【摘要】：目的:通過檢測端粒酶活性(TMA)在原代大鼠邊緣群及非邊緣群肝細(xì)胞中表達差異,探討邊緣群細(xì)胞是否具有肝臟干細(xì)胞的部分特征.方法:原位兩步膠原酶法分離大鼠肝細(xì)胞.應(yīng)用流式熒光激活細(xì)胞分選術(shù)(FACS)將肝細(xì)胞分成邊緣群(SP)及非邊緣群(Non-SP),并定量分析兩群細(xì)胞中TMA水平.結(jié)果:存在SP細(xì)胞并占細(xì)胞總體2.1%,SP細(xì)胞TMA高于Non-SP細(xì)胞(28.1±1.3vs2.0±0.2TPG,P0.01).結(jié)論:大鼠邊緣群肝細(xì)胞具有更強的自我更新能力,即具有干細(xì)胞的部分特征.
【圖文】：

角(P3)另有小部分散點聚集(低Hoechst),而維拉帕米拮抗組無此區(qū)域,即SP細(xì)胞. SP占受檢細(xì)胞的(2. 1±0. 2)% (圖1).2.3　SP細(xì)胞及Non2SP細(xì)胞TMA檢測　①定量檢測: SP細(xì)胞TMA為(28. 1±1. 3) TPG,Non2SP細(xì)胞TMA為(2. 0±0. 2) TPG. SP細(xì)胞TMA水平顯著高于Non2SP細(xì)胞(t=50. 440,P<0. 01).②聚丙烯酰胺凝膠電泳: SP細(xì)胞電泳呈陽性,Non2SP細(xì)胞電泳呈陰性(圖2).A:無維拉帕米組; B:加入維拉帕米組.圖1　流式細(xì)胞儀二維散點圖1: 1000個端粒酶陽性細(xì)胞對照; 2: SP細(xì)胞; 3: SP細(xì)胞熱失活處理;4: Non-SP細(xì)胞; 5:端粒酶陰性對照.圖2　SP及Non-SP細(xì)胞PCR產(chǎn)物聚丙烯酰胺凝膠電泳3　討論干細(xì)胞是一類具有自我更新和多向分化潛能的細(xì)胞,多種干細(xì)胞均表現(xiàn)出較強的端粒酶活性[2],而端粒酶對于維持干細(xì)胞的自我更新、多向分化潛能以及抗衰老均有重要意義[3].近年來研究發(fā)現(xiàn),一些細(xì)胞對DNA結(jié)合染料Hoechst33342有特異性排出,結(jié)合FACS分析

于Non2SP細(xì)胞(t=50. 440,P<0. 01).②聚丙烯酰胺凝膠電泳: SP細(xì)胞電泳呈陽性,Non2SP細(xì)胞電泳呈陰性(圖2).A:無維拉帕米組; B:加入維拉帕米組.圖1　流式細(xì)胞儀二維散點圖1: 1000個端粒酶陽性細(xì)胞對照; 2: SP細(xì)胞; 3: SP細(xì)胞熱失活處理;4: Non-SP細(xì)胞; 5:端粒酶陰性對照.圖2　SP及Non-SP細(xì)胞PCR產(chǎn)物聚丙烯酰胺凝膠電泳3　討論干細(xì)胞是一類具有自我更新和多向分化潛能的細(xì)胞,多種干細(xì)胞均表現(xiàn)出較強的端粒酶活性[2],而端粒酶對于維持干細(xì)胞的自我更新、多向分化潛能以及抗衰老均有重要意義[3].近年來研究發(fā)現(xiàn),一些細(xì)胞對DNA結(jié)合染料Hoechst33342有特異性排出,結(jié)合FACS分析,可得到低熒光并表現(xiàn)為邊緣性聚集的SP細(xì)胞,這已成為一種經(jīng)典的分離造血干/祖細(xì)胞的方法[4-5],并在小鼠肺、皮膚、骨骼肌、乳腺、胰島細(xì)胞及人類皮膚、角膜等組織的干細(xì)胞的分離中被成功應(yīng)1022第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(J FourthMilMedUniv)2007

