發(fā)布時(shí)間：2018-05-16 14:41

  本文選題：甲型肝炎病毒 + 細(xì)胞培養(yǎng)��； 參考：《微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展》2014年04期

【摘要】：目的建立一種細(xì)胞培養(yǎng)與實(shí)時(shí)熒光RT-PCR相結(jié)合的快速檢測(cè)甲肝病毒滴度的方法。方法根據(jù)甲肝病毒(HAV)L-A-1株5'端基因組序列,設(shè)計(jì)了2條基因特異性引物及一條探針,建立實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法,結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)甲肝病毒滴度,并與ELISA檢測(cè)法進(jìn)行比較。結(jié)果實(shí)驗(yàn)中建立的方法能特異檢測(cè)甲肝病毒,細(xì)胞培養(yǎng)8d檢測(cè)病毒滴度為lg107.0CCID50/mL。同一樣本重復(fù)檢測(cè)3次,批內(nèi)樣本Ct值的變異系數(shù)最大為0.89%,批間樣本Ct值變異系數(shù)最大為1.66%。建立的細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)合實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法(細(xì)胞培養(yǎng)8 d)與細(xì)胞培養(yǎng)ELISA法(細(xì)胞培養(yǎng)28 d)檢測(cè)甲肝病毒滴度結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論該方法具有快速、靈敏、特異等優(yōu)點(diǎn),應(yīng)用于疫苗常規(guī)檢測(cè)有良好前景。
[Abstract]:Objective to establish a rapid method for the detection of hepatitis A virus titer by cell culture and real-time fluorescent RT-PCR. Methods according to the 5'terminal genome sequence of HAVS-L-A-1 strain, two gene specific primers and a probe were designed, and real-time fluorescent RT-PCR assay was established. The titer of HAV was detected by cell culture and compared with ELISA assay. Results the method established in the experiment can detect hepatitis A virus specifically. The titer of the virus was detected as lg107.0 CCID 50 / mL for 8 days after cell culture. The maximum coefficient of variation of Ct value in the sample was 0.89 and the coefficient of variation of Ct value in the interlot sample was 1.66. There was no significant difference in the titer of hepatitis A virus between cell culture and real-time fluorescence RT-PCR assay (cell culture for 8 days) and cell culture ELISA assay (cell culture for 28 days). Conclusion this method has the advantages of rapidity, sensitivity and specificity, and has a good prospect in routine detection of vaccine.
【作者單位】： 長(zhǎng)春生物制品研究所有限責(zé)任公司;
【分類號(hào)】：R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 于曼,王曉鳴,王嘉璽;人β干擾素重組質(zhì)粒導(dǎo)入CHO-dhfr~-細(xì)胞[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1989年03期

2 陳志宏,陳因良,施源,葉雪平,楊廣智;生物反應(yīng)器微載體系統(tǒng)大規(guī)模培養(yǎng)草魚細(xì)胞及病毒[J];華東理工大學(xué)學(xué)報(bào);1991年04期

3 陳志宏;施源;丁健椿;;流加微載體半連續(xù)培養(yǎng)分泌HBsAg的rCHO細(xì)胞過程研究[J];生物工程學(xué)報(bào);1991年02期

4 李永芳;王玉坤;顧葆良;;輪狀病毒培養(yǎng)純化及重組子代分析[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1992年01期

5 董樹沛;陳因良;顧小華;嚴(yán)春;宋家驪;陳列勝;陳文蘭;;用國產(chǎn)生物反應(yīng)器大規(guī)模高密度培養(yǎng)Vero細(xì)胞[J];生物工程學(xué)報(bào);1992年04期

6 陳可奰,葉和春,顧立民,陳建林,李國鳳;蘆葦細(xì)胞培養(yǎng)中的染色體穩(wěn)定性及誘變效應(yīng)[J];植物學(xué)通報(bào);1993年01期

7 張福琴,李志超,黃威權(quán);觀察肺動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞舒縮功能的實(shí)驗(yàn)方法[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;1997年S1期

8 楊衛(wèi)兵,刁慶春,葉慶佾;低速離心法去除細(xì)胞培養(yǎng)中霉菌污染[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1999年08期

