【摘要】：目的研究miR-124a參與抑制TGFBR1和BMPR1B的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控,及其對(duì)人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞(PMSCs)向胰腺祖細(xì)胞分化的影響。方法用慢病毒過(guò)表達(dá)miR-124a前體,建立PMSCs中過(guò)表達(dá)miR-124a細(xì)胞模型;轉(zhuǎn)染miR-124a反義寡核苷酸,抑制miR-124a表達(dá);real-time PCR分析miR-124a與其調(diào)控的靶基因TGFBR1和BMPR1B的表達(dá)調(diào)控關(guān)系;real-time PCR、Western blot和免疫熒光化學(xué)染色檢測(cè)miR-124a過(guò)表達(dá)后,胰腺祖細(xì)胞特征基因和蛋白表達(dá)變化。結(jié)果 PMSCs中過(guò)表達(dá)和抑制表達(dá)miR-124a,能反向調(diào)控其靶基因TGFBR1和BMPR1B的表達(dá);miR-124a過(guò)表達(dá)后,胰腺祖細(xì)胞特異性基因PDX-1、Nkx6.1、NGN3和β細(xì)胞特征基因Insulin的表達(dá)量顯著上升(P0.05),PDX-1和Insulin的蛋白表達(dá)水平也同樣升高。結(jié)論 miR-124a可能通過(guò)抑制TGFBR1的表達(dá),阻斷TGF-β/TGF-βR信號(hào),使細(xì)胞發(fā)生間質(zhì)上皮轉(zhuǎn)化,并可能通過(guò)抑制BMPR1B的表達(dá)阻礙細(xì)胞向成骨方向分化,從而指導(dǎo)胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞向胰腺祖細(xì)胞分化。
[Abstract]:Objective to study the role of miR-124a in inhibiting the posttranscriptional regulation of TGFBR1 and BMPR1B and its effect on the differentiation of human placental mesenchymal stem cells (PMSCs) into pancreatic progenitor cells. Methods Lentivirus overexpression of miR-124a precursor was used to establish miR-124a cell model of overexpression in PMSCs, and miR-124a antisense oligodeoxynucleotides were transfected to inhibit miR-124a expression. Real-time PCR was used to analyze the relationship between the expression of miR-124a and its target gene TGFBR1 and BMPR1B, and real-time PCR,Western blot and immunofluorescence staining were used to detect the expression of characteristic genes and proteins in pancreatic progenitor cells after miR-124a overexpression. Results overexpression and inhibition of miR-124a, in PMSCs could reverse regulate the expression of TGFBR1 and BMPR1B. After overexpression of miR-124a, the expression of pancreatic progenitor cell specific gene (PDX-1,Nkx6.1,NGN3) and 尾 cell characteristic gene (Insulin) increased significantly (P0.05), and the protein expression of PDX-1 and Insulin also increased. Conclusion miR-124a may inhibit the expression of TGFBR1, block the signal of TGF- 尾 / TGF- 尾 R, and induce the interstitial epithelium transformation of the cells, and inhibit the differentiation of the cells to osteogenesis by inhibiting the expression of BMPR1B. So as to guide the differentiation of placental mesenchymal stem cells into pancreatic progenitor cells.
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院干細(xì)胞研究所生育力保持教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：寧夏自然科學(xué)基金(NZ13162)
【分類號(hào)】：R329.2

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本文編號(hào)：2362411