本文關(guān)鍵詞：脫氧核酶阻斷period1基因表達(dá)的體內(nèi)外研究　出處：《四川大學(xué)》2005年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 藥物成癮 period 1 基因 脫氧核酶 體外切割 條件位置偏愛 MAPK SH-SY5Y

【摘要】：藥物成癮是長(zhǎng)期濫用藥物造成的,已成為全球關(guān)心的醫(yī)學(xué)和社會(huì)問題,對(duì)藥物的精神依賴至今尚無(wú)理想的治療方法,本研究立足于近日基因period1(per1)和藥物成癮的關(guān)系,采用脫氧核酶阻斷per1基因的表達(dá),深入探討per1基因?qū)λ幬锍砂a影響作用,進(jìn)而尋求解決藥物成癮的基因療法。 針對(duì)period1(per1)RNA組分模板區(qū)設(shè)計(jì)合成10—23型脫氧核酶(deoxyribozyme)DRz164、DRz256,構(gòu)建pcDNA3.1(+)-per1_(164:256)體外轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒,T7/SP6體外轉(zhuǎn)錄后,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物和DRz164或DRz256在一定的條件下行體外切割反應(yīng),用地高辛核酸檢測(cè)試劑盒檢測(cè)脫氧核酶對(duì)per1mRNA組分的體外切割效率。脂質(zhì)體介導(dǎo)法,pcDNA3—per1和DRz分別導(dǎo)入NIH3T3細(xì)胞,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)NIH3T3細(xì)胞per1表達(dá)。結(jié)果顯示DRz164和DRz256可以特異性地切割per1mRNA組分,反應(yīng)2h切割效率分別為63%和50.5%。pcDNA3—per1和DRz共轉(zhuǎn)染NIH3T3后,per1基因表達(dá)下降,Per1蛋白生成減少。 預(yù)先小鼠腦室注射DRz164,建立嗎啡成癮(慢性依賴)動(dòng)物模型,通過(guò)條件位置偏愛實(shí)驗(yàn)觀察DRz164對(duì)嗎啡獎(jiǎng)賞效應(yīng)的影響。最后一次嗎啡(鹽水)注射后每隔4h提取腦組織蛋白,western blot檢測(cè)Per1蛋白變化,觀察DRz164對(duì)Per1蛋白的影響。最后一次嗎啡(鹽水)注射后
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【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R346

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1351501