本文選題：LPS + 細胞因子　； 參考：《中南大學》2006年博士論文

【摘要】：本研究從調控炎癥介質基因表達的細胞內信號轉導通路，探討熱休克反應(heat shock response，HSR)以及HSP70抑制LPS所致細胞因子表達的機制。 經采用RT-PCR、ELISA檢測發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌脂多糖(LPS)可誘導RAW264.7小鼠巨噬細胞產生大量TNF-α，IL-1β和IL-15等細胞因子。當細胞經受熱休克反應(42.5℃1h，恢復12h)后再進行LPS刺激，，則LPS誘導的細胞因子表達受到抑制。在此基礎上采用過表達HSP70的RAW264.7細胞進行實驗，發(fā)現(xiàn)HSP70同樣抑制了LPS誘導的細胞因子表達。 鑒于細胞內信號轉導通路在調控炎癥介質基因表達中的作用，本實驗采用磷酸化抗體檢測MAPK信號通路的活化，分析了HSR以及HSP70對LPS所致MAPK信號通路活化的影響。Western blot結果顯示，HSR以及HSP70自身均不影響MAPK的活化(磷酸化)。在LPS刺激30min后，HSR組以及HSP70過表達組中的JNK、ERK、p38的活化(磷酸化)程度與非HSR正常細胞組或轉空載體細胞組比較均無明顯區(qū)別。EMSA結果顯示，HSR以及HSP70不影響LPS刺激所致的MAPK下游轉錄因子AP-1的DNA結合活性。據(jù)此我們認為，HSR以及HSP70不影響LPS所致的MAPK信號通路活化，其抑制LPS所致細胞因子表達的機制可能涉及其他因素。 由于NF-κB／IκB信號轉導通路的活化在LPS所致炎癥反應的發(fā)生中具有重要作用，我們進一步分析了HSP70過表達對LPS所致NF-κB信號通路活化的影響。通過免疫熒光、免疫細胞化學及Western blot
[Abstract]:The aim of this study was to investigate the mechanism of heat shock response to heat shock response (HSRs) and the inhibitory effect of HSP70 on the expression of cytokines induced by LPS by regulating the intracellular signal transduction pathway of inflammatory mediators gene expression. Elisa assay showed that Escherichia coli lipopolysaccharide (LPS) could induce the production of a large number of cytokines such as TNF- 偽, IL-1 尾 and IL-15 in macrophages of RAW264.7 mice. The expression of cytokines induced by LPS was inhibited when the cells were stimulated by LPS after heat shock reaction at 42.5 鈩

本文編號：1841177