天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

當前位置:主頁 > 醫(yī)學論文 > 病理論文 >

sCD80-Linker-sCD40L融合基因腺病毒載體的構(gòu)建及鑒定

發(fā)布時間:2020-03-31 17:49
【摘要】:目的:構(gòu)建攜帶sCD80-Linker-sCD40L融合基因的復制缺陷型腺病毒載體。方法:在GenBank檢索人CD80、CD40L及IL-12b基因編碼序列,確定擴增區(qū)域,設(shè)計引物。以Trizol抽提人外周血單個核細胞總RNA,使用RT-PCR方法獲得IL-12b信號肽、sCD80、sCD40L等基因的編碼序列,并分別克隆入T載體。重疊PCR構(gòu)建sCD80-Linker-sCD40L融合基因,克隆入T載體。使用Stratagene公司AdEasy XL Adenoviral Vector System試劑盒構(gòu)建攜帶sCD80-Linker-sCD40L融合基因的復制缺陷型腺病毒載體?瞻邔嶒灆z測病毒滴度,Westen blot測定蛋白表達。結(jié)果:經(jīng)測序證實,正確克隆了人IL-12b信號肽、sCD80、sCD40L編碼序列,構(gòu)建了攜帶sCD80-Linker-sCD40L融合基因的T載體,并進一步構(gòu)建了攜帶該融合基因的復制缺陷型腺病毒載體。本實驗病毒滴度為2×10~(10)cfu/ml。Westen blot表明該融合蛋白被正常表達。結(jié)論:成功構(gòu)建了攜帶sCD80-Linker-sCD40L融合基因的復制缺陷型腺病毒載體,可以進一步進行體內(nèi)和體外轉(zhuǎn)染實驗。
【圖文】:

編碼序列,酶切鑒定,編碼序列,T載體


天津醫(yī)科大學碩士研究生論DLZ000(自上至下):2000、1000、750、500、2IL一12bsig編碼序列:87bpsCD80編碼序列:670bpIL一12bsig一sCD80編碼序列:730bpsCD40L編碼序列:479bpIL一12bsig一sCD8o一Linker一sCD4oL編碼序列:1237bDL15000(自上至下):15000、10000、7500、5四、重組T載體酶切鑒定和重組Shuttle載體酶切

酶切圖,骨架,載體,心目


111橄記7J工一~G翻口之,山任.‘。.二哈月二~,直口、門…而.n曰司N例‘二X舊,二妞.誦與pdG一烏下二“八:、oZc,T口口O口,,OC心目TT入擊人幾口孟C幾人口召孔仁T亡了AT了黑49.八TC,入了弓CCC人二Cr亡內(nèi)C戶“口‘腸日‘口瓜口亡TC亡轟,了甲么了么OC亡盔口亡亡甲C了O亡C了幾二幾盆孟已口00了甲甲翻八、、一圖26融合基因IL一12bsig一sCD80一Linker六、重組骨架載體的酶切分析重組骨架電泳檢測,正確克隆可清楚見到3kbs或4.
【學位授予單位】:天津醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2004
【分類號】:R346

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 劉曉平,區(qū)慶嘉,黃洪蓮,王小寧;B7修飾的肝癌細胞疫苗對細胞因子產(chǎn)生的研究[J];中華肝膽外科雜志;2000年01期

2 袁愛力,張智翔,肖麗萍,侯淑琴;B_7基因轉(zhuǎn)染治療原發(fā)性肝癌的實驗研究[J];中華內(nèi)科雜志;1997年01期



本文編號:2609381

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://www.sikaile.net/yixuelunwen/binglixuelunwen/2609381.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶5809a***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com