大腦皮層神經(jīng)元原代培養(yǎng)方法的改良及一種體外缺氧缺糖簡易模型的建立
本文選題:SD胎鼠 + 神經(jīng)元; 參考:《中南藥學(xué)》2014年05期
【摘要】:目的改進(jìn)SD胎鼠大腦皮層神經(jīng)元體外原代培養(yǎng)方法及其一種缺氧缺糖(OGD)簡易模型建立。方法用溫和的TrypLE胰酶消化得到單個(gè)皮層神經(jīng)細(xì)胞,用含有B27的Neurobasol培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)7 d后,將其培養(yǎng)液換成無糖DMEM培養(yǎng)液,放入缺氧裝置中分別培養(yǎng)4、5及6 h,利用MTT法檢測細(xì)胞存活率,并用乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH的釋放量。結(jié)果分離和培養(yǎng)的神經(jīng)元生長狀態(tài)良好,免疫熒光方法證明該方法培養(yǎng)的大腦皮層神經(jīng)元純度可達(dá)到(93.2±1.3)%,能夠達(dá)到實(shí)驗(yàn)研究的要求。細(xì)胞OGD 4、5及6 h后,細(xì)胞存活率分別為(52.7±1.3)%、(26.5±3.3)%及(20.8±1.1)%;LDH的釋放量分別為(52.9±4.8)%、(89.3±1.3)%及(93.2±1.1)%。結(jié)論改良后的培養(yǎng)方法能夠穩(wěn)定地獲得高純度的SD胎鼠大腦皮層神經(jīng)元,用厭氧發(fā)生裝置替代三氣培養(yǎng)箱建立了一種OGD簡易模型,同時(shí)選擇OGD 4 h作為缺氧缺糖模型最佳時(shí)間點(diǎn)。
[Abstract]:Objective To improve the in vitro primary culture of neurons in cerebral cortex of SD rats and to establish a simple model of hypoxia - deficient glucose ( OGD ) .
【作者單位】: 暨南大學(xué)藥學(xué)院新藥研究所;
【基金】:國家重大新藥創(chuàng)制-候選藥物研究(No.2012ZX09103101-055) 廣東省醫(yī)學(xué)科研基金項(xiàng)目(No.A2013353) 暨南大學(xué)科研培育與創(chuàng)新基金項(xiàng)目(No.21611321和No.21613331)
【分類號】:R329.2
【參考文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前4條
1 龔敏;李樹清;;體外培養(yǎng)細(xì)胞缺氧模型及特點(diǎn)[J];臨床合理用藥雜志;2011年01期
2 陳雪松;馬姬;薛燕;曾凡一;;ICR胎鼠原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年02期
3 姚富麗;周志遠(yuǎn);謝華福;劉曉燕;;新生小鼠大腦皮層神經(jīng)元的原代培養(yǎng)[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2008年02期
4 鄧?yán)?代榮陽;廖彥生;高小青;楊朝鮮;;新生大鼠大腦皮層神經(jīng)元原代培養(yǎng)與鑒定[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2011年05期
【共引文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 王鈺;尹曉娟;;鋰對缺氧狀態(tài)下新生鼠神經(jīng)干細(xì)胞損傷的影響[J];中國兒童保健雜志;2013年10期
2 李紅艷;曹陽;白雪媛;趙丹;張曉丹;楊靜嫻;康廷國;;人參蛋白對β淀粉樣蛋白_(1-40)和H_2O_2損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用及其機(jī)制[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年06期
3 徐麗;張勤麗;牛僑;;Nec-1對鋁作用下神經(jīng)細(xì)胞活力及凋亡、自吞噬基因的影響[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué);2010年03期
4 李蕓;王紅;王波;許永廣;張孟元;王公明;;新生大鼠前扣帶皮層神經(jīng)元的原代培養(yǎng)[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年05期
5 徐麗;張勤麗;牛僑;;Nec-1對鋁致神經(jīng)細(xì)胞凋亡和自噬的作用[J];毒理學(xué)雜志;2010年02期
6 李從德;陸永利;楊紅衛(wèi);周敏;;以膜片鉗技術(shù)急性分離新生大鼠尾核神經(jīng)元[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年37期
7 寇天雷;張永亮;;紅景天苷對大鼠體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元物理缺氧損傷鈣離子含量、鈣激活中性蛋白酶及鈣通道蛋白表達(dá)的影響[J];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年04期
8 寇天雷;張永亮;;紅景天苷對體外培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元化學(xué)缺氧損傷ATP敏感性鉀通道亞基表達(dá)的影響[J];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年05期
