骨保護(hù)素基因修飾的大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞系的培養(yǎng)、表達(dá)與鑒定
本文選題:骨保護(hù)素 + 基因; 參考:《安徽醫(yī)科大學(xué)》2006年碩士論文
【摘要】:骨保護(hù)素基因修飾的大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞系的培養(yǎng)、表達(dá)與鑒定 目的:培養(yǎng)經(jīng)OPG基因修飾的大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞系并檢測(cè)其表達(dá)能力,鑒定表達(dá)產(chǎn)物,為基因工程技術(shù)治療牙周病提供物質(zhì)基礎(chǔ)。 方法:本研究采用密度梯度離心法從成年SD大鼠骨髓中分離獲得骨髓基質(zhì)細(xì)胞,利用已構(gòu)建的pSecTag-opg真核分泌表達(dá)穿梭載體,用脂質(zhì)體法將目的基因轉(zhuǎn)染至大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,并應(yīng)用免疫組織化學(xué)和western blot方法證實(shí)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞表達(dá)骨保護(hù)素。 結(jié)果:分離培養(yǎng)出大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,,經(jīng)脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染目的基因并建立了穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系。經(jīng)免疫組織化學(xué)和western blot方法檢測(cè),在轉(zhuǎn)染OPG基因的大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞中有骨保護(hù)素表達(dá)。 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)成功培養(yǎng)出分泌表達(dá)OPG的大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞系。
[Abstract]:Culture of rat bone marrow stromal cell lines modified with osteoprotegerin gene Objective: to culture rat bone marrow stromal cell lines modified by OPG gene and to identify the expression products. It provides material basis for genetic engineering in the treatment of periodontal disease. Methods: bone marrow stromal cells were isolated from adult SD rat bone marrow by density gradient centrifugation. The target gene was transfected into rat bone marrow stromal cells by liposome method using the constructed pSecTag-opg eukaryotic expression shuttle vector. The expression of osteoprotegerin was confirmed by immunohistochemistry and western blot. Results: rat bone marrow stromal cells were isolated and cultured. The target gene was transfected by liposome method and a stable transfected cell line was established. The expression of osteoprotegerin was detected by immunohistochemistry and western blot in rat bone marrow stromal cells transfected with OPG gene. Conclusion: rat bone marrow stromal cell lines secreting OPG were successfully cultured in this experiment.
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號(hào)】:R329.2
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):2113936
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