天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

當(dāng)前位置:主頁 > 醫(yī)學(xué)論文 > 病理論文 >

抗人蛋白酶激活受體3單克隆抗體的制備與鑒定

發(fā)布時間:2018-03-29 19:04

  本文選題:人蛋白酶激活受體3 切入點:單克隆抗體 出處:《汕頭大學(xué)》2007年碩士論文


【摘要】: 背景與目的:蛋白酶激活受體3(protease-activated receptor-3,PAR3)屬于G蛋白偶聯(lián)受體(G protein-coupled receptor,GPCR)家族成員,由細(xì)胞外區(qū)(N—末端和細(xì)胞外袢)、跨膜區(qū)(7個跨膜螺旋)及細(xì)胞內(nèi)區(qū)(細(xì)胞內(nèi)袢和C—末端)組成。PAR3存在于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等,廣泛分布在心臟,肝臟,胰腺,胸腺,小腸,胃,淋巴結(jié),氣管,腎上腺和骨髓等各種組織,參與炎癥、腫瘤等疾病。制備hPAR3抗體,有利于檢測PAR3的表達(dá),,深入了解其在疾病中的作用。鑒于我國國情,研制效價高,特異性好的PAR3單克隆抗體(mAb),具有重要意義。 方法:以hPAR3為免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾細(xì)胞和小鼠骨髓瘤NS-1細(xì)胞融合。通過間接ELISA法篩選可特異性分泌抗hPAR3 mAb的雜交瘤細(xì)胞。采用Ig類與亞類鑒定試劑盒鑒定mAb的Ig亞類;通過ELISA、免疫組織化學(xué)染色、流式細(xì)胞分析、激光共聚焦掃描顯微鏡、Dot blot等技術(shù)鑒定mAb的特異性。 結(jié)果:獲得2株可穩(wěn)定分泌抗hPAR3 mAb的雜交瘤細(xì)胞,其分泌的mAb均為IgM。免疫組化染色表明,mAb與肺中的巨噬細(xì)胞,結(jié)腸中的淋巴及疑似肥大細(xì)胞,扁桃體和包皮組織的淋巴細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。流式細(xì)胞儀分析及激光共聚焦掃描顯微鏡觀察顯示,2株mAb與人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞上的PAR3呈陽性反應(yīng)。Dot blot分析表明,其mAb能與轉(zhuǎn)印至NC膜上的PAR3Ag有效結(jié)合。 結(jié)論:成功地制備抗hPAR3 mAb,為研究PAR3的表達(dá),作用及其相關(guān)工作提供了有用的試劑。
[Abstract]:Background & AIM: protease activated receptor 3(protease-activated receptor-3 (PAR3) is a member of G protein coupled receptor G protein-coupled receptor (GPCR3) family. PAR3 is composed of N- terminal and extracellular loop, transmembrane region (7 transmembrane spirals) and intracellular region (intracellular loop and C- terminal). PAR3 exists in monocytes, macrophages, dendritic cells and so on, and is widely distributed in heart, liver, pancreas, etc. Thymus, small intestine, stomach, lymph node, trachea, adrenal gland and bone marrow participate in inflammation, tumor and other diseases. The preparation of hPAR3 antibody is helpful to detect the expression of PAR3 and to understand its role in the disease. It is of great significance to develop PAR3 monoclonal antibody with high titer and good specificity. Methods: BALB/c mice were immunized with hPAR3. The hybridoma cells secreting specific anti-#en2# mAb were screened by indirect ELISA method. The IgG subclasses of mAb were identified by Ig and subclass identification kit, and the Ig subclasses of mAb were identified by immunohistochemical staining. The specificity of mAb was identified by flow cytometry, laser confocal scanning microscope (LSCM) and dot blot. Results: two hybridoma cells secreting hPAR3 mAb stably were obtained. The mAb secreted by them were all IgM.Immunohistochemical staining showed that mAb was associated with macrophages in lung, lymph nodes and suspected mast cells in colon. The positive reaction of lymphocytes in tonsils and prepuce tissues was observed by flow cytometry and confocal laser scanning microscopy. The positive reaction between mAb and PAR3 in human lung adenocarcinoma cell line A549 was observed by flow cytometry and laser confocal scanning microscopy. Its mAb can be effectively combined with PAR3Ag transferred to NC film. Conclusion: the successful preparation of anti hPAR3 mAbprovides a useful reagent for studying the expression, effect and related work of PAR3.
【學(xué)位授予單位】:汕頭大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號】:R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 宋芳;周玉;盧士英;任洪林;李巖松;柳增善;劉文迪;郝亞明;;β-酪蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[J];中國實驗診斷學(xué);2011年08期

