【摘要】： 人組織激肽釋放酶是一種絲氨酸蛋白酶。它在人體內(nèi)重要的生理作用說明它有可能成為治療腎臟病的有效藥物。此外,它在血液中的含量與缺血性腦中風(fēng)的相關(guān)性研究顯示它可以作為該疾病體外診斷的重要指標(biāo)。 本論文選用Sf-9及Hi-5兩種昆蟲細(xì)胞為載體,用基因工程的手段表達(dá)制備了人組織激肽釋放酶原。對兩種昆蟲細(xì)胞的無血清適應(yīng)及懸浮適應(yīng)條件進(jìn)行了系統(tǒng)研究,將基因工程人組織激肽釋放酶原的表達(dá)量提高到25mg/L。對載有人組織激肽釋放酶cDNA的CHO細(xì)胞進(jìn)行了無血清懸浮適應(yīng)。 采用色譜技術(shù)對細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行了分離純化。探討了不同流動相組成、pH值、離子強(qiáng)度以及分離介質(zhì)的影響。分離純化后的樣品經(jīng)檢測為純品,分子量約為40961Da,回收率約為57%。 對檢測未知樣本中組織激肽釋放酶含量的ELISA方法進(jìn)行了系統(tǒng)優(yōu)化。開發(fā)了缺血性腦中風(fēng)早期診斷試劑盒。考查了試劑盒的各種指標(biāo),并將其用于660例健康人及21例腦中風(fēng)患者血液中組織激肽釋放酶含量的檢測。此外,與大連醫(yī)科大學(xué)附屬二院合作,用分離純化后得到的人組織激肽釋放酶原對糖尿病腎病大鼠進(jìn)行了實驗。結(jié)果顯示,組織激肽釋放酶對腎臟具有較好的保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：中國科學(xué)院研究生院（大連化學(xué)物理研究所）
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：R341

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 尹建梅,張善春,張麗華;彈性酶和胰激肽釋放酶對糖尿病腎病的療效觀察[J];新醫(yī)學(xué);1998年05期

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本文編號：2553056