9 徐建可;栗延偉;韓新生;譚軍;;星形膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)液對缺氧損傷神經(jīng)元的影響[J];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年10期
10 翟仰魁;潘明政;張宏;;大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺氧模型的建立[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2013年05期
相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條
1 石瑞麗;瓜子金皂苷己抑制神經(jīng)細(xì)胞缺血再灌注損傷及抗神經(jīng)炎癥作用的體外研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年
相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條
1 徐麗;Nec-1對染鋁神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年
2 邵明斌;轉(zhuǎn)染外源性prohibitin在缺氧性腎小管上皮細(xì)胞損傷中的作用及機(jī)制[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年
3 李蕓;選擇性下調(diào)前扣帶皮層神經(jīng)元NR2B基因的表達(dá)治療福爾馬林誘導(dǎo)的痛惡性情緒體驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2012年
4 徐建可;星形膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)液對缺氧損傷神經(jīng)元的影響[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2012年
5 翟仰魁;紅景天苷對體外高糖缺氧環(huán)境下大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞Flk-1/Akt/eNOS信號通路等影響的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年
6 張巧梅;電針增加Neurogenin2表達(dá)和促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生從而改善全腦缺血后小鼠神經(jīng)行為學(xué)的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年
7 王麗娟;擬缺血性損傷對rBMECs上P-gp功能和表達(dá)的影響[D];河南大學(xué);2013年
8 劉勇;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對大鼠皮層神經(jīng)元缺氧缺糖損傷后軸突生長及AKT/GSK-3β/CRMP-2表達(dá)的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年
9 李林夕;缺氧下絨癌JEG-3細(xì)胞HIF-1α及VEGF的表達(dá)及其對侵襲能力的影響[D];中南大學(xué);2013年
【二級參考文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 薄濤,姜玉武,曹海燕,王靜敏,吳希如;無糖對體外培養(yǎng)的神經(jīng)前體細(xì)胞損傷的影響[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2003年06期
2 姜茜;姜玉武;王靜敏;秦炯;吳希如;;一種改進(jìn)的大鼠皮層神經(jīng)元原代培養(yǎng)方法及其性質(zhì)鑒定[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年02期
3 許蜀閩,王培勇,馬紅英;連二亞硫酸鈉在建立培養(yǎng)細(xì)胞的無氧環(huán)境中的應(yīng)用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年04期
4 孫勝;高文祥;蔣春華;高鈺琪;;氯化鈷預(yù)處理在培養(yǎng)分化的人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株缺氧損傷中的保護(hù)作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年11期
5 鄔力祥,劉發(fā)益,曹莉,趙彥,馬志成;低(無)糖、缺氧和缺氧/復(fù)氧對培養(yǎng)鼠腦膠質(zhì)細(xì)胞活力及致?lián)p的影響[J];湖南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2003年05期
6 郭琴;毛萌;羅小麗;孫小妹;李勝富;周暉;;神經(jīng)元原代培養(yǎng)方法的改進(jìn)[J];華西醫(yī)學(xué);2007年03期
7 梁傳棟;趙文清;李文玲;王躍紅;董慧;郭芳;;新生大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元的體外原代培養(yǎng)及鑒定[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2008年07期
