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一種新的促進體外培養(yǎng)肝細胞活性及增殖的方法

發(fā)布時間:2017-12-27 14:35

  本文關鍵詞:一種新的促進體外培養(yǎng)肝細胞活性及增殖的方法 出處:《重慶大學》2006年碩士論文 論文類型:學位論文


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【摘要】: 體外肝細胞培養(yǎng)是生物制藥和人工肝支持系統(tǒng)的技術(shù)基礎。體外培養(yǎng)肝細胞的活性低、增殖能力差一直是制約其發(fā)展的瓶頸問題,怎樣提高肝細胞活性及增殖能力是目前研究的熱點。本課題將中藥黃芪(AM)、當歸(AN)與體外肝細胞培養(yǎng)相結(jié)合,研究其對肝細胞形態(tài)及生理功能的影響,目前這方面的研究少見報道。并且首次以血清藥理學方法研究了兩者的不同比例對肝細胞的形態(tài)及生理功能的影響,為進一步提高體外培養(yǎng)肝細胞活性及得率提供實驗依據(jù),以及為臨床肝病治療提供新的藥物。 研究含藥血清對細胞形態(tài)及生理功能的影響:分別給日本大耳白兔灌胃AM、AN以及不同比例的AMAN合劑,制備對照血清及含藥血清,以制備的血清培養(yǎng)被H2O2氧化的L02細胞,以全自動生化檢測儀測定Alb及ALT含量,以3H-TdR摻入法和MTT法測定L02細胞增殖情況,透射電鏡觀察細胞微結(jié)構(gòu)的變化,得到以下結(jié)論:(1) AM與AN比例為3:1時Alb分泌明顯增加(P0.01)、ALT含量明顯降低(P0.01)。結(jié)果提示AM與AN比例為3:1時促進L02細胞分泌功能,提高細胞膜穩(wěn)定性;(2)透射電鏡觀察:AM與AN比例為3:1組細胞器豐富,以粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體為主,少見凋亡小體,是促進L02細胞的分泌功能及抑制凋亡的形態(tài)學基礎。(3) AM與AN比例為3:1組OD值與CPM值明顯增加(P0.05),提示AM與AN比例為3:1時L02細胞的增殖能力明顯增加。 研究AMAN對L02細胞增殖能力影響的機制:采用免疫組織化學染色(SABC法)測定AM與AN比例為3:1時對Bcl-2蛋白表達的陽性率的影響,結(jié)果顯示:Bcl-2蛋白表達陽性率明顯提高。提示AMAN可以通過上調(diào)Bcl-2蛋白表達抑制肝細胞的凋亡達到促進細胞增值的作用。
[Abstract]:In vitro hepatocyte culture is the technical basis of bio pharmaceutical and artificial liver support system. The low activity and poor proliferation ability of hepatocytes in vitro have been bottlenecks restricting their development. How to improve the activity and proliferation ability of hepatocytes is currently a research hotspot. The aim of this study is to study the effects of Astragalus membranaceus (AM), Angelica sinensis (AN) and hepatocyte culture in vitro on the morphological and physiological functions of hepatocytes. For the first time, the effects of different proportions on the morphological and physiological functions of hepatocytes were studied by serum pharmacology. It provided experimental evidence for further improving the activity and yield of hepatocytes in vitro, and providing new drugs for clinical treatment of liver diseases.
【學位授予單位】:重慶大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R329

【參考文獻】

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本文編號:1342110

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