【摘要】： 大腸桿菌O157：H7感染已經(jīng)成為全球關(guān)注的問題。我國1987年首次從腹瀉病患者糞便標(biāo)本分離到大腸桿菌O157：H7，1999年在某些地區(qū)發(fā)生了大腸桿菌O157：H7引起的暴發(fā)，2000年疫區(qū)有擴(kuò)大的趨勢(shì)。我國O157：H7大腸桿菌的情況已經(jīng)發(fā)生了重大變化。 為了探索我國大腸桿菌O157：H7感染的流行病學(xué)特點(diǎn)，我們使用了聚合酶鏈反應(yīng)、生化反應(yīng)、抗生素敏感實(shí)驗(yàn)、脈沖電場(chǎng)凝膠電泳等分子生物學(xué)方法，對(duì)我國1999-2000年徐州地區(qū)分離到的部分大腸桿菌O157：H7進(jìn)行了分析。研究發(fā)現(xiàn)，1999年在江蘇省徐州市從腹瀉病患者、HUS患者分離的5株產(chǎn)生志賀毒素的大腸桿菌0157：H7菌株，屬于一個(gè)PFGE型。2000年在江蘇省徐州市銅山縣腹瀉病患者的糞便標(biāo)本分離的10株產(chǎn)生志賀毒素的菌株以及從蜣螂腸道分離到的4株產(chǎn)生志賀毒素的大腸桿菌O157：H7，屬于另兩個(gè)PFGE型，和1986、1987、1988年在徐州市腹瀉病患者的糞便標(biāo)本分離的菌株P(guān)FGE圖譜不同。提示1999年的疫情由不同的病原菌引起。 另外使用針對(duì)志賀毒素2及其變種的引物對(duì)進(jìn)行PCR檢測(cè)、細(xì)菌染色體PstⅠ和PCR產(chǎn)物的HaeⅢ、RasⅠ酶切分析，以及PCR產(chǎn)物的序列分析，發(fā)現(xiàn)2000年從江蘇省徐州市患者和家畜家禽糞便標(biāo)本分離的大腸桿菌O157：H7菌株僅僅攜帶slt2vha基因。其致病性質(zhì)粒的限制性酶切 山西醫(yī)科大學(xué) 碩士學(xué)位論文 圖譜也發(fā)生了改變。鑒于江蘇省徐州市1999年的分離菌株攜帶s川和sa。 基因，，可以認(rèn)為該地的優(yōu)勢(shì)菌型發(fā)生了改變，其流行病學(xué)意義有待于進(jìn) 一步證實(shí)。
【圖文】：

Rsal有兩個(gè)酶切位點(diǎn)，Ncl’l沒有酶切位點(diǎn);在使用SLTZe一SLTZf引物對(duì)合成的PCR產(chǎn)物上，刀改elll有一個(gè)酶切位點(diǎn)，乃夕ull有一個(gè)酶切位點(diǎn)(見圖3)。PCR產(chǎn)物的限制性酶切片段和DNA序列分析(見附表)的結(jié)果提示2000年分離菌株均含有SLTZ一C(SLTZ一vh一a)基因，沒有其它是SLTZ毒素。表3:使用PCR合成的孔T2及其變種的基因片段的酶切片段的預(yù)期大小’引物對(duì)」限制性內(nèi)切酶slt2、lt2。1、lt2、。:ltzv。。SLTZ一e!產(chǎn)人Zelll285·161、124{161、124SLTZ一d}Rasl216、69136、80(69)*}216、69…Ncil285285’59、’26…-孔刀。}枷exll3482一6、13212一6、132…pvull323、25323、25250、73、25SLTzf!·

四:致病性質(zhì)粒的限制性內(nèi)切酶分析將1999年和2000年的分離菌株進(jìn)行質(zhì)粒DNA提取，Pstl酶切，在1%的瓊脂糖凝膠電泳，發(fā)現(xiàn)有明顯的區(qū)別(圖4)圖4:大腸桿菌0157:H7菌株的質(zhì)粒DNA的Pstl酶切分析。從左向右:泳道1為分子量標(biāo)準(zhǔn)，泳道2一3分別為大腸桿菌2000年0157:H7菌株，第4為1999年0157:H7菌株。圖4一1:1999年與2000年菌株的溶血素基因的Pstl的southem一blot結(jié)果
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號(hào)】：R378

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 帥領(lǐng);重慶市家畜大腸桿菌O157致病性及外膜蛋白的初步研究[D];西南大學(xué);2008年

本文編號(hào)：2612996