8 王圓圓;張文斌;龔曉兵;郭國慶;陳靜;辛莉;沈偉哉;原林;;大鼠海馬神經(jīng)元neurobasal無血清的原代培養(yǎng)方法[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年06期
9 朱浩;丁文龍;王文進(jìn);李鋒;;體外培養(yǎng)Schwann細(xì)胞缺氧模型的建立[J];解剖學(xué)雜志;2008年02期
10 張壯,閆彥芳,韋穎,孫塑倫,王碩仁,朱陵群,牛福苓;參麥注射液及人參皂苷Rb_1、Rg_1抗神經(jīng)、血管內(nèi)皮、星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧/缺糖損傷的研究[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2005年03期
【相似文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 周竹娟;鄭健;徐炎;;胎鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞核的制備和鑒定[J];卒中與神經(jīng)疾病;2008年02期
2 王慧巧;俞連春;陳勇;;離子通道噪聲對神經(jīng)元新陳代謝能量的影響[J];物理學(xué)報(bào);2009年07期
3 楊雨晗;王玉明;鄭人源;李亞;張紅;鄧緬;;維生素C對神經(jīng)元細(xì)胞生長的時(shí)間劑量效應(yīng)[J];營養(yǎng)學(xué)報(bào);2009年05期
4 ;神經(jīng)解剖學(xué)和神經(jīng)生理學(xué)中的基本概念簡述(三)[J];生物學(xué)通報(bào);1983年05期
5 ;“靈魂”藏在腦細(xì)胞里嗎[J];科學(xué)大觀園;2003年05期
6 叢琳;朱曉峰;;FGF-2,NT-3對海馬表皮生長因子反應(yīng)性神經(jīng)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元的誘導(dǎo)作用[J];神經(jīng)損傷與功能重建;2006年01期
7 郜志英;陸啟韶;;神經(jīng)元鈣振蕩的非線性動(dòng)力學(xué)研究[J];動(dòng)力學(xué)與控制學(xué)報(bào);2007年02期
8 李蕓;王紅;王波;許永廣;張孟元;王公明;;新生大鼠前扣帶皮層神經(jīng)元的原代培養(yǎng)[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年05期
9 曹春來,郭勇,楊慧蘭;單純皰疹病毒潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄子功能的研究進(jìn)展[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2005年15期
10 胡志紅;髓鞘抑制因子及其受體研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué);2005年05期
相關(guān)會議論文 前10條
1 汲娟娟;陳聯(lián)萬;白淑云;;SNr神經(jīng)元BKCa通道在葡萄糖剝奪條件下的作用[A];第十次中國生物物理學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2006年
2 蔡蕾;;神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)nrsf/rest基因缺失加重酒精對新生小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的損傷[A];中國遺傳學(xué)會第八次代表大會暨學(xué)術(shù)討論會論文摘要匯編(2004-2008)[C];2008年
3 房彥軍;高先軍;胡紅芳;寧保安;歐國榮;王紅勇;高志賢;;五氯酚暴露對稀有憊句鯽肝細(xì)胞的損傷研究[A];第五屆全國環(huán)境化學(xué)大會摘要集[C];2009年
4 溫建新;王金寶;李俊;任慧英;劉文華;鄒玲;支兵杰;張利娜;;不同序列的CpG-ODN對豬外周血淋巴細(xì)胞和脾臟免疫細(xì)胞免疫刺激作用的初步研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第六屆理事會第二次會議暨教學(xué)專業(yè)委員會第六屆代表大會論文集[C];2006年
5 姚明慧;牛鋼;盛哲津;王鑄鋼;費(fèi)儉;;BMP2因子通過轉(zhuǎn)錄因子Smad4和YY1雙向調(diào)控小鼠GABA轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白亞型1的表達(dá)[A];中國遺傳學(xué)會第八次代表大會暨學(xué)術(shù)討論會論文摘要匯編(2004-2008)[C];2008年
6 李曉霞;柴同杰;;腸致病性大腸桿菌外膜蛋白免疫保護(hù)性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2006學(xué)術(shù)年會論文集(下冊)[C];2006年
7 彭貴青;張琪;鄔開朗;朱應(yīng);朱帆;吳建國;;博爾納病毒P蛋白抑制一氧化合成酶的誘導(dǎo)表達(dá)[A];2006中國微生物學(xué)會第九次全國會員代表大會暨學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2006年
8 彭貴青;張琪;鄔開朗;朱應(yīng);朱帆;吳建國;;博爾納病毒的致病機(jī)制探索[A];第二屆中國青年學(xué)者微生物遺傳學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年
