本文關(guān)鍵詞：銅綠假單胞菌外膜蛋白OprH原核表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)

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【摘要】：目的克隆銅綠假單胞菌外膜蛋白OprH基因,構(gòu)建其原核表達(dá)載體并鑒定其表達(dá)。方法從銅綠假單胞菌中提取基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增OprH基因;采用T-A克隆技術(shù)構(gòu)建pMD19T-OprH重組質(zhì)粒,并經(jīng)酶切和序列測定后,獲得OprH片段插入到原核表達(dá)載體pET28b中,以構(gòu)建pET28b-OprH重組表達(dá)質(zhì)粒,并在表達(dá)宿主菌E.Coli BL21中經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)及通過SDS-PAGE電泳鑒定。結(jié)果 pET28b-OprH原核表達(dá)載體構(gòu)建成功:重組表達(dá)質(zhì)粒經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后表達(dá)外膜蛋白OprH。結(jié)論成功克隆了OprH基因并獲得原核表達(dá)物,為進(jìn)一步研究快速檢測該菌的方法奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院免疫教研室;齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院燒傷科;
【基金】：齊齊哈爾市科技局指令性科研計劃課題(項目編號:SF-201106)~~
【分類號】：R3416
【正文快照】： 銅綠假單胞菌為條件致病菌,是醫(yī)源性感染的 61.7T。擴(kuò)增的目的基因片段大小為744bp,可編主要病原菌之一,廣泛分布于自然界的土壤、水、碼整個OprH基因序列�？諝饧叭梭w皮膚、腸道、呼吸道內(nèi)。該致病菌可在 PCR擴(kuò)增過程:應(yīng)用50^反應(yīng)體系,取由各種原因?qū)е碌娜梭w抵抗力低下時,于

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