本文選題：骨組織工程 + BMSCs��； 參考：《中國修復(fù)重建外科雜志》2014年08期

【摘要】：目的研究雪旺細胞(Schwann cells,SCs)對BMSCs來源內(nèi)皮細胞分泌一氧化氮(nitric oxide,NO)功能的影響,為進一步探究組織工程骨成骨過程中神經(jīng)因素對血管因素的作用奠定實驗基礎(chǔ)。方法取1日齡SD乳鼠坐骨神經(jīng)及臂叢神經(jīng),體外分離獲取SCs,采用S-100免疫組織化學(xué)染色鑒定;取2周齡SD大鼠脛骨及股骨骨髓,體外分離獲取BMSCs,誘導(dǎo)分化成為內(nèi)皮細胞,采用血管性血友病因子與CD31免疫熒光染色鑒定。采用Transwell共培養(yǎng)板對SCs與BMSCs來源內(nèi)皮細胞進行非接觸共培養(yǎng)作為實驗組,單純培養(yǎng)BMSCs來源內(nèi)皮細胞作為對照組,分別于1、3、5、7 d檢測培養(yǎng)液中NO濃度,1、3、7、10 d采用實時熒光定量PCR(real-time fl uorescence quantitative PCR,RT-qPCR)檢測一氧化氮合酶2(nitric oxide synthetase 2,NOS2)、NOS3 mRNA表達。結(jié)果分離及誘導(dǎo)分化的細胞通過形態(tài)學(xué)及免疫組織化學(xué)和免疫熒光染色鑒定為SCs和內(nèi)皮細胞。實驗組及對照組內(nèi)各時間點間釋放NO濃度比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);除3 d外,其余各時間點實驗組釋放NO濃度均顯著高于對照組(P0.05)。RT-qPCR檢測結(jié)果示,培養(yǎng)各時間點實驗組NOS2 mRNA相對表達量均顯著高于對照組(P0.05);兩組內(nèi)各時間點間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。除10 d外,其余各時間點實驗組NOS3 mRNA相對表達量均顯著高于對照組(P0.05);實驗組內(nèi)各時間點間NOS3 mRNA相對表達量比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(F=6.673,P=0.062),對照組內(nèi)各時間點間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(F=36.581,P=0.000)。結(jié)論 SCs可促進BMSCs來源內(nèi)皮細胞釋放NO,可能與SCs促進NOS活性有關(guān)。
[Abstract]:Objective to study the effect of Schwann cells (Schwann cells) on the secretion of nitric oxide (no) in endothelial cells derived from BMSCs. Methods the sciatic and brachial plexus nerves of 1-day-old SD rats were isolated and identified by S-100 immunohistochemical staining in vitro, and BMSCs were isolated from the tibia and femur of 2-week-old SD rats and differentiated into endothelial cells in vitro. Von Willebrand factor and CD31 immunofluorescence staining were used. Non-contact co-culture of endothelial cells derived from BMSCs and SCs was carried out on Transwell co-culture plate as experimental group, and BMSCs derived endothelial cells as control group. Nitric oxide synthase 2 (nitric oxide synthetase 2 no S2 mRNA expression in culture medium was detected by real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (real-time fl uorescence quantitative PCR) for 10 days. Results the cells isolated and differentiated were identified as SCs and endothelial cells by morphological, immunohistochemical and immunofluorescence staining. The concentration of no released from the experimental group and the control group was significantly higher than that of the control group (P0.05), except for 3 days, the concentration of no released in the experimental group was significantly higher than that in the control group (P0.05) .RT-qPCR results showed that the concentration of no in the experimental group was significantly higher than that in the control group (P0.05). The relative expression of NOS2 mRNA in the experimental group was significantly higher than that in the control group at each time point (P0.05), and the difference between the two groups at each time point was statistically significant (P0.05). Except for 10 days, At other time points, the relative expression of NOS3 mRNA in the experimental group was significantly higher than that in the control group (P0.05), but there was no significant difference in the relative expression of NOS3 mRNA between each time point in the experimental group (FF6.673P0. 062), and there was significant difference in the comparison between the control group and the control group at each time point (P0. 000). Conclusion SCs can promote the release of no from endothelial cells derived from BMSCs, which may be related to the promotion of NOS activity by SCs.
【作者單位】： 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科;南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院創(chuàng)傷骨科;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院腫瘤醫(yī)院骨科;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬煙臺毓璜頂醫(yī)院手足骨科;第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院全軍骨科研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(31070866、81301570)~~
【分類號】：R329

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本文編號：2104038