【摘要】：HLA-G為一類非經(jīng)典的MHC-Ⅰ分子，主要表達于滋養(yǎng)層母胎界面上，最初的研究表明它能保護胎兒免受母體免疫系統(tǒng)的免疫反應，在病理狀態(tài)下，HLA-G表達于移植物，病毒感染細胞，腫瘤以及某些自身免疫系統(tǒng)疾病如多樣硬化，提示除了在母胎免疫耐受方面的作用外，HLA-G的抑制功能還涉及移植的相容與接受以及腫瘤，病毒逃避方面。 NK細胞屬于天然免疫系統(tǒng)一類重要的淋巴細胞，在早期防御感染性疾病以及控制腫瘤發(fā)生中發(fā)揮重要作用，NK細胞上表達能夠識別HLA-G的多種受體，從而調(diào)節(jié)NK免疫應答。研究表明ILT-2，ILT4，以及KIR2DIA在抑制NK的殺傷功能事件中起重要作用，本次實驗著重探討ILT2和KIR2DL4這兩個受體與HLA-G相互作用的關(guān)系。得到以下結(jié)論： 1．通過生物工程技術(shù)獲得了重組HLA-G1胞外片段，并原核表達此蛋白，通過親和柱純化蛋白，透析復性，獲得可溶性目的蛋白sHLA-G1。 2．NK-92細胞毒檢測實驗表明原核表達的sHLA-G1通過與NK-92上受體ILT2，KIR2DL4相互作用抑制NK-92對靶細胞K562-GFP的殺傷作用。 3．配體-受體結(jié)合實驗再次驗證了重組sHLA-G1通過與NK-92細胞上受體ILT2及KIR2DL4直接結(jié)合而介導免疫抑制作用。 實驗結(jié)果表明，sHLA-G1能夠與NK-92細胞受體ILT2，KIR2DL4識別并作用，最終抑制其細胞毒性功能。這些結(jié)果為HLA-G在生殖免疫和腫瘤免疫中的作用提供了理論依據(jù)，為免疫抑制新藥開發(fā)，，靶向制藥提供理論基礎，從而為解決器官移植的免疫排斥問題提供了一條新的途徑。
【圖文】：

123452.原核表達sHLA.G的純化及復滌后的包涵體2.純化復性后蛋蛋白4.誘導前全菌蛋白5.蛋白Pu順eationandrenaturationofsHLashing.2.ObjectProteinafterPuerinduetion.4.Wholelysateof性檢測，陽sternbl。幻圖3)表明經(jīng)過純化復性之后即目的蛋白，未經(jīng)誘導的菌

sHLA毛與NK一上受體心RZDL4及IL硯相互作用的研究c。BI此kedILTZCytoto石city%onNK，922420.8218.79，。

本文編號：2646085