【摘要】：【目的】研究大鼠皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的分離培養(yǎng)及鑒定的方法�！痉椒ā咳PF級(jí)體質(zhì)量60~80 g的SD大鼠3只,運(yùn)用骨髓貼壁法及膠原酶消化皮質(zhì)骨法培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞,進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、體外增殖能力考察、細(xì)胞周期分析、細(xì)胞表面抗原免疫熒光鑒定,并采用茜素紅染色和油紅O染色鑒定所培養(yǎng)細(xì)胞的成骨與成脂分化潛能�！窘Y(jié)果】膠原酶消化皮質(zhì)骨法及骨髓貼壁法均能有效分離純化大鼠MSCs,經(jīng)形態(tài)學(xué)、細(xì)胞表面抗原免疫熒光鑒定、成骨及成脂分化能力檢測(cè)證實(shí)為間充質(zhì)干細(xì)胞�！窘Y(jié)論】自骨髓及皮質(zhì)骨均能實(shí)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞的分離純化,但皮質(zhì)骨間充質(zhì)干細(xì)胞來源廣泛,原代不受血細(xì)胞干擾,是骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞的很好補(bǔ)充。
【圖文】：

ぶ使搶叢?（圖1－F）間充質(zhì)干細(xì)胞呈梭形生長(zhǎng)，少數(shù)呈多角形，細(xì)胞核染成紫紅色。2．2生長(zhǎng)曲線2種方法培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞P1代細(xì)胞生長(zhǎng)曲線相似，圖2結(jié)果顯示：細(xì)胞3～7d處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，之后細(xì)胞生長(zhǎng)到達(dá)平臺(tái)期。2．3細(xì)胞周期流式細(xì)胞儀細(xì)胞周期分析結(jié)果顯示：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞84．91％處于G0／G1期（圖3－A），皮質(zhì)骨間充質(zhì)干細(xì)胞88．04％處于G0／G1期（圖3－B），表明骨髓與皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細(xì)胞都具有較強(qiáng)增殖潛能。圖2P1代骨髓來源與皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)曲線Figure2GrowthcurveofP1generationofbonemarroworiginandcorticalbonederivedmesenchymalstemcellsDt／d13579第3期453

廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)2014年第3期0．60．40．20－0．2－0．4－0．6－0．8相關(guān)系數(shù)IL－4（pg／mL）IFN－γ（pg／mL）Th1／Th2IL－17（pg／mL）T－betGATA－3T－bet／GATA－3RORgammat①①①①①①①FEV0．3（mL）FEV0．3／FVC（％）PEF（mL／s）肺功能參數(shù)圖3肺功能參數(shù)與其他指標(biāo)相關(guān)性分析Figure3Correlationoflungfunctionindexeswithotherindicators（“SD大鼠皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定”的彩圖，正文見第453頁）骨髓來源皮質(zhì)骨來源原代第2天第3代第2代Giemsa染色圖1不同時(shí)期骨髓來源和皮質(zhì)骨來源間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察（×100）Figure1Morphologyofbonemarroworiginandcorticalbonederivedmesenchymalstemcellsatdifferentphases（×100）①P＜0．05（“基于T－bet、GATA－3、RORgammat調(diào)控Th細(xì)胞研究六味補(bǔ)氣膠囊對(duì)慢性阻塞性肺病大鼠肺功能的影響”的彩圖，，正文見第407頁）494

【參考文獻(xiàn)】

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1 鄭景輝;李勇華;王麗萍;簡(jiǎn)維雄;黃獻(xiàn)平;袁肇凱;;不同血清微環(huán)境對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)的影響[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2010年14期

2 李曉峰;趙勁民;蘇偉;崔向榮;羅世興;馬愛國(guó);;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年10期

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