【摘要】： 神經(jīng)干細胞的定向誘導分化是當前神經(jīng)干細胞研究領域的難點和熱點。以往的研究已經(jīng)證明激活素可以促進神經(jīng)細胞存活,具有神經(jīng)營養(yǎng)因子的作用。但是激活素對神經(jīng)干細胞向神經(jīng)細胞的分化誘導作用以及其誘導機制仍不清楚。 在本研究中,我們詳細探討了激活素A和bFGF對胚胎14天的胎腦紋狀體神經(jīng)干細胞及傳代培養(yǎng)的HT22細胞向酪氨酸羥化酶(TH)陽性細胞的分化誘導作用,結果表明,激活素A和bFGF可協(xié)同作用使神經(jīng)干細胞及傳代培養(yǎng)的HT22細胞中TH蛋白表達增加,而且同樣使TH mRNA水平和啟動子活性增強。 同時我們還探討了激活素A和bFGF對胚胎14天的胎腦中隔神經(jīng)干細胞及傳代培養(yǎng)的HT22細胞向膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)陽性細胞的分化誘導作用,結果表明,激活素A和bFGF可協(xié)同作用使神經(jīng)干細胞及傳代培養(yǎng)的HT22細胞中ChAT mRNA表達增加,并可增強ChAT啟動子活性。 我們進一步利用免疫印跡法檢測了此協(xié)同作用的機制,結果顯示,激活素A和bFGF處理后細胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶1和2(ERK1/ERK2)MAPK以及Smad均被明顯激活。而且我們還發(fā)現(xiàn)U0126(一個特異的ERK-激活激酶MEK-1/2的抑制物)能夠阻斷激活素A和bFGF誘導的ERK1/2磷酸化、向核內(nèi)移行以及TH啟動子的活性,而SB203508(P38激酶抑制物)則無此效果。綜上所述,這些結果提示激活素A介導的信號可以和bFGF信號共同作用,通過選擇性激活ERK型MAPK和Smad3信號來誘導小鼠紋狀體和HT-22細胞中TH的表達,提示激活素A和bFGF可在神經(jīng)系統(tǒng)共同作用調(diào)節(jié)特異性神經(jīng)細胞的分化。
【圖文】：

33圖 1.激活素 A 和 bFGF 誘導 E14 紋狀體細胞中 TH 的表達A、D、G、J 是用 TH 抗體染色的結果B、E、H、K 是用 TuJ1 抗體染色的結果C、F、I、L 是 TH 抗體及 TuJ1 抗體染色的重疊結果ig. 1. Activin A and bFGF induce TH-immunoreactivity in the E14 striatal cells.

二、激活素 A 和 bFGF 對 HT22 細胞的中 TH 的影響為了驗證激活素 A 和 bFGF 對神經(jīng)細胞中 TH 表達的協(xié)同作否在神經(jīng)細胞系中同樣存在，，我們進一步檢測了激活素 A 和 bF小鼠海馬神經(jīng)細胞系 HT22 細胞中 TH 表達的影響。結果發(fā)現(xiàn)，活素 A 和 bFGF 處理 36 小時后，大多數(shù)的多角形細胞變成了高熟的神經(jīng)細胞形態(tài)，包括突觸變長、細胞體變小、細胞與細胞之過突觸形成網(wǎng)絡。提取胞漿蛋白，進行免疫印跡分析，結果如圖所示，激活素 A 和 bFGF 協(xié)同誘導 TH 表達,與未經(jīng)刺激的對照組TH 的表達量增加了 9 倍（見圖 2B）。A
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R329

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 丁英,曾園山;神經(jīng)干細胞的特性及其在修復脊髓損傷中的應用前景[J];解剖學研究;2001年04期

2 左明雪;神經(jīng)干細胞——治療腦神經(jīng)性疾病的希望(1)[J];生物學通報;2002年01期

3 張澤舜,歷俊華,張亞卓,王忠誠;神經(jīng)干細胞接種密度對其增生和分化的影響[J];首都醫(yī)科大學學報;2003年02期

4 孟凡剛,吳承遠,劉玉光;神經(jīng)干細胞腦內(nèi)移植后的增殖、遷移與分化[J];實用臨床醫(yī)藥雜志;2003年03期

5 張麗;顧振倫;秦正紅;;神經(jīng)干細胞分化為神經(jīng)元的基因調(diào)控(英文)[J];神經(jīng)科學通報(英文版);2006年05期

6 戴宜武;神經(jīng)干細胞發(fā)育過程中分化、遷移調(diào)控機制研究現(xiàn)狀[J];中華神經(jīng)醫(yī)學雜志;2003年02期

7 卞林,惠國楨,陸華,蔣云召,苗宗寧,王玲,蔣震偉;正常成人腦脊液誘導人胚來源的神經(jīng)干細胞分化的實驗研究[J];實用臨床醫(yī)藥雜志;2003年03期

8 鄭志z

本文編號：2573695