【摘要】：目的 探索建立一種快速、敏感、特異檢測深部真菌方法。 方法 以5′端標記有生物素來源于真菌28S rDNA保守序列的真菌通用引物對三屬九種真菌進行PCR擴增后，，分別進行瓊脂糖電泳和與5′端標記有地高辛的真菌通用探針或種特異性探針在PCR儀上90℃2分鐘，55℃1分鐘進行液相雜交，并將雜交產(chǎn)物固定于鏈親和素包埋的微孔板中，經(jīng)酶標抗地高辛抗體結(jié)合，底物顯色。 結(jié)果 1．真菌通用引物可廣譜地擴增九種真菌，擴增片段為260bp，與文獻報告一致。2．真菌通用探針可有效地檢測九種真菌PCR擴增產(chǎn)物。3．真菌PCR產(chǎn)物經(jīng)微孔板液相雜交法檢測較瓊脂糖電泳敏感32倍，分別為32fg、1fg。4．白色念珠菌種特異探針、新生隱球菌種特異探針、煙曲霉種特異探針在微孔板液相雜交過程中表現(xiàn)高度的特異性。5．微孔板液相雜交可同時檢測多種深部真菌。6．微孔板液相雜交重復性良好。 結(jié)論 微孔板液相雜交可快速、簡便、敏感、特異地檢測深部真菌，可成為臨床早期診斷深部真菌感染有效方法之一。
【學位授予單位】：昆明醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R379

【引證文獻】

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1 夏曉輝;豬附紅細胞體PCR-ELISA檢測方法的建立及初步應用[D];延邊大學;2013年

本文編號：2594912