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福爾馬林炎性痛誘導(dǎo)大鼠脊髓后角和海馬PKC表達(dá)上調(diào)

發(fā)布時(shí)間:2020-08-05 08:11
【摘要】: 疼痛是臨床上常見的癥狀,常給病人帶來極大的痛苦。組織損傷及外周神經(jīng)損傷后可導(dǎo)致痛及痛過敏。目前認(rèn)為,痛及痛過敏的發(fā)生機(jī)制有兩方面:一是外周傷害性信息不斷傳入,二是脊髓內(nèi)感覺神經(jīng)元興奮性發(fā)生改變。但其詳細(xì)機(jī)制并未完全闡明。近年來研究表明,脊髓后角神經(jīng)元內(nèi)蛋白激酶C(PKC)的激活和位移與痛感覺及痛過敏的形成有關(guān)。鞘內(nèi)注射PKC激動(dòng)劑如PMA,動(dòng)物表現(xiàn)出明顯的痛過敏和自發(fā)性疼痛。而給予PKC抑制劑如H-7,動(dòng)物對(duì)傷害性刺激反應(yīng)遲鈍,明顯減輕福爾馬林足底注射引起的熱痛覺過敏現(xiàn)象,熱輻射實(shí)驗(yàn)潛伏期延長(zhǎng)。而在缺乏PKCγ的小鼠神經(jīng)損傷后完全不產(chǎn)生痛覺過敏?梢,PKC的激活是產(chǎn)生痛及痛過敏的重要因素。海馬作為邊緣系統(tǒng)的重要部分,其功能尚未完全闡明。雖然已有較多的研究證明海馬參與情緒,記憶及應(yīng)激調(diào)節(jié),但是有關(guān)海馬與疼痛關(guān)系研究報(bào)道較少。近年來的一些研究表明,海馬有可能參與痛感覺及痛調(diào)制過程,但其詳細(xì)機(jī)制尚不清楚。 因此,本實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠袃煞矫,一是系統(tǒng)觀察福爾馬林炎性痛時(shí)脊髓后角PKC激活的時(shí)間過程及其分布特征;二是觀察福爾馬林炎性痛及痛過敏過程中海馬PKC表達(dá)的變化及其區(qū)域特征,為進(jìn)一步闡明海馬在痛感覺及痛調(diào)制方面的功能提供依據(jù)。研究結(jié)果如下: 1.大鼠福爾馬林炎性痛及痛過敏時(shí)脊髓后角PKC的變化及時(shí) 中文摘要 間特征 健康SD大鼠42只,雌雄不拘,酬頒7組,分另為對(duì) 照繃D獼馬林致痛后*,3h,12h,2仇 3d及7d組(每組 n=6人對(duì)照組大鼠經(jīng)右后掌皮下注射生理鹽水0.IInl,其余各 組大鼠注射 sed爾馬林溶液 0.Inil,對(duì)照組于注射后 24h,其 余各組于注射福爾馬肪相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)耿LS脊髓節(jié)段做PKC免 疫組織化學(xué)觀察。 結(jié)果發(fā)現(xiàn),對(duì)照組PKC陽性細(xì)胞較少,免疫陽性產(chǎn)物均 勻分布在細(xì)胞膜、細(xì)胞撅D細(xì)胞核。而且左右兩側(cè)對(duì)比PKC 的陽性細(xì)胞數(shù)無差異中Deo.05人注射福爾馬林后各實(shí)驗(yàn)組脊 髓后角PKC陽性細(xì)胞數(shù)增加,而且同側(cè)仰勤Uu明顯。與此 同時(shí)PKC陽性產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)分布也鞭破,表現(xiàn)為:細(xì)胞核 幾乎無表達(dá),主要分儷雛腳位;而且期鈔翱弛拗耐照組顯 著增加巾<0.05人PKC a@性的增加在時(shí)間上表現(xiàn)為兩個(gè) 高峰,邢IJ為注射福爾馬肪 lh 和 24h,而又以 24h更為顯著 巾.of人肋后 7d M的陽性細(xì)胞數(shù)目及染色髓恢復(fù)到 對(duì)照組水平。 以上結(jié)鞭明,福爾馬林贓性痛及痛過敏過程中,脊髓 后角PKC被激活膿移¥鵬部位,娜蜘曠于福爾馬林注射后 24h的同側(cè)脊髓后角最明顯。 2.大鼠福爾馬林炎性痛誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元形態(tài)及PKC的變化 健康SD大鼠42只,雌雄不拘,酬蛐7組,分別為對(duì) 照繃D獼馬硼后*,3h,12h,24h,3d禾 7d組(IFi)。 對(duì)照組大鼠經(jīng)右后掌皮下注射生理鹽水0.IInl,其余各組注射 5蝴馬林溶液0.IITil。對(duì)照組動(dòng)物于注射后24h,其余各組 于注射后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)斷頭取腦,冠狀切取視交叉后 1至4mm 2 中文摘要 腦胭,10%中牲甲醛固定,敝HE常順色和PKC免翩 化染色,觀察海馬神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)變化及M 倩況。 結(jié)果發(fā)現(xiàn),對(duì)照組海馬PKC陽性細(xì)胞較少,陽性產(chǎn)物在 細(xì)胞內(nèi)均勻分布,染色深度淺。M馬林后各實(shí)驗(yàn)組PKC 陽。喇撇均增加,附勝噸臟…靴,而細(xì)胞核 無明顯表達(dá)。PKC的兔疫活性的增加在時(shí)間上表現(xiàn)為兩個(gè)高 峰,分別為* 和 24h,以 24h最明顯(pwto.of),之后即開始 下降,于注射后7d f恢復(fù)¥側(cè)股組水平。這種免疫活性的增 加,主要表現(xiàn)在CA3及CA4區(qū),以CA3區(qū)最明顯;而CAI 區(qū)無論陽性細(xì)胞數(shù)及染色深度都與對(duì)照組無顯著性差異。HE 常艦染色發(fā)現(xiàn)對(duì)照組海躺體細(xì)艙由剛整齊,胞核清晰:注射 福爾馬林后可見部分海馬錐喇娜一+脹,深染:在注 射福爾馬林后3d組海馬錐喇胞變化最明顯,可見細(xì)腳P列紊 亂,胞體月+服核仁消失,部分錐體細(xì)胞胞體皺縮,胞漿濃縮及 胞核固縮;_掖形態(tài)學(xué)改變可于注射福爾馬林后7天恢復(fù)。 以上結(jié)果表明,福爾馬敝性痛及痛過敏賄馬錐喇胞 M的表達(dá)增強(qiáng),娜靴的時(shí)間特征與脊髓是一致的,說明 海馬參與了傷害賬息的傳遞與感受過程。海馬PKC觸強(qiáng) 主要出贓CA3區(qū),說明CA3區(qū)可能題馬感受痛覺的主要 珊。而且在PKC的免疫活勝增強(qiáng)之后發(fā)生部分細(xì)胞可逆勝損 傷變化,表明傷害性信層的傳入可致海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)發(fā)生可 逆性改變。 結(jié)論:大鼠右后掌注射福爾馬湘能G!起脊髓后角神a 內(nèi)PKC兔疫活性增強(qiáng),膜結(jié)合PKC謝,這種變化于注射福 爾馬林后24h最為顯著:與此同時(shí)海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)PKC免疫 活哪增強(qiáng),表明傷害 急同時(shí)傳謝u了海馬。顧?變化以
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2002
【分類號(hào)】:R363

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