【摘要】：[目的] 研究骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells，BMSC)體外培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化情況。并初步探討以珊瑚為骨組織工程支架材料的可行性和細(xì)胞在材料上的生長(zhǎng)情況，以尋求適宜的骨組織工程支架材料。 [方法] 抽取約2月齡兔骨髓，分離骨髓基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，并向成骨細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化。將誘導(dǎo)的BMSC消化離心收集細(xì)胞，取一定濃度接種于珊瑚材料上，進(jìn)行聯(lián)合培養(yǎng)，觀察細(xì)胞在珊瑚上生長(zhǎng)狀況。 [結(jié)果] (1)提取的骨髓基質(zhì)細(xì)胞呈貼壁生長(zhǎng)，誘導(dǎo)后可向成骨細(xì)胞分化，細(xì)胞呈成骨細(xì)胞形態(tài)為梭形和多角形。細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)可以互相重疊呈復(fù)層生長(zhǎng)，無(wú)接觸抑制現(xiàn)象，并可形成鈣化結(jié)節(jié)；(2)用改良鈣鈷染色法檢測(cè)誘導(dǎo)細(xì)胞堿性磷酸活性呈強(qiáng)陽(yáng)性。骨鈣素分泌水平比常規(guī)對(duì)照組明顯增高，電子探針?lè)治鎏崾菊T導(dǎo)細(xì)胞基質(zhì)鈣離子、磷離子含量明顯高于用完全DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，掃描電鏡觀察細(xì)胞呈較典型的成骨細(xì)胞狀態(tài)，并可見(jiàn)鈣鹽沉積。改良MTT法測(cè)定顯示骨髓基質(zhì)細(xì)胞于第7，8天左右可達(dá)到增殖高峰；(3)誘導(dǎo)細(xì)胞和未誘導(dǎo)細(xì)胞傳代約12代時(shí)細(xì)胞形態(tài)有所改變，至16代左右細(xì)胞體積明顯變大，看起來(lái)更加扁平，呈不規(guī)則形狀貼附于瓶底。其活力明顯下降，趨于衰老；(4)誘導(dǎo)細(xì)胞可以在珊瑚上繼續(xù)黏附、生長(zhǎng)、增殖和分化。掃描電鏡檢測(cè)可見(jiàn)細(xì)胞向珊瑚孔隙內(nèi)生長(zhǎng)，呈多角形，并有突起相互連接。有的細(xì)胞可覆蓋孔隙表面，并可見(jiàn)鈣結(jié)節(jié)形成。 [結(jié)論] (1)骨髓基質(zhì)細(xì)胞具有來(lái)源充足，取材方便，創(chuàng)傷小無(wú)明顯并發(fā)癥。而且其分化增殖能力較強(qiáng)，成骨能力確定。所以采用骨髓基質(zhì)細(xì)胞作為種子細(xì)胞構(gòu)建組織工程骨有比較可靠的依據(jù) (2)通過(guò)骨髓基質(zhì)細(xì)胞與珊瑚支架材料的聯(lián)合培養(yǎng)，珊瑚對(duì)于BMSC的生物相容性較好，未發(fā)現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)表明骨髓基質(zhì)細(xì)胞可在珊瑚上生長(zhǎng)、增殖、鈣化。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R329

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 毛天球,陳富林,楊維東,馬秦,陶凱;骨組織工程及支架材料的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

2 吳凡,楊維東,雷德林,羊書(shū)勇,唐立輝;成骨細(xì)胞接種于珊瑚-羥基磷灰石構(gòu)建骨組織的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

3 毛天球,陳富林,楊維東,陶凱;骨組織工程的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代康復(fù);2001年16期

4 任高宏,裴國(guó)獻(xiàn);骨髓基質(zhì)細(xì)胞體內(nèi)成骨研究進(jìn)展[J];中華外科雜志;2002年08期

5 劉俠,樂(lè)以倫;堿性磷酸酶與鈣化[J];中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào);1997年01期

6 李裕標(biāo),楊志明,李秀群;成骨細(xì)胞與生物衍生材料聯(lián)合培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2002年01期

本文編號(hào)：2722736