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 沈建偉;王繼亮;;大鼠肝卵圓細(xì)胞增殖模型的重建及免疫組織化學(xué)定位[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年03期

2 李寶杰;王新紅;曲波;;肝細(xì)胞癌變過程中cyclin D_1的異常表達與端粒酶活性的相關(guān)分析及意義[J];世界華人消化雜志;2003年11期

3 王天瑞;郭彩虹;南海玉;李高鈺;恒淑卿;;TNT對大鼠LD_(50)及肝臟特異病變觀察[J];山西醫(yī)藥雜志;1986年02期

4 楊少軍,鄭昱,馬嵐;疏肝化脂膠囊對脂肪肝大鼠肝臟形態(tài)學(xué)的影響[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2005年10期

5 王雪蓮,岳蓓,吳霞,李樹臣;乙型肝炎患者外周血單個核細(xì)胞端粒酶活性的研究[J];實用肝臟病雜志;2005年04期

6 馮愛娟,陳東風(fēng);肝細(xì)胞L-FABP、FATP4在大鼠非酒精性脂肪性肝病形成中的表達及意義[J];中華肝臟病雜志;2005年10期

7 吳靜;鄭浩;江瑛;蘇文;侯金佟;張華;;非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝臟血管內(nèi)皮生長因子表達的意義[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2010年08期

8 羅萍,章亞P,高蓉;富馬毒素B1誘導(dǎo)的小鼠肝細(xì)胞凋亡及端粒酶活性改變[J];寄生蟲病與感染性疾病;2004年02期

9 陳世清;劉杞;孫航;唐琳;鄧建川;;二甲雙胍對胰島素抵抗大鼠脂肪肝的影響[J];中華肝臟病雜志;2005年12期

10 蔡虹;翁坤榮;;硒與端粒酶[J];廣東微量元素科學(xué);2006年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 陳始明;徐勇;陳晨;王燕;花清泉;陶澤璋;;端粒酶受抑制后喉癌細(xì)胞端粒延伸替代途徑關(guān)鍵蛋白的表達變化[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 張夢真;喬玉環(huán);史惠蓉;;宮頸癌脫落細(xì)胞端粒酶活性的檢測[A];中國抗癌協(xié)會婦科腫瘤專業(yè)委員會第六次全國學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

3 劉華;欒芳;申紅玉;鞠瑛;馬春紅;;HBV PreS2蛋白通過促進端粒酶活性加速肝癌細(xì)胞的生長[A];中國免疫學(xué)會第五屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

4 莫雪安;張德敏;周禮圓;;重癥肌無力端粒酶活性及多項生物學(xué)指標(biāo)與臨床相關(guān)性分析[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

5 張德敏;莫雪安;;自身免疫性疾病患者端粒酶活性及免疫學(xué)意義[A];第三屆全國少數(shù)民族地區(qū)神經(jīng)病學(xué)會論文匯編[C];2005年

6 陳鳴;楊蓓蓓;張行;;端粒酶活性對喉癌、喉咽癌預(yù)后影響[A];2006年浙江省耳鼻咽喉科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

7 文忠;賴肖芬;申聰香;于超生;;PinX1基因靶向抑制端粒酶活性誘導(dǎo)鼻咽癌細(xì)胞凋[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

8 李福才;王淑云;李嬋媛;袁海明;李魏;李子政;郭星;李曉渝;;MKRN Ⅰ基因和HSP90基因在喉癌組織中表達情況的研究[A];第六次全國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會議文摘匯編[C];2005年

9 秦建領(lǐng);張霞;王國斌;郭勇;;端粒酶活性及p53蛋白在肺癌中的表達及其與預(yù)后關(guān)系[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會腫瘤專業(yè)委員會第六次學(xué)術(shù)年會暨省級繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2005年

10 鐵軼;焦虎平;付漢江;朱捷;邢瑞云;鄭曉飛;;利用酵母三雜交技術(shù)篩選端粒酶RNA相互作用蛋白[A];第四屆全國RNA進展研討會論文集[C];2005年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 唐永煌;肝病治療宜趨利避害[N];健康時報;2005年