9 彭貴青;張琪;鄔開朗;朱應(yīng);朱帆;吳建國;;博爾納病毒的致病機(jī)制探索[A];2006年度學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2006年
10 湯黎明;;神經(jīng)閾值圖譜及相關(guān)研究[A];提高全民科學(xué)素質(zhì)、建設(shè)創(chuàng)新型國家——2006中國科協(xié)年會論文集[C];2006年
相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條
1 滕繼濮;哈佛專家將老鼠大腦“染”成七色“彩虹”[N];科技日報(bào);2007年
2 記者 高博;細(xì)胞對環(huán)境的反應(yīng)由神經(jīng)元控制[N];科技日報(bào);2008年
3 本報(bào)編輯部編譯;“DNA之父”與DNA[N];中國經(jīng)濟(jì)導(dǎo)報(bào);2004年
4 記者 陳勇;美國科學(xué)家成功讓鼠腦中長出人腦細(xì)胞[N];新華每日電訊;2005年
5 文少傳;老鼠正在驚人地進(jìn)化[N];中國商報(bào);2004年
6 記者 許琦敏;蛋白質(zhì)“打的”去“工地”[N];文匯報(bào);2007年
7 劉霞;美揭示神經(jīng)元轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的分子運(yùn)動(dòng)機(jī)制[N];科技日報(bào);2011年
8 本版編譯 楊孝文;生命真的離不開水嗎?[N];北京科技報(bào);2007年
9 梅雋;動(dòng)物與人“嵌合”能走多遠(yuǎn)[N];文匯報(bào);2007年
10 本報(bào)記者 聶翠蓉;干細(xì)胞克隆技術(shù)成為研究疾病新武器[N];科技日報(bào);2006年
相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條
1 田海濱;小鼠和山羊胚胎干細(xì)胞建系及其分化為神經(jīng)元細(xì)胞的基礎(chǔ)研究[D];山東大學(xué);2005年
2 錢建平;攜帶綠色熒光蛋白基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染幾種皮膚結(jié)構(gòu)重要細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年
3 劉慶陽;組織工程動(dòng)脈血管組織構(gòu)建的初步實(shí)驗(yàn)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年
4 張文平;乙酰膽堿對大鼠成年神經(jīng)發(fā)生和學(xué)習(xí)與記憶的作用及其機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2007年
5 周亮;胸腺素α1的克隆表達(dá)及其作用機(jī)理研究[D];浙江大學(xué);2008年
6 付立波;韁核參與腺苷對睡眠活動(dòng)中的影響和可能機(jī)制[D];吉林大學(xué);2006年
7 蔡斌;人類神經(jīng)生長抑制因子的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與功能[D];復(fù)旦大學(xué);2006年
8 李瑩;SCN中節(jié)律行為與生物網(wǎng)絡(luò)中Motif行為的研究[D];上海大學(xué);2008年
9 王美遲;四種作用于鈉通道的蜘蛛毒素的結(jié)構(gòu)與功能研究[D];湖南師范大學(xué);2008年
10 馬義德;生物信息的數(shù)字圖像處理技術(shù)研究[D];蘭州大學(xué);2001年
相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條
1 王明輝;GST融合隨機(jī)肽庫的建立及其抗腫瘤活性研究[D];蘭州大學(xué);2006年
2 趙曉民;胸腺肽β4基因的克隆表達(dá)及活性測定[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年
3 黃河;突觸噪聲作用下神經(jīng)元細(xì)胞膜離子通道的溫度效應(yīng)[D];華中師范大學(xué);2005年
4 王軍;OGD對BBB體外模型中內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接蛋白及TEER的影響[D];華中科技大學(xué);2013年
5 楊利建;有限大小神經(jīng)元細(xì)胞膜離子通道隨機(jī)性的溫度效應(yīng)[D];華中師范大學(xué);2004年
6 顧燕;蚊抗藥性相關(guān)新基因NYD-Ch和NYD-Tr的初步功能研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年
7 劉雙雙;白細(xì)胞介素-2對皮層神經(jīng)元存活和形態(tài)的影響[D];浙江大學(xué);2007年
8 肖小平;生長抑素2型受體對細(xì)胞增殖的影響[D];暨南大學(xué);2007年
9 李丹;藍(lán)耳病毒RX株的分離鑒定和中藥體外抗病毒的作用研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年
10 劉立;TMEFF2基因?qū)H-SY5Y細(xì)胞的生長抑制作用[D];同濟(jì)大學(xué);2007年
,本文編號:1869136
本文鏈接:http://www.sikaile.net/yixuelunwen/binglixuelunwen/1869136.html