本文關(guān)鍵詞：一種新的來(lái)源于人的穿膜肽的功能和對(duì)生物節(jié)律影響的研究　出處：《四川大學(xué)》2005年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 穿膜肽 細(xì)胞膜 血腦屏障 hClock DNA結(jié)合序列 近日節(jié)律 per1

【摘要】：目的 研究一種新的人體蛋白結(jié)構(gòu)域(Circadian locomoter output cycles kaput protein's DNA-binding peptide,hCLOCK's DNA_BIND,hClock-(35-47))對(duì)多種細(xì)胞細(xì)胞膜的穿膜作用及其通過(guò)大鼠血腦屏障的作用。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探討了hClock-(35-47)通過(guò)細(xì)胞膜的一些相關(guān)機(jī)理,及其內(nèi)化入細(xì)胞后對(duì)細(xì)胞近日節(jié)律基因轉(zhuǎn)錄的影響。 方法 化學(xué)合成hClock-(35-47),N端標(biāo)記FITC綠色熒光素,與培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞(ECV-304)和原代培養(yǎng)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞孵化一定時(shí)間后,熒光顯微鏡下觀察其對(duì)多種細(xì)胞細(xì)胞膜的穿膜作用,并采用Image-Pro Plus(Version 4.5 for Windows~(TM))來(lái)分析細(xì)胞熒光強(qiáng)度。采用MTT比色實(shí)驗(yàn)測(cè)定hClock-(35-47)的細(xì)胞毒性。在此基礎(chǔ)上,經(jīng)大鼠頸總動(dòng)脈注射hClock-(35-47)后,做大鼠大腦冰凍切片,熒光顯微鏡下觀察其通過(guò)大鼠血腦屏障進(jìn)入腦細(xì)胞的情況。在培養(yǎng)基中加入肝素,通過(guò)在熒光顯微鏡下觀察標(biāo)記FITC的hClock-(35-47)內(nèi)化入細(xì)胞的情況,來(lái)了解肝素對(duì)hClock-(35-47)內(nèi)化入細(xì)胞的抑制
[Abstract]:Objective to study the effect of Circadian Locomoter output cycles kaput protein's DNA-binding peptide (hCLOCK's DNA_BIND, hClock- (35-47)) on the membrane permeability of various cell membranes and its role in blood-brain barrier in rats. On this basis, we further discussed the mechanism of hClock- (35-47) through cell membrane and its influence on the transcription of cell circadian genes after internalization.
【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R341

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本文編號(hào)：1347519