【摘要】：目的:觀察鈣敏感受體(calcium-sensing receptor,CaSR)在小鼠胚胎干細(xì)胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)的功能性表達(dá)。方法:(1)采用Western blotting技術(shù)及免疫熒光染色分析CaSR蛋白在129小鼠ESD3細(xì)胞系的表達(dá);采用激光共聚焦掃描技術(shù)檢測(cè)不同處理因素(包括G蛋白-PLC-IP3通路)對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度([Ca2+]i)的影響;應(yīng)用MTT法和流式細(xì)胞術(shù)分析CaSR活化對(duì)mESCs增殖的影響。結(jié)果:CaSR蛋白在mESCs有表達(dá);增加細(xì)胞外鈣或者給予CaSR激動(dòng)劑新霉素均可引起[Ca2+]i和CaSR表達(dá)增加;CaSR活化可增加mESCs的存活率和磷酸化ERK2蛋白的表達(dá)。NPS2390(CaSR抑制劑)則能減弱這種作用。結(jié)論:CaSR在mESCs有表達(dá);CaSR的活化參與了mESCs的增殖。
[Abstract]:Aim: to investigate the functional expression of calcium-sensing receptor CaSR in (mouse embryonic stem cells of mouse embryonic stem cells. Methods: (1) the expression of CaSR protein in 129-mouse ESD3 cell line was analyzed by Western blotting technique and immunofluorescence staining, and the effect of different treatment factors (including G protein-PLC-IP3 pathway) on intracellular calcium concentration ([Ca2] I) was detected by confocal laser scanning. The effects of CaSR activation on the proliferation of mESCs were analyzed by MTT and flow cytometry. [Ca2] I and CaSR expression could be increased by increasing extracellular calcium or CaSR agonist neomycin, which could increase the survival rate of mESCs and the expression of phosphorylated ERK2 protein. NPS2390 (CaSR inhibitor) could attenuate this effect. Conclusion the activation of CaSR in mESCs may play an important role in the proliferation of mESCs.
【作者單位】： 牡丹江醫(yī)學(xué)院;哈爾濱醫(yī)科大學(xué)病理生理教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81300163) 牡丹江醫(yī)學(xué)院科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(No.IS201308)
【分類(lèi)號(hào)】：R363

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2171471