2 呂大偉;;抗體的臨床應(yīng)用及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的抗體治療[J];中國醫(yī)藥指南;2011年22期

3 裴冀男;;單克隆抗體制備例談[J];高中生學(xué)習(xí)(高二版);2011年05期

4 謝曉玲;;惡性血液腫瘤的單克隆抗體靶向治療[J];中外醫(yī)學(xué)研究;2011年18期

5 孫厚良;魏大鵬;張小洪;劉彥君;章崇杰;;抗hMOF單克隆抗體的制備與鑒定[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年05期

6 ;新藥速遞[J];藥學(xué)與臨床研究;2011年04期

7 羅莎;;單克隆抗體成功治療由出血性大腸桿菌引起的溶血性尿毒綜合癥[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2011年03期

8 孔桂美;張小榮;黃瑤;高巍;廖月霞;卜平;;人VEGF受體Ⅱ胞外Ⅲ區(qū)單克隆抗體研制與生物學(xué)活性測定[J];揚州大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版);2011年02期

9 曹黎黎;劉丹丹;衛(wèi)娜;高明春;王君偉;;牛IFN-γ單克隆抗體的制備及鑒定[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2011年07期

10 杜春紅;王鵬;張建中;唐雪;宋志忠;;鼠疫耶爾森氏菌Pla蛋白單克隆抗體的制備與鑒定[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年09期

相關(guān)會議論文 前10條

1 徐爽;徐焱;;單克隆抗體在輸血領(lǐng)域的應(yīng)用探討[A];中國輸血1999年年會暨紀(jì)念A(yù)BO血型發(fā)現(xiàn)100周年學(xué)術(shù)交流論文專輯[C];1999年

2 李安民;;單克隆抗體標(biāo)載的~(131)I治療惡性腦膠質(zhì)瘤Ⅱ期臨床試驗的三種給藥途徑的研究[A];第一屆中國腫瘤靶向治療技術(shù)大會論文集[C];2003年

3 于翠;施曼鈴;王桂珍;吳建祥;周雪平;;幾種重要植物病毒單克隆抗體的制備和快速檢測方法的建立[A];第三次全國植物病毒和病毒防治學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2003年

4 劉振勇;鄧國華;李呈軍;張立春;田國彬;何后軍;于康震;陳化蘭;;抗禽流感H9N2亞型血凝素特異性單克隆抗體的制備與分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會暨中國免疫學(xué)會獸醫(yī)免疫分會第六次研討會論文集[C];2005年

5 李振宇;趙益明;董寧征;沈飛;阮長耿;;抗FⅧ-C2區(qū)單克隆抗體的制備及鑒定[A];第11次中國實驗血液學(xué)會議論文匯編[C];2007年

6 張改連;黃烽;;抗CD20人鼠嵌合單克隆抗體rituximab治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的臨床研究[A];第十二屆全國風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

7 郝波;張國新;林艷;楊楊;王宏娣;;抗HCCR單克隆抗體的制備及其在肝癌檢測中的初步應(yīng)用[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編(下冊)[C];2007年

8 陶薇;楊連華;何卓晶;洪艷;陳勇;;抗戊型肝炎病毒重組蛋白單克隆抗體的制備和鑒定[A];浙江省醫(yī)學(xué)會醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)及醫(yī)學(xué)病毒學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

9 馬翠卿;郭奕陽;顧海燕;曾瑞紅;楊麗娟;魏林;;一株抗A族鏈球菌表面蛋白Fba的單克隆抗體對應(yīng)的表位與Fba結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白FH的位點重疊[A];河北省免疫學(xué)會第六次免疫學(xué)大會資料匯編[C];2010年

