潰瘍性結(jié)腸炎動(dòng)物模型的建立及腸寧方的防治作用初探
發(fā)布時(shí)間:2018-05-24 06:27
本文選題:潰瘍性結(jié)腸炎/中醫(yī)藥治療/ + 超氧化物歧化酶(SOD) ; 參考:《湖北中醫(yī)學(xué)院》2007年碩士論文
【摘要】: 目的: 建立大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型,研究中藥復(fù)方腸寧湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織中MDA、SOD及血清中SIgA和IgG表達(dá)的影響,并探討中藥對(duì)防治潰瘍性結(jié)腸炎可能的作用機(jī)制,為腸寧湯的臨床應(yīng)用和進(jìn)一步開(kāi)發(fā)提供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 方法: 健康SD大鼠若干只,隨機(jī)分為4組:A組(中藥治療組)、B組(西藥治療組)、C組(生理鹽水組)、D組(空白對(duì)照組)。其中A、B、C組采用復(fù)合法造成潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型,造模完成后每日給與常規(guī)飲食,不與任何干預(yù),觀察2周。空白對(duì)照組造模前后均予常規(guī)飲食,不給任何干預(yù)。造模成功后,A組按體重給予腸寧湯水煎劑灌胃;B組灌服SASP溶液,C組給予生理鹽水灌胃;以上灌胃均每日一次,共治療4周。D組不給任何干預(yù)。 標(biāo)本采集分兩次進(jìn)行:第一次:造模完成后,治療開(kāi)始前一天,大鼠禁食不禁水24小時(shí)后,隨機(jī)抽取A、B、C組大鼠各10只,D組6只,摘眼球取血6ml,置于預(yù)先標(biāo)記好的試管中做SIgA、IgG檢測(cè),采血后脫頸椎處死,立即打開(kāi)腹腔,截取距肛門(mén)以上6~8cm病變處結(jié)腸,沿縱軸中線一分為二,投入到事先準(zhǔn)備好的裝有4%多聚甲醛固定液的小瓶中,4℃保存。其中一份常規(guī)石蠟包埋,切片,HE染色,光鏡觀察;另一分留做組織勻漿,測(cè)SOD及MDA。第二次采集標(biāo)本:治療滿4周,實(shí)驗(yàn)結(jié)束前一天記錄大鼠體重,大鼠禁食不禁水24小時(shí)后,所有大鼠均摘眼球取血,取血后處死,剖腹取結(jié)腸。方法及處理同第一次標(biāo)本采集。 結(jié)果: 1腸寧湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠一般狀況的影響 治療2周后,A組進(jìn)食量開(kāi)始增加,大便性狀好轉(zhuǎn),未再見(jiàn)粘液膿血便,但部分大鼠仍可見(jiàn)稀便;B組進(jìn)食量無(wú)明顯增加,粘液膿血便減少,部分大鼠仍有稀糊狀大便。治療4周后,A組大鼠未再出現(xiàn)稀便,活動(dòng)正常,皮毛恢復(fù)光澤,體重明顯增加;B組大便性狀明顯好轉(zhuǎn),活動(dòng)正常,皮毛光澤,體重增加。C組治療2周后大便性狀、進(jìn)食量等無(wú)明顯改善,體重進(jìn)一步下降;至4周后,,仍見(jiàn)部分大鼠大便呈稀糊狀,并有精神倦怠、反應(yīng)遲鈍、皮毛疏松無(wú)光澤等表現(xiàn)。D組大鼠一般狀況良好,體重明顯增加。 2腸寧湯對(duì)UC大鼠結(jié)腸粘膜損傷指數(shù)(CMDI分)的影響 治療前A、B、C三組大鼠CMDI(分)較D組顯著升高(P<0.01);治療后,A、B兩組CMDI(分)顯著降低,與D組比較無(wú)明顯差異(P>0.05);與C組比較有顯著差異(P<0.05) 3病理結(jié)構(gòu)觀察 治療前,結(jié)腸標(biāo)本HE染色顯示:A、B、C三組粘膜及粘膜下層高度充血、水腫,有糜爛和潰瘍形成,局部見(jiàn)壞死。大量炎性細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞浸潤(rùn),腺體中杯狀細(xì)胞顯著減少。治療后A、B兩組粘膜充血水腫消失,糜爛和潰瘍基本愈合,殘存潰瘍有明顯修復(fù)性改變,如粘膜上皮修復(fù),肉芽組織增生等。炎性細(xì)胞浸潤(rùn)亦有所緩解。C組無(wú)明顯變化。 4腸寧湯對(duì)UC大鼠結(jié)腸組織中MDA、SOD表達(dá)的影響 各組大鼠中,A組和B組大鼠結(jié)腸組織中MDA含量均顯著降低,與C組比較有極顯著差異(P<0.01);中藥組同時(shí)能明顯提高結(jié)腸組織中SOD含量,與西藥組、生理鹽水組比較均有顯著差異(P<0.05)。 5腸寧湯對(duì)UC大鼠血清IgG、SIgA的影響 造模后,A、B、C三組大鼠血清中IgG、SIgA較D組顯著上升(P<0.05);用藥治療后,A組和B組的SIgG、SIgA含量較C組顯著減少(P<0.01),A組與B組比較,血清中SIgA、IgG含量無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論: 采用2,4-二硝基氯苯+乙酸聯(lián)合建模法,既克服了DNCB病程短、自愈性強(qiáng)的缺點(diǎn),也克服了乙酸法不具有免疫反應(yīng)模型特征的缺點(diǎn),又同時(shí)保留了二者癥狀、組織學(xué)改變與人類UC相似的優(yōu)點(diǎn),是一種較理想的UC模型。通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):腸寧湯方能明顯降低結(jié)腸組織的丙二醛(MDA)含量,提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性;顯著降低血清中及SIgA、IgG含量,可明顯改善腸粘膜的超微結(jié)構(gòu),有效修復(fù)UC大鼠損傷的結(jié)腸黏膜。初步證明了氧自由基誘發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)、免疫異常在UC發(fā)病機(jī)理中起重要作用,揭示腸寧湯治療UC的部分機(jī)理可能是通過(guò)消除組織中的氧自由基,抑制組織中脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),提高組織中SOD的活性、改善免疫異常反應(yīng)而起作用。 進(jìn)一步深入研究腸寧湯方防治UC的作用機(jī)制,盡快開(kāi)發(fā)出方便有效的成藥是我們今后工作的重點(diǎn)。
[Abstract]:Objective:
To establish the model of ulcerative colitis in rats, the effect of Chinese medicine compound Changning Decoction on the expression of SIgA and IgG in MDA, SOD and serum in colonic tissue of ulcerative colitis rats was studied, and the possible mechanism of traditional Chinese medicine on the prevention and treatment of ulcerative colitis was discussed, and the experimental data of the clinical application and further development of Changning Decoction were provided.
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本文編號(hào):1928032
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