本文選題：大鼠肝星狀細(xì)胞 + 培養(yǎng)　； 參考：《臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志》2014年10期

【摘要】：目的肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell,HSC)是一類胞漿內(nèi)富含Vitamin A脂滴的特殊類型的細(xì)胞,激活后的HSC胞漿中Vitamin A脂滴減少活消失,是研究肝纖維化疾病的良好素材。本研究欲改良HSC細(xì)胞的培養(yǎng)方法,并鑒別四種HSC細(xì)胞鑒定方法的有效性。方法采用含0.2 m M油酸的完全培養(yǎng)基對(duì)已培養(yǎng)傳代的大鼠肝星狀細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。分別采用油紅0染色、Vitamin A脂滴的紫外激發(fā)、a-SMA免疫組化、a-SMA免疫熒光四種方法對(duì)培養(yǎng)的HSC進(jìn)行鑒定。結(jié)果用含0.2 m M油酸的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)的大鼠肝星狀細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)飽滿,胞漿不因傳代而減少,細(xì)胞形態(tài)維持穩(wěn)定,油紅O染色后可清晰顯示未激活HSC內(nèi)的脂滴;紫外激發(fā)下Vitamin A脂滴發(fā)出極易淬滅的藍(lán)綠色熒光;以泡球蚴囊液為外源性刺激,使HSC激活,a-SMA免疫組化染色激活的HSC胞漿均可見(jiàn)棕黃色顆粒狀沉淀;a-SMA免疫熒光顯示激活的HSC細(xì)胞胞漿均可見(jiàn)FITC的激發(fā)的綠色熒光。結(jié)論含0.2 m M油酸的完全培養(yǎng)基可有效維持細(xì)胞形態(tài)。油紅0染液、Vitamin A脂滴的紫外激發(fā)可有效鑒定未激活的HSC,a-SMA免疫組化、a-SMA免疫熒光方法是鑒別激活的HSC的有效方法。
[Abstract]:Objective Hepatic stellate cell (HSC) is a special type of cells rich in Vitamin A lipid droplets in the cytoplasm. The reduced activity of Vitamin A lipid droplets in activated HSCs is a good material for the study of hepatic fibrosis. The aim of this study was to improve the culture method of HSC cells and to identify the effectiveness of four HSC cell identification methods. Methods cultured rat hepatic stellate cells were cultured on a complete culture medium containing 0.2 mm oleic acid. The cultured HSC were identified by oil red 0 staining and ultraviolet stimulated SMA immunofluorescence staining. Results Rat hepatic stellate cells cultured in 0.2 mm oleic acid culture medium were full in shape, no decrease in cytoplasm due to passage, cell morphology remained stable, lipid droplets in HSC could be clearly displayed after oil red O staining. Vitamin A lipid droplets emitted easily quenched blue-green fluorescence under ultraviolet excitation. The cytoplasm of HSC activated by HSC was stained by immunohistochemical staining. All the HSC cells activated by HSC showed the green fluorescence induced by FITC in the cytoplasm of HSC activated by brown granular precipitate and a-SMA immunofluorescence. Conclusion the complete culture medium containing 0.2 mm oleic acid can effectively maintain cell morphology. Ultraviolet excitation of Vitamin A lipids in oil red 0 dye solution can effectively identify the unactivated HSCA- SMA immunofluorescence method is an effective method to identify activated HSC.
【作者單位】： 青海大學(xué)附屬醫(yī)院肝膽胰外科;
【分類號(hào)】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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2 張宗h，

本文編號(hào)：2031526