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大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng):第3代細(xì)胞增殖快純度高

發(fā)布時(shí)間:2018-01-04 22:10

  本文關(guān)鍵詞:大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng):第3代細(xì)胞增殖快純度高 出處:《中國組織工程研究》2014年50期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:背景:進(jìn)行組織工程研究的首要環(huán)節(jié)是培養(yǎng)出大量生物活性好、增殖速度快、細(xì)胞純度高的種子細(xì)胞。目的:分析全骨髓貼壁法培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性。方法:采用全骨髓貼壁法分離、培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,繪制第3代細(xì)胞生長曲線,觀察各代細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,流式細(xì)胞分析法測(cè)定第2代、第3代細(xì)胞表面標(biāo)志物(CD29、CD90、CD34、CD45)的表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:經(jīng)全骨髓貼壁法培養(yǎng)3代以內(nèi)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞均具有典型成纖維樣細(xì)胞形態(tài)而且貼壁生長;第2代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表型CD29、CD90、CD34、CD45表達(dá)分別為91.5%,96.2%,1.3%,8.0%,第3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分別為98.2%,98.1%,0.6%,2.0%;細(xì)胞生長曲線結(jié)果表明,以細(xì)胞濃度8×107L-1接種,細(xì)胞增殖速度快,獲得的細(xì)胞總數(shù)多。綜合形態(tài)學(xué)及細(xì)胞鑒定結(jié)果,第3代大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞活性好、增殖速度快、細(xì)胞純度高,適合作為組織工程研究的種子細(xì)胞。
[Abstract]:Background: the first step of tissue engineering research is to cultivate a large number of biological activity and rapid proliferation. Objective: to analyze the biological characteristics of rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) cultured by whole bone marrow adherent method. Methods: rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were isolated and cultured by whole bone marrow adherent method. The cell growth curve of the third generation was plotted and the morphological changes of each passage were observed. The surface markers of the second generation and the third generation were determined by flow cytometry (FCM). Results and conclusion: bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) cultured by whole bone marrow adherent method all had typical fibroblast morphology and adherent growth. The phenotypic expression of CD29, CD90, CD34, CD45 in the second generation of bone marrow mesenchymal stem cells was 91.5% and 96.2%, respectively. The third generation of bone marrow mesenchymal stem cells were 98.2 and 98.1, respectively. The results of cell growth curve showed that when the cell concentration was 8 脳 10 ~ (7) L ~ (-1), the rate of cell proliferation was fast, and the total number of cells was more. The third generation of rat bone marrow mesenchymal stem cells have good activity, rapid proliferation and high purity, so they are suitable for tissue engineering research.
【作者單位】: 成都醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院脊柱外科;中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?卺t(yī)院骨科中心;
【基金】:海口市重點(diǎn)科技項(xiàng)目(2011-0135,2014-082) ?谑腥嗣襻t(yī)院院內(nèi)課題(2014-YQY-07)~~
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 0引言Introduction骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一類具有自我更新能力和多向分化潛能的細(xì)胞,具有取材方便、培養(yǎng)增殖速度快、無倫理學(xué)爭(zhēng)議、低免疫原性等優(yōu)點(diǎn),目前已成為治療脊髓損傷及其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病的良好供體細(xì)胞[1-7]。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是來源于骨髓組織的非造血干細(xì)胞,數(shù)量極少,

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