本文關(guān)鍵詞： 臍帶 間充質(zhì)干細(xì)胞 胰島素分泌細(xì)胞 分化 誘導(dǎo)　出處：《汕頭大學(xué)》2007年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 目的： 探討人臍帶華爾通膠質(zhì)來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)分化為胰島素分泌細(xì)胞的可能性，為1型糖尿病的細(xì)胞移植治療提供理論依據(jù)和新的細(xì)胞來源。 材料和方法： 從足月剖宮產(chǎn)的新生兒臍帶華爾通膠質(zhì)中分離培養(yǎng)出間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)，用含尼克酰胺和β巰基乙醇的低糖DMEM培養(yǎng)基(L-DMEM)預(yù)誘導(dǎo)后，，以含尼克酰胺和β巰基乙醇的高糖DMEM培養(yǎng)基(H-DMEM)誘導(dǎo)其向胰島素分泌細(xì)胞分化，應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)胰島素的表達(dá)，以雙硫腙染色鑒定胰島β細(xì)胞，并用放射免疫法(RIA)檢測(cè)誘導(dǎo)后細(xì)胞培養(yǎng)液中的胰島素水平，所有檢測(cè)均以未誘導(dǎo)細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照。 結(jié)果： 從人臍帶華爾通膠分離、培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞，可貼壁生長(zhǎng)，體外生長(zhǎng)形態(tài)類似于成纖維細(xì)胞，可以維持未分化狀態(tài)穩(wěn)定增殖，體外增殖可超過10代。尼克酰胺和β巰基乙醇聯(lián)合誘導(dǎo)可使人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)向胰島素分泌細(xì)胞分化，分化的細(xì)胞表達(dá)胰島β細(xì)胞的標(biāo)記胰島素(insulin)。雙硫腙染色發(fā)現(xiàn)臍帶華爾通膠來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)經(jīng)尼克酰胺和β巰基乙醇誘導(dǎo)后細(xì)胞內(nèi)鋅離子增加。通過Insulin放射免疫法(RIA)檢測(cè)誘導(dǎo)前后細(xì)胞培養(yǎng)液中胰島素的濃度，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組胰島素水平分別為6.63mIU／L和3.39mIU／L，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。 結(jié)論： 人臍帶華爾通膠中含有豐富的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)，易于培養(yǎng)擴(kuò)增。人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)經(jīng)尼克酰胺和β巰基乙醇聯(lián)合誘導(dǎo)后可表達(dá)胰島β細(xì)胞的表面標(biāo)記，可以增加細(xì)胞中的鋅離子含量使之具備胰島β細(xì)胞的特點(diǎn)，誘導(dǎo)后的細(xì)胞以也可以分泌胰島素。本研究初步證明，用尼克酰胺和β巰基乙醇可以誘導(dǎo)人臍帶華爾通膠來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)成為胰島素分泌細(xì)胞，從而為1型糖尿病細(xì)胞移植治療提供新的細(xì)胞來源。
[Abstract]:Objective: To explore the possibility of differentiation of mesenchymal stem cells derived from human umbilical cord Walton glial mesenchymal stem cells into insulin-secreting cells and to provide a theoretical basis and a new cell source for the treatment of type 1 diabetes mellitus. Materials and methods: Mesenchymal stem cells (MSCs) were isolated from the umbilical cord of newborns undergoing caesarean section. L-DMEM was preinduced in low-sugar DMEM medium containing nicotinamide and 尾 -mercaptoethanol. High glucose DMEM medium containing nicotinamide and 尾 -mercaptoethanol was used to induce the differentiation into insulin-secreting cells, and the expression of insulin was detected by immunocytochemistry. Islet 尾 cells were identified by dithizone staining and insulin levels were detected by radioimmunoassay (RIA). Uninduced cells were used as experimental controls. Results: The mesenchymal stem cells isolated from the human umbilical cord and cultured in vitro can grow on the wall, and the growth morphology in vitro is similar to that of fibroblasts, which can maintain stable proliferation in undifferentiated state. The combination of nicotinamide and 尾 -mercaptoethanol could induce the differentiation of human umbilical cord mesenchymal stem cells into insulin-secreting cells. Differentiated cells expressed islet 尾 -labeled insulin insulin.Dithizone staining found mesenchymal stem cells derived from umbilical cord Walton glue mesenchymal stem cells (MSCs). The concentration of insulin in the culture medium was detected by Insulin radioimmunoassay before and after the induction of nicotinamide and 尾 mercaptoethanol. It was found that the insulin levels in the experimental group and the control group were 6.63mIUP / L and 3.39mIUP / L, respectively, and the difference was statistically significant (P < 0.05). Conclusion: There are abundant mesenchymal stem cells (MSCs) in human umbilical cord Walton glue. Human umbilical cord mesenchymal stem cells (MSCs) were induced by nicotinamide and 尾 mercaptoethanol to express the surface markers of islet 尾 cells. It can increase the content of zinc ions in the cells to make them possess the characteristics of islet 尾 cells, and the induced cells can also secrete insulin. Nicotinamide and 尾 -mercaptoethanol can induce mesenchymal stem cells (MSCs) from human umbilical cord warton-glue-derived mesenchymal stem cells (MSCs) to become insulin-secreting cells, thus providing a new cell source for the transplantation of type 1 diabetic cells.
【學(xué)位授予單位】：汕頭大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R587.1;R329

