本文選題：成體表皮干細(xì)胞 + 細(xì)胞培養(yǎng)��； 參考：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2006年碩士論文

【摘要】：目的 1、熟練掌握體外成體表皮干細(xì)胞與成熟表皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及其鑒定。初步地研究其生物學(xué)特性。 2、研究誘導(dǎo)因素對(duì)成體表皮細(xì)胞的分化影響。 3、采用皮片移植模型，來(lái)探討成熟表皮細(xì)胞向干細(xì)胞逆向分化的可能性。 方法 (取標(biāo)本時(shí)，已征得患者本人同意。) 1、通過(guò)dispase Ⅱ酶消化成人包皮，采用差速黏附法，分別獲得ESC及成熟表皮細(xì)胞，利用MTT比色法和細(xì)胞計(jì)數(shù)法來(lái)觀察細(xì)胞的增殖傳代情況；利用免疫組化觀察ESC及成熟表皮細(xì)胞的角蛋白表達(dá)差異；初步研究其生物學(xué)特性。 2、將體外培養(yǎng)的成熟的表皮細(xì)胞，添加EGF、血清、表皮干培養(yǎng)基等多種誘導(dǎo)因子，通過(guò)顯微鏡觀察、細(xì)胞流式等檢測(cè)皮膚表面標(biāo)志物(角蛋白)不同表達(dá)，應(yīng)用TRAP法檢測(cè)端粒酶活性的變化來(lái)分析細(xì)胞的分化狀況；同時(shí)通過(guò)導(dǎo)入hTERT來(lái)獲得永生化的成體表皮干細(xì)胞。 3、通過(guò)用DAPI標(biāo)記的超薄刃厚皮片移植至全層皮膚缺損的裸鼠創(chuàng)面，分別于第3、5、7天取材，，制作冰凍切片，行免疫組化染色，在雙熒光顯微鏡下觀察成熟表皮細(xì)胞逆向分化現(xiàn)象的存在。
[Abstract]:Purpose 1. Master the isolation, culture and identification of adult epidermal stem cells and mature epidermal cells in vitro. Its biological characteristics were preliminarily studied. 2. To study the effect of inducing factors on the differentiation of adult epidermal cells. 3. The possibility of reverse differentiation of mature epidermal cells into stem cells was studied by skin graft model. Method (with the patient's consent.) 1. Adult prepuce was digested by dispase 鈪

本文編號(hào)：1850358