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熱休克條件下誘導(dǎo)型HSP70對人胚肺二倍體細胞衰老的影響

發(fā)布時間:2020-02-06 14:15
【摘要】:目的:探討在熱休克條件下,人胚肺二倍體細胞MRC-5株誘導(dǎo)型熱休克蛋白70(HSP70)在細胞水平的表達機制,以及對MRC-5細胞衰老的影響。 方法:用熱休克處理誘導(dǎo)MRC-5細胞HSP70的表達,同時采用HSP70反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染MRC-5細胞做對照,分別置42℃恒溫水浴30min、1h、2h、4h,及每日水浴1h共3d和5d,各組細胞均在37℃復(fù)溫,于復(fù)溫后4h固定。流式細胞儀測定誘導(dǎo)型HSP70的表達及細胞凋亡,黃嘌呤氧化酶法測定細胞超氧化物歧化酶(SOD)總活力,衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色及顯微鏡觀察并采圖。 結(jié)果:(1)在熱休克條件下的不同時相,MRC-5細胞誘導(dǎo)型HSP70的表達隨熱處理時間延長而增加,且均高于同時間點對照組水平,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)在熱休克條件下的不同時相,MRC-5細胞SOD總活力隨熱處理時間延長而增高,均高于同時間點對照組水平,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3)經(jīng)反義寡核苷酸處理的細胞,在熱處理第三天及第五天,β-半乳糖苷酶染色陽性表達率高于實驗組。 結(jié)論:熱處理方法可成功誘導(dǎo)MRC-5細胞表達HSP70,隨熱處理時間延長,MRC-5細胞誘導(dǎo)型HSP70表達增加,誘導(dǎo)型HSP70可能通過增強細胞內(nèi)源性抗氧自由基能力,影響MRC-5細胞的衰老進程。
【圖文】:

超氧化物歧化酶,氧化酶,熱處理時間,正義


采用黃嗓嶺氧化酶原理檢測各組超氧化物歧化酶總活力,結(jié)果顯示,正義組與單純熱處理組隨熱處理時間延長,細胞SOD總活力增加,,且高于同時相的反義組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<.005)。(見表3,圖3)

碩士論文


級碩士論文附
【學(xué)位授予單位】:四川大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2005
【分類號】:R363

【參考文獻】

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本文編號:2576916

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