【摘要】： 背景與目的 工頻磁場的生物學效應，尤其是工頻磁場對腫瘤發(fā)生發(fā) 展的影響，是當前國際上熱點問題。工頻磁場對腦的影響研究較少。 在流行病學調查方面，工頻磁場輻射是否致腦腫瘤患病率增高尚有爭 議。有實驗研究認為工頻磁場可致腦細胞DNA單鏈、雙鏈斷裂率， DNA-DNA、DNA-蛋白交鏈形成率增高。近幾年來，細胞間隙連接通 訊（GJIC）的抑制被看作是檢測可疑促癌劑的一個重要指標。本課題 試圖通過觀察50Hz正弦交變磁場對SD大鼠大腦星形膠質細胞GJIC 的影響來研究工頻磁場是否致腦腫瘤或協(xié)同其他促癌劑（如：佛波酯） 致腦腫瘤。 材料與方法1．實驗分組：（1）空白對照組（0mT工頻磁場）；（2）0.8mT 工頻磁場處理組；（3）1.6mT工頻磁場處理組：（4）TPA組：（5）0.8mT 工頻磁場+TPA組；（6）1.6mT頻磁場+TPA組。2．星形膠質細胞培 養(yǎng)、鑒定：取生后3天內SD大鼠大腦組織，原代培養(yǎng)9天，傳代一次， 培養(yǎng)6天。采用免疫組織化學方法——SP法，用GFAP鑒定星形膠質 細胞，星形膠質細胞陽性率達98％以上。3．星形膠質細胞處理：TPA 組細胞與3ng/ml TPA接觸1小時；磁場輻射組細胞接受0.8mT或1.6mT、 50Hz正弦交變磁場暴露24小時；TPA+磁場輻射組細胞接受0.8mT或 1.6mT，50Hz正弦交變磁場輻射23小時后，加入3ng/ml TPA，再共同 作用1小時。空白對照組置于假輻射器內24小時。4．FRAP法檢測 GJIC：細胞經處理后，6-CFDA負載，然后在LSCM上用FRAP法檢測。 獲取漂白前、后各次掃描圖像，漂白細胞及校正細胞熒光強度的變化， 并得出相應的時間－強度變化趨勢圖。5．SPSS10刀軟件包做Kruskal 。lid W8lliS’S檢驗、Kefld。11’S等級相關檢驗，，O＜0．05表示有顯著 性差異。 技果1．各處理組相對熒光強度恢復百分比（CFIRP）在漂白后omin為 0％，隨掃描時間延長，CFIRP逐漸增高�？瞻讓φ战M在漂白后10min時， CFIRP基本恢復至漂白前水平，所以選擇漂白后10min時的相對熒光強 度恢復速率（CFIRR）進行比較。同時隨掃描時間延長，各處理組CFIRR 逐漸下降。2．TPA是一種己知強促癌劑，能抑制多種細胞的GJIC， 其抑制效應與濃度、作用時間有關。本實驗根據有關文獻研究3ng／ml 1”PA作用1，J’時，結果得出：TPA濃度為3ng／ml時能夠明顯抑制星形 膠質細胞 GJIC（CFIRRC。n；r。：：9．74；CFIRRTpA：4．53，H＝12，084， p＝0．00）。3．空白對照組、0．smT工頻磁場處理組、1．6mT工頻磁場 處理組CFIRR 分別為：9．74、8．25、6．68。由上述數(shù)據可知，隨著磁 場強度的增強，CFIRR逐漸下降，呈負相關（，＝－0．180，p＝0刀32），說 明工頻磁場對 GJI的抑制作用隨磁場強度（0～1．6mT范圍內）增強呈 遞增趨勢。但是 0．8或 1．6mT頻磁場不能夠抑制星形膠質細胞 GJIC （H—4．124，p—0．127，與空白對照組比較）。4．空白對照組、TPA組、 0．smT工頻磁場＋TPA組、互．6mT頻磁場＋TPA組 CFIRR分別為 9．74、 4．53、3．32、2．16。隨著與TPA共同作用的工頻磁場強度的增強，CFIRR 逐漸下降，呈負相關（T＝－0，338，p。0刀00）。0．smT或1石mT工頻磁場 與TPA（3ng／ml）共同作用能夠抑制星形膠質細胞GJIC（H＝32石17， p－0．000，與空白對照組比較）。5．TPA、0．smTI頻磁場＋TPA組、1．6mT 工頻磁場＋TPA組CFIRR分別為4．53、3．32、2．16。0石mT或1．6mT工 頻磁場與TPA（3ng／ml）無協(xié)同增強對星形膠質細胞GJIC 抑制作用 （H＝2．589，P＝0．274，與TPA組比較）。同時隨著與TPA共同作用的工 頻磁場強度的增強，CFIRR逐漸下降，但是CFIRR下降等級相關性檢 驗不具有統(tǒng)計學意義（，一0．136；p功．173人 結論 2 l．FRAP法是評價可疑促癌劑對GJIC作用的簡便而可靠的方法。 2．3nglml TPA作用 1，J’時，能夠高度抑制星形膠質細胞 GJIC。 3．0．smT或1．6mT、50Hi正弦交變磁場單獨輻射24 ，J’時不能抑制星形 膠質細胞GJIC，協(xié)同TPA也不能增強對星形膠質細胞GJIC的抑制 作用。但是磁場對星形膠質細胞GJIC的抑制作用隨著磁場強度 （0～1．6mT范圍內）增強呈遞增趨勢。
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2001
【分類號】：R363;R730.2

【參考文獻】

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本文編號：2668124