10 楊天兵;沈倍奮;;抗人重組白細(xì)胞介素1(rHIL-1)單克隆抗體的研制[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會第五次會議論文摘要匯編[C];1992年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 文來;2010年單克隆抗體市場有望擴(kuò)三倍[N];中國醫(yī)藥報;2005年

2 莊愉;單克隆抗體異軍突起[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2003年

3 ;單克隆抗體異軍突起[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2003年

4 記者 尹暉;單克隆抗體研發(fā)進(jìn)入新階段[N];無錫日報;2010年

5 尹暉;最大單克隆抗體研制項目在馬山奠基[N];無錫日報;2010年

6 記者 馬波;滇將建首家單克隆抗體基地[N];科技日報;2000年

7 ;單克隆抗體應(yīng)用前景看好[N];中國醫(yī)藥報;2002年

8 探微;單克隆抗體技術(shù)在中藥研究中的應(yīng)用初探[N];中國醫(yī)藥報;2006年

9 毛文波;單克隆抗體:征服癌癥的新方法[N];科技日報;2004年

10 勞云信;單克隆抗體 抗擊腫瘤的生力軍[N];中國醫(yī)藥報;2004年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 唐琳;肝再生增強(qiáng)因子與肝癌發(fā)生、發(fā)展關(guān)系的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

2 侯桂華;巨噬細(xì)胞移動抑制因子在同種移植排斥中作用及其機(jī)理的研究[D];山東大學(xué);2004年

3 高勇;新型單克隆抗體熒光探針染料的合成及免疫熒光組織化學(xué)應(yīng)用[D];西北大學(xué);2006年

4 江敏;大鼠單克隆抗體的制備、鑒定、基因克隆、抗原分析以及藥物偶聯(lián)物的抗腫瘤作用研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1996年

5 秦迎松;人促血液血管細(xì)胞生成素(Haemangiopoietin, HAPO)單克隆抗體的制備、鑒定及應(yīng)用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

6 萬忠海;抗PEA單抗和單鏈抗體制備及在綠膿感染中的應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2008年

7 呂大偉;抗RANKL單克隆抗體在大鼠類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型中的應(yīng)用及RANKL轉(zhuǎn)錄調(diào)控的探索性研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

8 莊國洪;抗DR4、DR5單克隆抗體誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株凋亡的研究[D];吉林大學(xué);2004年

9 付建芳;溶藻弧菌抗獨特型抗體基因工程疫苗的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

10 王曉潔;對蝦白斑癥病毒快速檢測試劑盒的研制及其應(yīng)用[D];中國海洋大學(xué);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 易婷婷;抗人蛋白酶激活受體3單克隆抗體的制備與鑒定[D];汕頭大學(xué);2007年

2 黃子逸;LIGHT基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株和單克隆抗體的研制及其對T細(xì)胞的共刺激效應(yīng)[D];蘇州大學(xué);2010年

3 李鐵民;抗P-選擇素單克隆抗體對大鼠胰腺缺血再灌注損傷的作用實驗研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2003年

4 李曉龍;肝癌相關(guān)抗原SMP30 mRNA在癌細(xì)胞中的表達(dá)及其單克隆抗體的制備[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

5 鄭杰;分泌抗豬流感病毒(河南株)單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株的制備、鑒定和初步應(yīng)用[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

6 邵煒慧;鹽酸克倫特羅單克隆抗體的研制及初步應(yīng)用[D];揚州大學(xué);2005年

7 楊寧;納豆激酶的純化及其單克隆抗體的制備鑒定[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

8 唐琦;抗麻痹性貝毒素GTX2,3單克隆抗體的制備及特性分析[D];暨南大學(xué);2005年

9 賈娟娟;抗胰島素單克隆抗體的研制及酶聯(lián)免疫分析方法的建立[D];中國原子能科學(xué)研究院;2005年

10 李彬;TLR4單克隆抗體誘導(dǎo)同種心臟移植免疫耐受的研究[D];蘇州大學(xué);2010年



本文編號:1682435

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://www.sikaile.net/yixuelunwen/binglixuelunwen/1682435.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶d5b66***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com