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熱應激預處理對熱應激小鼠以及體外培養(yǎng)的神經(jīng)元的保護作用及機制

發(fā)布時間:2018-08-25 18:46
【摘要】:目的 高溫環(huán)境對人體生理功能的影響是廣泛的,包括熱代謝、能量代謝、水鹽代謝、神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等;高溫還能夠誘導體外培養(yǎng)的皮層神經(jīng)元發(fā)生凋亡。熱應激預處理可以明顯的提高機體抗耐熱能力。本實驗通過:1.觀測不同的熱應激預處理方式對小鼠行為學的影響,建立間歇性熱應激預處理模型。2.觀測熱應激預處理對小鼠行為學的影響,揭示熱應激預處理對小鼠腦體功能的影響。3.檢測熱應激預處理對急性熱應激小鼠腦組織NOS活力、nNOS蛋白和基因表達以及行為學的影響。觀測熱應激預處理對體外培養(yǎng)的神經(jīng)元細胞熱應激后的細胞形態(tài)、突出長度以及細胞活性的影響,揭示熱應激預處理拮抗急性熱應激的機制。 方法 1.成年健康昆明系雄性小鼠(體重20±2.0g)隨機分為3組:正常對照組,間歇性20min熱應激預處理組,間歇性30min熱應激預處理組,每組30只。建立小鼠間歇性20min以及30min熱應激預處理模型,預處理結(jié)束后0、6、12、24、36h分別取6只動物進行實驗。采用穿梭和斜板實驗測試小鼠學習記憶功能。2.成年健康昆明系雄性小鼠(體重20±2.0g)隨機分為3組:正常對照組,間歇性熱應激預處理組,連續(xù)性熱應激預處理組,每組30只。復制小鼠間歇性和連續(xù)性熱應激預處理模型,預處理結(jié)束后0、6、12、24、36h分別取6只動物進行實驗。采用穿梭和斜板實驗測試小鼠學習記憶功能。3.成年健康昆明系雄性小鼠(體重20±2.0g)隨機分為4組:正常對照組,熱應激組,間歇性熱應激預處理組,連續(xù)性熱應激預處理組,每組30只。復制小鼠間歇性和連續(xù)性熱應激預處理模型以及急性熱應激模型,熱應激結(jié)束后0、6、12、24、36h每組分別取6只動物進行實驗。采用穿梭和斜板實驗測試小鼠學習記憶功能。并且在熱應激結(jié)束后6h、12h、24h用NADPH-d組織化學、ABC免疫組化、RT-PCR測定小鼠腦組織NOS的活性、nNOS的蛋白和基因表達。4.建立大鼠大腦皮層神經(jīng)元原代培養(yǎng)技術(shù),在培養(yǎng)6天后觀察熱應激預處理對熱應激后細胞生長情況、生長活力及突起長度的影響。
[Abstract]:Objective The effects of hyperthermia on human physiological function are extensive, including heat metabolism, energy metabolism, water and salt metabolism, neuroendocrine system, cardiovascular system, etc. Hyperthermia can also induce apoptosis of cultured cortical neurons in vitro. Heat stress pretreatment can significantly improve the body's heat resistance. This experiment was carried out: 1. Observation No. The effects of the same heat stress preconditioning on the behavior of mice were observed. 2. The effects of heat stress preconditioning on the behavior of mice were observed to reveal the effects of heat stress preconditioning on the brain and body functions of mice. 3. The activity of NOS, nNOS protein and gene table in the brain of mice with acute heat stress were detected. The effects of heat stress preconditioning on the morphology, length and activity of cultured neurons after heat stress were observed to reveal the mechanism of heat stress preconditioning antagonizing acute heat stress.
Methods 1. Adult healthy male Kunming mice (weighing 20.0 g) were randomly divided into three groups: normal control group, intermittent 20-minute heat stress preconditioning group and intermittent 30-minute heat stress preconditioning group, 30 mice in each group. The models of intermittent 20-minute and 30-minute heat stress preconditioning were established in mice. Six animals were selected at 0, 6, 12, 24 and 36 hours after the preconditioning. 2. Adult healthy male Kunming mice (weighing 20 + 2.0g) were randomly divided into three groups: normal control group, intermittent heat stress preconditioning group and continuous heat stress preconditioning group with 30 mice in each group. 6 mice were selected for the experiment at 24 and 36 hours respectively. The shuttle and slant plate experiments were used to test the learning and memory function of mice. 3. Adult healthy male Kunming mice (weighing 20.0 g) were randomly divided into 4 groups: normal control group, heat stress group, intermittent heat stress preconditioning group, continuous heat stress preconditioning group, 30 mice in each group. Sexual heat stress preconditioning model and acute heat stress model, after heat stress 0, 6, 12, 24, 36 hours each group of six animals were taken for experiment. Shuttle and slant plate experiments were used to test the learning and memory function of mice. Protein and gene expression of NOS. 4. To establish the primary culture technology of rat cerebral cortex neurons and observe the effect of heat stress preconditioning on cell growth, growth vigor and process length after 6 days of culture.
【學位授予單位】:天津醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R363

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1 孫一_,

本文編號:2203773


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