本文關(guān)鍵詞：綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離鑒定

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【摘要】：背景:轉(zhuǎn)基因動(dòng)物提取的間充質(zhì)干細(xì)胞自身攜帶綠色熒光蛋白,與傳統(tǒng)病毒、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染相比,能在活細(xì)胞中穩(wěn)定地表達(dá),可較快篩選其修飾的細(xì)胞。目的:觀察綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性。方法:取2周齡的綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因大鼠雙側(cè)長(zhǎng)骨骨髓,采用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)分析第5代綠色熒光蛋白陽(yáng)性骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞表型,并分別加入成骨及成脂條件培養(yǎng)液進(jìn)行體外多向誘導(dǎo)分化,采用茜素紅鈣鹽染色和油紅O染色進(jìn)行鑒定。結(jié)果與結(jié)論:成功獲得了穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表達(dá)CD90和CD105,不表達(dá)或弱表達(dá)CD14和CD45。經(jīng)成骨誘導(dǎo)3周后茜素紅染色可見(jiàn)有橘紅色鈣鹽沉積,經(jīng)成脂誘導(dǎo)3周后油紅O染色見(jiàn)紅色的脂滴。結(jié)果表明穩(wěn)定表達(dá)的綠色熒光蛋白未影響到骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的多向分化潛能,可作為良好的示蹤因子。
【作者單位】： 解放軍沈陽(yáng)軍區(qū)總醫(yī)院泌尿外科;
【基金】：遼寧省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2013020199)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 寧省本溪市人,滿族,碩士,主要從事男科基礎(chǔ)與臨床研究。通訊作者:曹志強(qiáng),博士,副主任醫(yī)師,解放軍沈陽(yáng)軍區(qū)總醫(yī)院泌尿外科,遼寧省沈陽(yáng)市1108402014.37.004[http://www.crter.org](2014)37-05923-06稿件接受:2014-08-24Wang Yang,Master,Department of Urinary Surgery,General

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7 張慶紅;白細(xì)胞介素2和雌激素受體在大鼠垂體前葉的相互關(guān)系研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2000年

8 張海峰;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)大鼠急性肝功能衰竭治療作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2007年

9 常薪霞;鹽酸小檗堿對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的SD大鼠非酒精性脂肪肝的療效及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

10 頊紅雨;早期應(yīng)激對(duì)海馬學(xué)習(xí)、記憶功能的作用和機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李寧;鉛、鎘、鉻、汞對(duì)大鼠聽(tīng)力的損傷及銅、錳、鋅、硒的保護(hù)作用研究[D];山東大學(xué);2008年

2 王瑩;慢性腎衰竭大鼠全段甲狀旁腺激素與心肌肌鈣蛋白的相關(guān)性分析[D];山西醫(yī)科大學(xué);2008年

3 鄧旭輝;養(yǎng)精種子湯對(duì)缺氧雄性大鼠生殖機(jī)能的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

4 夏長(zhǎng)青;活血降脂靈對(duì)早期動(dòng)脈粥樣硬化大鼠的抗氧化應(yīng)激作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

5 王海燕;運(yùn)動(dòng)對(duì)SD大鼠與GK大鼠骨骼肌中COUP-TF Ⅰ與COUP-TFⅡ基因表達(dá)的影響[D];華東師范大學(xué);2010年

6 吉星;知母提取物的成分分析及對(duì)T2DM大鼠干預(yù)代謝組學(xué)初探[D];廣東藥學(xué)院;2010年

7 曾志;促紅細(xì)胞生成素對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)保護(hù)作用的研究[D];暨南大學(xué);2011年

8 汪春彥;金蕎麥對(duì)克雷伯桿菌肺炎大鼠的保護(hù)作用及其機(jī)制[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

9 王媛媛;胡蘆巴總皂苷對(duì)大鼠脂肪肝的預(yù)防作用[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2005年

10 徐莉;康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦梗死大鼠大腦可塑性機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

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本文編號(hào)：1270280