9 周曉莉,雷寒,柳青;小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2005年06期

10 盧華定,蔡道章,黃冬梅,曾春;Ⅰ型膠原三維立體支架高密度培養(yǎng)軟骨細(xì)胞的增殖及其分泌功能[J];中國臨床康復(fù);2005年18期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 魏永祥;韓德民;蔡貞;楊凌;劉小超;羨慕;張曉斌;;嗅感覺神經(jīng)細(xì)胞的分離與培養(yǎng)[A];第七屆北京青年科技論文評(píng)選獲獎(jiǎng)?wù)撐募痆C];2003年

2 胡秀華;;細(xì)胞培養(yǎng)與real-time RT-PCR相結(jié)合的方法檢測(cè)水體中感染性輪狀病毒[A];2006中國微生物學(xué)會(huì)第九次全國會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

3 吳建云;王鮮忠;王劍;諶劍波;范光麗;張家驊;;大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會(huì)第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

4 張道來;孫濤;辛華;;體外培養(yǎng)胎鼠大腦皮層神經(jīng)元NMDAR1型受體表達(dá)的發(fā)育性變化[A];第二屆中國醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)暨細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)改革會(huì)議論文集[C];2008年

5 李光宗;管英俊;于力;;細(xì)胞培養(yǎng)搖籃的研制與使用[A];山東解剖學(xué)會(huì)教學(xué)研討會(huì)論文匯編[C];2005年

6 李靜雯;楊浩;羅娜;鞠躬;;嗅鞘細(xì)胞培養(yǎng)液對(duì)海仁藻酸損傷脊髓神經(jīng)元NO產(chǎn)生的影響[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)會(huì)成立十周年慶祝大會(huì)論文摘要匯編[C];2005年

7 武書庚;苗燕;張海軍;齊廣海;岳洪源;;肉仔雞胸肌和腿肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)及其表型[A];家禽營(yíng)養(yǎng)與飼料科技進(jìn)展——第二屆全國家禽營(yíng)養(yǎng)與飼料科技研討會(huì)論文集[C];2007年

8 廖波;張克英;陳代文;余冰;;豬肝細(xì)胞的分離培養(yǎng)和AMPK活性調(diào)控的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)分會(huì)——第九屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

9 張藝;楊恬;;毛囊Bulge細(xì)胞培養(yǎng)與生物學(xué)性質(zhì)的研究[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

10 蔡紹皙;盧曉;王遠(yuǎn)亮;王紅兵;潘君;葉志義;黃豈平;秦建;吳澤志;;組織工程的一組基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究:細(xì)胞與支撐介質(zhì)間的相互作用[A];“力學(xué)2000”學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2000年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 劉霞;英利用細(xì)胞切除技術(shù)降低制藥成本[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

2 葛秋芳;美科學(xué)家培育出修理心臟的“導(dǎo)線”[N];新華每日電訊;2006年

3 記者　趙仁偉;10頭“牛福娃”降生[N];人民日?qǐng)?bào);2006年

4 記者 毛黎;美《科學(xué)》雜志評(píng)出2007年10大科技突破[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

5 日信;基膜培養(yǎng)使細(xì)胞“堅(jiān)強(qiáng)”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

6 ;中國第一個(gè)抗體人源化技術(shù)平臺(tái)建成[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2005年

7 記者　陳娟;我國54個(gè)少數(shù)民族有了基因庫[N];人民日?qǐng)?bào);2006年

8 張嗣良;我國生物過程工程研究期待突破[N];中國醫(yī)藥報(bào);2007年

9 曹麗敏;白發(fā)和智慧沒有任何關(guān)系[N];大眾科技報(bào);2009年

10 記者 徐玢;美皮膚干細(xì)胞研究又獲新進(jìn)展[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉東昕;體外甲床細(xì)胞培養(yǎng)、鑒定及組織工程甲床構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2006年

2 胡夢(mèng)欣;聚丙烯微孔膜的高密度糖基化及其應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D];浙江大學(xué);2009年

3 楊禮慶;胰島素樣生長(zhǎng)因子-1基因轉(zhuǎn)染對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

4 趙權(quán)宇;海綿細(xì)胞在微載體表面貼附特征與規(guī)律的研究[D];中國科學(xué)院研究生院（大連化學(xué)物理研究所）;2005年

5 張敏;大鼠下丘神經(jīng)元上酸敏感離子通道功能特性的研究[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2008年

6 程華;巖黃連細(xì)胞培養(yǎng)合成生物堿研究[D];華中科技大學(xué);2006年

7 洪海霞;永生化豬臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特征分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2007年

8 朱耀e，

本文編號(hào)：1897263