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 管英華;謝揚(yáng)虎;魏曉巍;李玉云;;臍帶源性和臍血源性間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的比較[J];中華全科醫(yī)學(xué);2011年09期

2 王燕茹;張育;;間充質(zhì)干細(xì)胞與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2011年16期

3 ;本期專題:臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年32期

4 馮德鵬;李雪莉;范炎;;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];國(guó)際老年醫(yī)學(xué)雜志;2010年05期

5 吳玉卓;陳紅;;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)成肝細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];中國(guó)肝臟病雜志(電子版);2008年02期

6 李曉玲;朱旅云;趙芳;;臍帶Wharton'sJelly中間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年32期

7 隆玄;吳曉丹;施勁東;李善群;;間充質(zhì)干細(xì)胞在急性肺損傷中的應(yīng)用進(jìn)展[J];中國(guó)臨床醫(yī)學(xué);2011年03期

8 楊光忠;陳文明;;間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)功能[J];臨床合理用藥雜志;2011年31期

9 程慶;白志明;;間充質(zhì)干細(xì)胞歸巢的研究進(jìn)展[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2011年09期

10 傅強(qiáng);;他達(dá)拉非可對(duì)干細(xì)胞產(chǎn)生持久而穩(wěn)定的保護(hù)作用[J];中華男科學(xué)雜志;2011年08期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 肖宏濤;劉毅;;人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞研究近況及其在脂肪組織工程中的應(yīng)用[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

2 李云濤;徐燕;葛薇;孟恒星;于珍;李長(zhǎng)虹;萬長(zhǎng)春;李茜;韓俊領(lǐng);邱錄貴;;低血清條件下人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞的分離和鑒定[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

3 孫海梅;季鳳清;王丹妮;曾曉蓓;楊慧;;優(yōu)化臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的新方法[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)第八屆組織學(xué)與胚胎學(xué)教學(xué)與科研技術(shù)經(jīng)驗(yàn)交流會(huì)論文摘要[C];2008年

4 馬蘭蘭;施萍;龐希寧;;不同胎齡人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞研究[A];“細(xì)胞活動(dòng) 生命活力”——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)全體會(huì)員代表大會(huì)暨第十二次學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2011年

5 張顥;陶艷玲;邱林;張伯龍;馬軍;陳志哲;劉擁軍;韓忠朝;;一種具有免疫負(fù)調(diào)節(jié)功能的人臍帶源間充質(zhì)干細(xì)胞[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

6 羅高興;程文廣;黃正根;賀偉峰;袁順宗;陳希煒;吳軍;;應(yīng)用人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)小鼠皮膚缺損創(chuàng)面的實(shí)驗(yàn)研究[A];第六屆全國(guó)燒傷救治專題研討會(huì)論文匯編[C];2009年

7 王巧稚;韓藝;趙宏賢;余鴻;劉廣益;;當(dāng)歸誘導(dǎo)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化和毒性檢測(cè)的研究[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2009年

