本文關鍵詞：Tie2基因過表達對單核細胞功能的影響

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【摘要】：目的:探討過表達Tie2基因后單核細胞功能的變化及對內皮細胞增殖、遷移、小管形成的影響,初步研究TEMs(Tie2-expressing monocytes)促血管生成的機制。方法:建立過表達Tie2單核細胞系,熒光倒置顯微鏡下觀察U937細胞的感染情況,RT-PCR、Western blot分別檢測感染后U937細胞Tie2 mRNA和蛋白水平的表達情況;實時定量PCR檢測感染后空載組NC-L.V-U937和實驗組TEK-L.V-U937細胞mRNA水平表達的差異;ELISA檢測NC-L.V-U937和TEK-L.V-U937細胞上清中細胞因子分泌的異同;增殖、遷移、小管形成實驗分別觀察TEK-L.V-U937細胞對內皮細胞增殖、遷移、小管形成的影響。結果:首次建立了轉染Tie2基因的單核細胞系;RT-PCR及Western blot結果顯示,與空載組NC-L.V-U937細胞相比,實驗組TEK-L.V-U937細胞在mRNA和蛋白水平Tie2的表達顯著增加,而NC-L.V-U937細胞幾乎不表達Tie2;Real time-PCR結果顯示,TEK-L.V-U937細胞IL-8的表達較空載組顯著增加(P0.01),IL-10的表達也有所上升(P0.05);與空載組相比,TEK-L.V-U937細胞IL-8蛋白分泌明顯增多(P0.05),VEGFA蛋白分泌量也有上升的趨勢(P0.05),但兩組細胞幾乎都無EGF的分泌;TEK-L.V-U937的條件培養(yǎng)基刺激內皮細胞形成的小管數(shù)較多,IL-8中和抗體能抑制內皮小管的形成;NC-L.V-U937、TEK-L.V-U937饑餓培養(yǎng)上清對內皮細胞的遷移作用不明顯(P0.05);增殖的第3天,與空載組相比,TEK-L.VU937的條件培養(yǎng)基能顯著地引起內皮細胞的增殖(P0.05)。結論:過表達Tie2基因后顯著地增加U937單核細胞系IL-8的表達,并進一步促進了內皮細胞的增殖與小管形成。
【作者單位】： 同濟大學附屬第一婦嬰保健院婦科;同濟大學附屬第一婦嬰保健院轉化醫(yī)學研究中心;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81072136)
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 人Tie2基因定位于9p21區(qū)域,其編碼跨膜蛋白Tie2,Tie2是一種酪氨酸激酶,主要表達于內皮細胞、內皮前體細胞及造血干細胞表面,近年來又發(fā)現(xiàn)了一類特殊的單核巨噬細胞亞群(Tie2 expressingmonocytes/macrophages,TEMs)。與Tie2-單核細胞相比,TEMs有著顯著的促血管生成能力。課題

【共引文獻】

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本文編號：1243435