【摘要】： 目的:觀察腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、干擾素-γ(IFN-γ)誘導人角質(zhì)形成細胞系(Hacat細胞)β-防御素(hBD)表達情況,探討人角質(zhì)形成細胞hBD誘導表達途徑的可行性,了解β-防御素表達調(diào)控的基本規(guī)律,為指導β-防御素的進一步研究和開發(fā)提供理論依據(jù)。 方法:將Hacat細胞培養(yǎng)于含有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中,取生長旺盛的細胞分為八組:12小時對照組、24小時對照組、TNF-α干預12小時組、TNF-α干預24小時組、IFN-γ干預12小時組、IFN-γ干預24小時組、TNF-α+IFN-γ干預12小時組、TNF-α+IFN-γ干預24小時組,將40ng/ml TNF-α、40ng/ml IFN-γ、40ng/ml TNF-α+40ng/mlIFN-γ分別加入相應(yīng)的培養(yǎng)瓶中與Hacat細胞共培養(yǎng)12小時、24小時后提取總RNA,RT-RCR(反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng))方法檢測hBD-2mRNA、hBD-3mRNA的表達,使用SPSS統(tǒng)計軟件(版本:11.0)對實驗數(shù)據(jù)進行析因設(shè)計的方差分析。 結(jié)果:HBD-2mRNA、hBD-3mRNA在Hacat細胞中均有微量表達;TNF-α干預組Hacat細胞中hBD-2mRNA、hBD-3mRNA相對對照組表達增高(p＜0.05),且TNF-α干預12h時Hacat細胞中hBD-2mRNA、hBD-3mRNA的表達量高于干預24h時的表達量;IFN-γ干預組Hacat細胞中hBD-3mRNA相對對照組表達增高(p＜0.05),且IFN-γ干預12h時Hacat細胞中hBD-3mRNA的表達量高于干預24h時的表達量,但IFN-γ對Hacat細胞中hBD-2mRNA的表達無作用(p＞0.05):在誘導Hacat細胞hBD-2mRNA、hBD-3mRNA表達的過程中,時間、TNF-α、IFN-γ三因素具有交互作用(p＜0.05),TNF-α與IFN-γ聯(lián)合干預Hacat細胞12h時,hBD-2mRNA、hBD-3mRNA表達量最高。 結(jié)論:人角質(zhì)形成細胞可以產(chǎn)生微量hBD-2、hBD-3,TNF-α能夠誘導人角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生hBD-2和hBD-3,且具有時間依賴性,而IFN-γ僅能誘導人角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生hBD-3,且具有時間依賴性,同時在誘導人角質(zhì)形成細胞hBD-2、hBD-3表達的過程中,時間、TNF-α、IFN-γ三因素具有交互作用,人角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生的和誘導產(chǎn)生的β-防御素可能有助于抗感染、抗腫瘤、提高皮膚的防御能力。
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【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R363

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本文編號：2489199