8 王玉紅;陳光輝;;地黃低聚糖對(duì)人脂肪組織源性間充質(zhì)干細(xì)胞分泌肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的影響[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合危重病、急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

9 程文廣;羅高興;黃正根;賀偉峰;袁順宗;陳希煒;吳軍;;人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究[A];第八屆全國(guó)燒傷外科學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2007年

10 杜鳳移;王皓;楊樹龍;趙繪存;楊英;楊軍;;納米纖維支架對(duì)大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞分化的影響[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第29屆學(xué)術(shù)年會(huì)暨首屆生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 本報(bào)記者 胡其峰;揭開臍帶血的神秘面紗[N];光明日?qǐng)?bào);2009年

2 本報(bào)特約記者 衛(wèi)一鳴;臍帶血留還是不留?[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2009年

3 本報(bào)記者 程國(guó)媛;臍帶血,這種“保險(xiǎn)”需要否？[N];山西日?qǐng)?bào);2009年

4 本報(bào)記者 吳玲娟;你為孩子存臍帶血嗎?[N];保健時(shí)報(bào);2009年

5 南方日?qǐng)?bào)見習(xí)記者 徐滔　記者 胡念飛 通訊員 盧松齡;臍帶血儲(chǔ)存:生命銀行還是空頭支票[N];南方日?qǐng)?bào);2009年

6 本報(bào)記者 聶國(guó)春　整理;臍帶血,存還是捐？[N];中國(guó)消費(fèi)者報(bào);2010年

7 本報(bào)記者 胡冰心;臍帶血,存還是不存？[N];鎮(zhèn)江日?qǐng)?bào);2010年

8 沈敏;收集捐獻(xiàn)寶寶臍帶血,或可救人一命[N];新華每日電訊;2010年

9 實(shí)習(xí)生 吳旖旎;臍帶血存儲(chǔ)能否成為“生命保險(xiǎn)”？[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

10 記者 張燦燦;臍帶血造血干細(xì)胞管理加強(qiáng)[N];健康報(bào);2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 彭飛;620nm非相干紅光對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的光生物調(diào)節(jié)作用[D];華中科技大學(xué);2011年

2 于美嬌;系統(tǒng)歸巢的間充質(zhì)干細(xì)胞在牙周組織修復(fù)再生過程中的作用研究[D];山東大學(xué);2011年

3 李東杰;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)創(chuàng)面愈合及體外誘導(dǎo)分化為表皮樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

4 李寶軍;脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)及復(fù)合PLGA體內(nèi)異位成軟骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2007年

5 朱雅姝;Flk-1~+間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用及其分子機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

6 吳桂珠;脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞治療壓力性尿失禁的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

7 熊卉;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1基因體外轉(zhuǎn)染兔顳下頜關(guān)節(jié)滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞向纖維軟骨轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)研究[D];武漢大學(xué);2010年

8 田X;P38 MAPK參與調(diào)節(jié)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)人白血病腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

9 張顥;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞免疫學(xué)特性研究及其臨床應(yīng)用初步探討[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

10 苗宗寧;胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞與絲素蛋白/羥基磷灰石材料在骨創(chuàng)傷修復(fù)中的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馬蘭蘭;不同胎齡人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年

2 陳芳;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)化療所致卵巢顆粒細(xì)胞損傷的體外實(shí)驗(yàn)[D];暨南大學(xué);2010年

3 高楊;人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)肝癌轉(zhuǎn)移的影響及機(jī)制的探討[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

4 高志買;間充質(zhì)干細(xì)胞高分子量分泌成分對(duì)輻射性腸損傷的修復(fù)作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

5 劉志鵬;大鼠胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性[D];暨南大學(xué);2011年

6 章守琴;人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞支持造血的體外研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年

7 陳嘉;脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞體外轉(zhuǎn)分化內(nèi)皮細(xì)胞及褪黑素調(diào)控研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

8 張茜真;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定以及干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)其重編程的研究[D];浙江理工大學(xué);2010年

9 衛(wèi)佳;干細(xì)胞因子修飾的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)造血干細(xì)胞的作用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

10 陳義;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及體外重建角膜后板層的初步研究[D];暨南大學(xué);2010年

本文編號(hào)：1480355