2 趙文;“古藺肝蘇”可改善肝細(xì)胞功能[N];中國醫(yī)藥報;2007年

3 上官婉兒;預(yù)防藥物傷肝[N];四川科技報;2006年

4 蔡fg東;酒精是肝炎病毒的“幫兇”[N];家庭醫(yī)生報;2005年

5 健康時報記者 鄭帆影;乙肝攜帶者多補維生素[N];健康時報;2007年

6 北京地壇醫(yī)院肝病專家 崔振宇邋口述 健康時報記者 戴志悅 整理;護肝別“大動肝火”[N];健康時報;2007年

7 蔡鐵勇（主任醫(yī)師）;要了解損害肝臟的因素[N];上海中醫(yī)藥報;2006年

8 呂萍;如何認(rèn)識肝炎主要癥狀的出現(xiàn)[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2008年

9 劉彬;乙肝需要復(fù)查的化驗項目有哪些[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2005年

10 祝閱武;茴三硫的抗氧化作用[N];健康報;2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 陳穎;中心體與端粒酶在大鼠肝癌與小鼠皮膚癌發(fā)生中的動態(tài)變化及相關(guān)性分析[D];山東大學(xué);2006年

2 劉慧;羊水來源干細(xì)胞的生物學(xué)特性分析及其向肝細(xì)胞誘導(dǎo)分化的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2009年

3 任秉新;大菱鲆（Scophthalmus maximus）肝細(xì)胞體外培養(yǎng)、紅體病虹彩病毒體外繁殖條件及病毒疫苗研制的研究[D];中國海洋大學(xué);2009年

4 孫玲;hTERT及c-myc基因反義寡核苷酸對HL-60細(xì)胞的抑制作用[D];鄭州大學(xué);2005年

5 謝萬灼;高三尖杉酯堿對白血病細(xì)胞凋亡相關(guān)基因及端�！肆Ｃ傅挠绊懷芯縖D];浙江大學(xué);2000年

6 馬麗杰;鎖陽多糖延緩衰老的作用及端粒酶調(diào)控機制研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2009年

7 梁旭競;永生化人肝細(xì)胞和轉(zhuǎn)人端粒酶基因臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化的研究[D];暨南大學(xué);2009年

8 戴小明;匹立尼酸（Wy-14643）對大鼠移植肝冷保存再灌注損傷保護作用的實驗研究[D];中南大學(xué);2007年

9 陳華潔;端粒酶在硒拮抗鎘致癌作用中的調(diào)控機制研究[D];華中科技大學(xué);2006年

10 王石;吸煙相關(guān)劑量鎘致大鼠肝臟損傷的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 劉海亮;原代大鼠邊緣群肝細(xì)胞的分離及端粒酶活性分析[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

2 李慧敏;辛硫磷對大鼠肝臟毒性的研究[D];揚州大學(xué);2007年

3 何芳;甘油二酯食用油對大鼠非酒精性脂肪肝預(yù)防作用的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

4 栗彥琪;褪黑素對大鼠肝移植缺血再灌注損傷保護機制的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2008年

5 胡群;彗星試驗檢測冷凍大鼠肝臟和肌肉細(xì)胞輻照后DNA損傷研究[D];浙江大學(xué);2006年

6 王強;不同治法方藥對大鼠脂肪肝kupffer細(xì)胞ERK1/2蛋白活性的影響[D];暨南大學(xué);2006年

7 周朕;老年肺炎患者外周血單個核細(xì)胞端粒酶活性變化[D];華中科技大學(xué);2006年

8 李彥涵;EB病毒轉(zhuǎn)化的B淋巴細(xì)胞永生細(xì)胞株長期傳代后的遺傳穩(wěn)定性[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

9 葉俊;尖銳濕疣組織中端粒酶活性和端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達的研究[D];浙江大學(xué);2005年

10 崔穎;堿性氨基酸對Hela細(xì)胞增殖及其端粒酶活性的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

，

本文編號：2580029