【摘要】：目的：利用力學加載裝置對小鼠骨髓間充質干細胞系(D1細胞)加載不同拉伸應變，探討力學因素對干細胞向成骨細胞分化的影響及力學信號轉導機制。 方法：在成骨細胞誘導體系條件下，D1細胞施加不同的拉伸應變后，采用免疫組化方法、RT-PCR技術、Flou-3-AM Ca~(2+)染色方法及激光共聚焦技術。分析與成骨細胞分化有關的OSX(Osterx)、骨鈣蛋白(Osteocalcin OCN)基因、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)、Ⅰ型膠原(type Ⅰ collagen，COLl)、OCN蛋白的表達；對細胞內ca~(2+)水平及微絲結構進行考察；利用SB203580(p38MAPK特異抑制劑)、PD98059(MEK-1／2MAPK特異抑制劑)、LY294002(PI_3KS特異抑制劑)、細胞松弛素B(微絲結構阻斷劑)、EGTA(Ca~(2+)螯合劑)信號阻斷劑探討力學信號傳導的信號途徑。 結果：間充質干細胞向成骨細胞分化過程中，拉伸應變能促進細胞ALP、Ⅰ型膠原、OCN蛋白的表達，，激活與成骨細胞分化起關鍵作用的OSX、OCN基因；細胞受到應變作用時，骨架結構微絲發(fā)生斷裂和重排，同時細胞生長方向發(fā)生相應改變；拉伸應變能促進干細胞內Ca~(2+)水平的增加和鈣火花的釋放；力學信號的傳導與磷酸化的磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositol-3-kinases，PI_3Ks)信號通路、細胞骨架結構微絲、細胞內Ca~(2+)水平有密切關系。 結論：不同拉伸應變能促進間充質干細胞向成骨細胞分化；力學信號通過Ca~(2+)信號、細胞微絲結構以及PI_3Ks信號途徑引起細胞的應答反應和生物學效應。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of mechanical factors on the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells (D1 cells) into osteoblasts and the mechanism of mechanical signal transduction. Methods: under the condition of osteoblast induction system, D1 cells were subjected to different tensile strain. Immunohistochemistry, RT-PCR, Flou-3-AM Ca~ (2) staining and laser confocal technique were used. The expression of OSX (Osterx), osteocalcin (Osteocalcin OCN) gene, alkaline phosphatase (alkaline phosphatase,ALP) and collagen 鈪

本文編號：2377185