本文選題：血睪屏障　切入點(diǎn)：支持細(xì)胞　出處：《生命科學(xué)研究》2014年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：探討Rab13 GTPase對血睪屏障(blood testis barrier,BTB)通透性的調(diào)節(jié)機(jī)制。體外分離培養(yǎng)20 d齡大鼠睪丸支持細(xì)胞,睪酮處理后測定跨上皮電阻(transepithelial electrical resistance,TER),FITC-鬼筆環(huán)肽染色分析F-actin分布,并采用Western印跡檢測Rab13在睪酮處理前后的表達(dá)變化;si RNA干擾培養(yǎng)支持細(xì)胞中Rab13的表達(dá),Western印跡檢測沉默效果并檢測連接蛋白表達(dá)變化;TER測定Rab13沉默前后上皮屏障功能改變,F-actin染色分析Rab13沉默對肌動(dòng)蛋白絲分布的影響。結(jié)果顯示,睪酮處理可使體外支持細(xì)胞屏障TER值升高,F-actin在膜下聚集增強(qiáng),且Rab13在睪酮處理后表達(dá)量明顯降低;Rab13 si RNA處理不影響連接蛋白質(zhì)的表達(dá),但可引起F-actin在細(xì)胞連接處的分布增強(qiáng),導(dǎo)致體外BTB屏障功能增強(qiáng)。表明Rab13可通過調(diào)節(jié)F-actin的排布影響體外BTB通透性。
[Abstract]:To investigate the regulatory mechanism of Rab13 GTPase on the permeability of blood testis barrier barrier (BBB), testicular Sertoli cells of 20 day old rats were isolated and cultured in vitro. After testosterone treatment, the distribution of F-actin was determined by transdermal resistor transepithelial electrical resistance assay. Western blot was used to detect the expression of Rab13 before and after testosterone treatment. Western blot was used to detect the expression of Rab13 in cultured Sertoli cells with si RNA interference. Western blot was used to detect the silencing effect and the change of connexin expression. Ter was used to determine the epithelial barrier function before and after Rab13 silencing. The effect of Rab13 silencing on the distribution of actin filaments was analyzed by changing F-actin staining. Testosterone treatment increased the TER value of Sertoli cell barrier in vitro and increased the concentration of F-actin in the membrane, and the expression of Rab13 decreased significantly after testosterone treatment, and the expression of ligation protein was not affected by RNA treatment, but the distribution of F-actin was enhanced at the junction of cells. It was suggested that Rab13 could influence the permeability of BTB by regulating the arrangement of F-actin.
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81100462;81370756)
【分類號】：R335

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