拉伸加載裝置的研制及拉伸對骨髓間充質(zhì)干細胞增殖的調(diào)節(jié)作用
本文選題:骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs) + 拉伸。 參考:《重慶大學》2005年碩士論文
【摘要】:骨髓間充質(zhì)干細胞(Marrow Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是中胚層來源的具有多向分化潛能的干細胞,存在于不同種屬的動物體內(nèi)(如雞、鼠、兔、犬、人),主要分布在全身的結締組織及組織器官中,以骨髓組織中的含量最為豐富。在不同的誘導條件下,MSCs 具有向成骨細胞、成肌細胞、成軟骨細胞、脂肪細胞和基質(zhì)細胞等中胚層細胞分化的能力,同時還可分化為外胚層的神經(jīng)細胞和內(nèi)胚層的肝細胞。隨著組織細胞工程學和基因工程學的發(fā)展,利用MSCs 的多向分化的潛能,將其運用于組織工程、細胞因子替代治療、基因治療、細胞移植及器官移植等方面的研究已成為熱點。 然而,MSCs 在體內(nèi)含量很少,骨髓中每10 萬單核細胞中大約有1 個MSCs,且隨著年齡的增長,MSCs 數(shù)量逐漸減少。顯然,如此微量的MSCs 根本難以滿足細胞工程的需要。因此,如何摸索一個適宜的體外純化、擴增的培養(yǎng)條件,對于進一步研究MSCs 的生物學特性、誘導分化和細胞移植就顯得尤為重要。 體外調(diào)節(jié)MSCs 增殖的方法有很多種,其中力學刺激是一種重要的途徑。近年來,力學因素對細胞和組織生長發(fā)育的調(diào)節(jié)一直是生物力學十分重視的研究領域,國內(nèi)外學者已經(jīng)在這一領域作了大量的研究工作,積累了豐富的研究經(jīng)驗。拉伸是力學刺激中的一種有效方法,文獻顯示:最佳刺激條件的拉伸能促進細胞增殖。但目前利用力學拉伸加載作用調(diào)節(jié)MSCs 增殖的研究尚未見詳細文獻報道,其機理更不清楚。本實驗擬研制拉伸加載裝置,選取大鼠作為實驗材料,進行MSCs的原代分離、培養(yǎng)、鑒定。然后在一定條件下對MSCs 的進行拉伸刺激,研究分析拉伸刺激后MSCs 的增殖情況,從中找到在設定范圍內(nèi),該拉伸裝置刺激MSCs增殖的最佳條件,并為以后MSCs 在力學拉伸刺激下的定向分化及進一步研究打下良好基礎。 本實驗的研究方法和主要研究內(nèi)容包括:首先,研制一套符合實驗要求的拉伸加載裝置,初步設定拉伸參數(shù),進行相關預實驗檢測;同時,選取成年大鼠作為實驗動物,采用Percoll 梯度離心法結合貼壁篩選法分離提取MSCs,培養(yǎng)傳代,進行相關鑒定;然后使用拉伸加載裝置,在一定的條件下,對MSCs 進行拉伸刺激,采用MTT 法分析增殖影響,分子生物學相關技術分析與增殖相關的c-fos 基因的表達變化,從中研究不同的拉伸刺激條件對MSCs 增殖的相應影響,并總結出在設定的參數(shù)范圍內(nèi),本實驗研制的拉伸加載裝置刺激MSCs 增殖的最佳拉伸條件。 本實驗的研究結果如下:
[Abstract]:Bone marrow mesenchymal stem cells ( MSCs ) , which are derived from mesoderm , are multi - directionally differentiated stem cells , which are mainly distributed in connective tissues and tissues of different species , and are mainly distributed in connective tissue and tissue organs of the whole body .
However , there are few MSCs in the bone marrow , about 1 of every 100 000 monocytes in the bone marrow , and the number of MSCs gradually decreases with age . It is clear that such a trace of MSCs can hardly meet the needs of cell engineering . Therefore , it is very important to study the biological characteristics of MSCs in vitro and to induce differentiation and cell transplantation .
Mechanical stimulation is an important way to regulate the proliferation of MSCs in vitro . In recent years , the regulation of the growth and development of MSCs has been a very important research field .
The research methods and main research contents of this experiment include : firstly , developing a set of tensile loading devices which meet the requirements of the experiment , initially setting the tensile parameters , carrying out relevant pre - experiment detection ; and simultaneously , selecting adult rats as experimental animals , separating and extracting MSCs by a Percolgradient centrifugation method , culturing the passages , and carrying out relevant identification ;
The results of this experiment are as follows :
【學位授予單位】:重慶大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2005
【分類號】:R-331
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,本文編號:1946151
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