【摘要】： 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（granulocyte macrophage colony stimulating factor，GM-CSF）可促進(jìn)抗原提呈細(xì)胞（antigen presenting cells，APC）的成熟和激活增強(qiáng)抗原的提呈，具有免疫佐劑作用。HBV前S2蛋白在介導(dǎo)乙肝病毒進(jìn)入，肝細(xì)胞中起著重要的作用，而且前S2抗原的T細(xì)胞表位有助于提高機(jī)體對(duì)S抗原的抗體應(yīng)答水平。為研究GM-CSF和PreS2對(duì)乙肝DNA疫苗的免疫增強(qiáng)作用，本研究通過(guò)PCR方法、T-A克隆技術(shù)以及基因定向克隆手段，將重組人GM-CSF基因與乙肝病毒前S2抗原和表面抗原基因（HBVPreS2S，S2S）融合，構(gòu)建了融合基因真核表達(dá)載體PcDNA3.1-S2S-rhGM-CSF，并在HepG2細(xì)胞中表達(dá)，初步得出以下結(jié)果： 1. 重組質(zhì)粒PcDNA3.1-S2S-GM-CSF, PcDNA3.1-S2Sc，PcDNA3.1-S -GM-CSF和PcDNA3.1-Sc經(jīng)酶切、PCR和DNA測(cè)序鑒定構(gòu)建正確。 2. 重組質(zhì)粒PcDNA3.1-S2S-GM-CSF, PcDNA3.1-S2Sc, PcDNA3.1-S -GM-CSF和PcDNA3.1-Sc可在HepG2細(xì)胞中表達(dá), 而且表達(dá)出的蛋白 WP=10 能與相應(yīng)的單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合，說(shuō)明融合基因表達(dá)質(zhì)粒體外成 功表達(dá)； 本研究結(jié)果為新型乙肝DNA疫苗的研制奠定了一定基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號(hào)】：R346

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 劉文軍,楊芙蓉,阮力,任貴方,朱既明;乙型肝炎表面抗原S-蛋白糖化位點(diǎn)序列的人工變異及其哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物的性狀研究[J];病毒學(xué)報(bào);1997年01期

2 劉蓬勃,徐慧文,王學(xué)良,李輝,莊貴華,烏正賚,張孔來(lái);乙肝疫苗接種無(wú)、弱應(yīng)答與遺傳因素關(guān)系[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年01期

3 朱學(xué)軍,曹雪濤,于益芝,陳國(guó)友,萬(wàn)濤,馬施華,唐華,章衛(wèi)平;人外周血樹(shù)突狀細(xì)胞的體外擴(kuò)增及鑒定[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;1997年04期

4 梁增偉,李用國(guó),蘭英華,任紅;HBsAg真核表達(dá)重組質(zhì)粒在EB病毒轉(zhuǎn)化B淋巴母細(xì)胞中的表達(dá)[J];中華肝臟病雜志;2001年05期

本文編號(hào)：2763026