǒng)觀察福爾馬林炎性痛時(shí)脊髓后角PKC激活的時(shí)間過程及其分布特征；二是觀察福爾馬林炎性痛及痛過敏過程中海馬PKC表達(dá)的變化及其區(qū)域特征，為進(jìn)一步闡明海馬在痛感覺及痛調(diào)制方面的功能提供依據(jù)。研究結(jié)果如下： 1．大鼠福爾馬林炎性痛及痛過敏時(shí)脊髓后角PKC的變化及時(shí) 中文摘要 間特征 健康SD大鼠42只，雌雄不拘，酬頒7組，分另為對(duì) 照繃D獼馬林致痛后＊，3h，12h，2仇 3d及7d組（每組 n＝6人對(duì)照組大鼠經(jīng)右后掌皮下注射生理鹽水0．IInl，其余各 組大鼠注射 sed爾馬林溶液 0．Inil，對(duì)照組于注射后 24h，其 余各組于注射福爾馬肪相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)耿LS脊髓節(jié)段做PKC免 疫組織化學(xué)觀察。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組PKC陽性細(xì)胞較少，免疫陽性產(chǎn)物均 勻分布在細(xì)胞膜、細(xì)胞撅D細(xì)胞核。而且左右兩側(cè)對(duì)比PKC 的陽性細(xì)胞數(shù)無差異中Deo．05人注射福爾馬林后各實(shí)驗(yàn)組脊 髓后角PKC陽性細(xì)胞數(shù)增加，而且同側(cè)仰勤Uu明顯。與此 同時(shí)PKC陽性產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)分布也鞭破，表現(xiàn)為：細(xì)胞核 幾乎無表達(dá)，主要分儷雛腳位；而且期鈔翱弛拗耐照組顯 著增加巾＜0．05人PKC a＠性的增加在時(shí)間上表現(xiàn)為兩個(gè) 高峰，邢IJ為注射福爾馬肪 lh 和 24h，而又以 24h更為顯著 巾．of人肋后 7d M的陽性細(xì)胞數(shù)目及染色髓恢復(fù)到 對(duì)照組水平。 以上結(jié)鞭明，福爾馬林贓性痛及痛過敏過程中，脊髓 后角PKC被激活膿移￥鵬部位，娜蜘曠于福爾馬林注射后 24h的同側(cè)脊髓后角最明顯。 2．大鼠福爾馬林炎性痛誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元形態(tài)及PKC的變化 健康SD大鼠42只，雌雄不拘，酬蛐7組，分別為對(duì) 照繃D獼馬硼后＊，3h，12h，24h，3d禾 7d組（IFi）。 對(duì)照組大鼠經(jīng)右后掌皮下注射生理鹽水0．IInl，其余各組注射 5蝴馬林溶液0．IITil。對(duì)照組動(dòng)物于注射后24h，其余各組 于注射后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)斷頭取腦，冠狀切取視交叉后 1至4mm 2 中文摘要 腦胭，10％中牲甲醛固定，敝HE常順色和PKC免翩 化染色，觀察海馬神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)變化及M 倩況。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組海馬PKC陽性細(xì)胞較少，陽性產(chǎn)物在 細(xì)胞內(nèi)均勻分布，染色深度淺。M馬林后各實(shí)驗(yàn)組PKC 陽。喇撇均增加，附勝噸臟…靴，而細(xì)胞核 無明顯表達(dá)。PKC的兔疫活性的增加在時(shí)間上表現(xiàn)為兩個(gè)高 峰，分別為＊ 和 24h，以 24h最明顯（pwto．of），之后即開始 下降，于注射后7d f恢復(fù)￥側(cè)股組水平。這種免疫活性的增 加，主要表現(xiàn)在CA3及CA4區(qū)，以CA3區(qū)最明顯；而CAI 區(qū)無論陽性細(xì)胞數(shù)及染色深度都與對(duì)照組無顯著性差異。HE 常艦染色發(fā)現(xiàn)對(duì)照組海躺體細(xì)艙由剛整齊，胞核清晰：注射 福爾馬林后可見部分海馬錐喇娜一＋脹，深染：在注 射福爾馬林后3d組海馬錐喇胞變化最明顯，可見細(xì)腳P列紊 亂，胞體月＋服核仁消失，部分錐體細(xì)胞胞體皺縮，胞漿濃縮及 胞核固縮；＿掖形態(tài)學(xué)改變可于注射福爾馬林后7天恢復(fù)。 以上結(jié)果表明，福爾馬敝性痛及痛過敏賄馬錐喇胞 M的表達(dá)增強(qiáng)，娜靴的時(shí)間特征與脊髓是一致的，說明 海馬參與了傷害賬息的傳遞與感受過程。海馬PKC觸強(qiáng) 主要出贓CA3區(qū)，說明CA3區(qū)可能題馬感受痛覺的主要 珊。而且在PKC的免疫活勝增強(qiáng)之后發(fā)生部分細(xì)胞可逆勝損 傷變化，表明傷害性信層的傳入可致海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)發(fā)生可 逆性改變。 結(jié)論：大鼠右后掌注射福爾馬湘能G！起脊髓后角神a 內(nèi)PKC兔疫活性增強(qiáng)，膜結(jié)合PKC謝，這種變化于注射福 爾馬林后24h最為顯著：與此同時(shí)海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)PKC免疫 活哪增強(qiáng)，表明傷害 急同時(shí)傳謝u了海馬。顧？變化以
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號(hào)】：R363

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本文編號(hào)：2781267