【摘要】：流感病毒血凝素(hemagglutinin, HA)位于流感病毒包膜上,在流感病毒吸附和穿入宿主細(xì)胞的過(guò)程中起著重要作用。HA是流感病毒最主要的表面抗原,它能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的中和抗體以中和病毒。HA一般含有五個(gè)抗原決定簇,流感病毒的流行與其抗原結(jié)構(gòu)的變化密切相關(guān)。已有研究表明,流感病毒HA基因DNA疫苗能夠保護(hù)小鼠抗致死量流感病毒攻擊。為了進(jìn)一步了解HA基因抗流感的關(guān)鍵序列,本實(shí)驗(yàn)用PCR的方法分別從5′端或3′端對(duì)A/PR/8/34流感病毒HA基因(全長(zhǎng)1701bp)和B/Ibaraki/2/85流感病毒HA基因(全長(zhǎng)1758bp)進(jìn)行部分缺失,構(gòu)建了一系列編碼部分缺失片段的質(zhì)粒,將這些質(zhì)粒用肌肉注射的辦法免疫小鼠,免疫后的小鼠分別用致死量A/PR/8/34流感病毒或B/Ibaraki/2/85流感病毒攻擊,通過(guò)觀察小鼠的存活率、血清中保護(hù)性抗體水平和肺部病毒量來(lái)尋找HA基因抗流感的關(guān)鍵序列。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:(1)A型流感病毒HA基因從5′端缺失12個(gè)核苷酸或從3′端缺失882個(gè)核苷酸,編碼缺失片段的質(zhì)粒就不能保護(hù)小鼠抗致死量流感病毒攻擊:而從5′端缺失6個(gè)核苷酸或從3′端缺失876個(gè)核苷酸,編碼缺失片段的質(zhì)粒仍然可以保護(hù)小鼠抗致死量流感病毒攻擊。(2)B型流感病毒HA基因從5′端缺失15個(gè)核苷酸或從3′端缺失888個(gè)核苷酸,編碼缺失片段的質(zhì)粒就不能保護(hù)小鼠抗致死量流感病毒攻擊;而從5′端缺失6個(gè)核苷酸或從3′端缺失882個(gè)核苷酸,編碼缺失片段的質(zhì)粒仍然可以保護(hù)小鼠抗致死量流感病毒攻擊。這意味著在核酸疫苗的研究中,我們可以用不到全長(zhǎng)序列一半的關(guān)鍵序列代替全序列,減少一些非必需序列的干擾。
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類(lèi)號(hào)】：R373

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本文編號(hào)：2618907