【摘要】：目的：探討人骨髓間充質干細胞是否具有向胰島β樣細胞分化的潛能，能否用于治療1型糖尿病。 方法：在無菌條件下，通過羥乙基淀粉分離法及貼壁篩選法從人骨髓中分離間充質干細胞，進行體外培養(yǎng)、傳代，并對其表面標記進行流式細胞術檢測。取第3代人骨髓間充質干細胞(hBMMSCs)用表皮生長因子、β-巰基乙醇和高糖培養(yǎng)基誘導其向胰島β樣細胞分化。觀察hBMMSCs在誘導前后的形態(tài)變化；用RT-PCR法檢測誘導前后的細胞是否表達胰島相關基因；用胰島素免疫細胞化學染色及免疫熒光法檢測胰島素的表達；用雙硫腙染色鑒定胰島β樣細胞；化學發(fā)光法檢測誘導前及誘導后的細胞分泌胰島素的情況；胰島素釋放實驗評價誘導后細胞的功能；制作糖尿病小鼠模型，并將誘導后的細胞移植到小鼠腎被膜下，觀察血糖變化，摘除其腎臟和胰腺進行免疫組化檢測。 結果：采用羥乙基淀粉分離法及貼壁篩選法對hBMMSCs進行體外培養(yǎng)，可以得到形態(tài)均一的梭形hBMMSCs，其細胞表面標記CD34、CD45、CD14不表達，而CD29、CD44呈陽性表達。hBMMSCs經誘導分化后，細胞逐漸變圓，并聚集成團；RT-PCR法檢測顯示誘導后的細胞表達部分胰島相關基因，如pdx-1、insulin、glut-2等等，，不表達glucagon；胰島素免疫細胞化學及免疫熒光檢測均表明細胞團內的細胞呈胰島素染色陽性反應；雙硫腙染色也為陽性；化學發(fā)光免疫分析法結果表明經誘導的細胞團能分泌胰島素，具有糖反應性，但稍弱；誘導后的細胞移植到糖尿病小鼠體內后，小鼠的血糖逐漸下降：移植物的胰島素免疫組織化學染色顯示小鼠腎被膜下有胰島素陽性細胞。而注射PBS組和單純STZ造模組糖尿病小鼠則持續(xù)高血糖。 結論：人骨髓間充質干細胞可在體外被定向誘導分化為胰島β樣細胞，而且這種胰島β樣細胞在1型糖尿病小鼠體內具有降血糖的作用。
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