Mfn-2降低促進(jìn)培養(yǎng)的大鼠血管平滑肌線粒體自噬
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【摘要】:目的研究線粒體融合蛋白基因2(Mfn-2)降低表達(dá)對(duì)培養(yǎng)的大鼠血管平滑肌細(xì)胞(rVSMCs)中線粒體自噬的影響。方法將rVSMCs采用無(wú)血清培養(yǎng)基同步化48h后,分別感染腺病毒載體Adv-Mfn-2-SiRNA和空載Adv-Lac-Z作為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)分為三部分,其中第一部分提取細(xì)胞總蛋白后進(jìn)行Western Blot分析Mfn-2的表達(dá),第二部分JC-1處理后運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)線粒體膜電位的變化,第三部分通過(guò)透射電子顯微鏡顯示線粒體超微結(jié)構(gòu)的改變以及自噬體的形成和積累過(guò)程。結(jié)果 Adv-Mfn-2-SiRNA以感染復(fù)數(shù)60pfu/細(xì)胞感染同步化后的rVSMCs 24h后,Western Blot分析表明,Mfn-2的表達(dá)與對(duì)照組相比明顯降低(P0.05);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組線粒體膜電位明顯下降(P0.05);透射電子顯微鏡顯示實(shí)驗(yàn)組線粒體減少,而自噬體明顯增多。結(jié)論 Mfn-2降低可導(dǎo)致培養(yǎng)的大鼠血管平滑肌線粒體自噬大量增加
【作者單位】: 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院心血管內(nèi)科;華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院組織學(xué)與胚胎學(xué)系;
【基金】:湖北省自然科學(xué)基金資助(2012FFB02519)
【分類號(hào)】:R363
【正文快照】: 自噬現(xiàn)象是依賴于溶酶體將體內(nèi)損傷的蛋白質(zhì)與細(xì)胞器吞噬清除的一種保守的代謝方式。當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)短缺時(shí),體內(nèi)可通過(guò)自噬過(guò)程消耗自身胞漿中的細(xì)胞器來(lái)滿足能量的需求從而維持機(jī)體的穩(wěn)態(tài)。但是,自噬過(guò)程的過(guò)度激活會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的死亡,大量的研究已表明自噬體的產(chǎn)生增多與心室重構(gòu)
【相似文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1210751
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