本文關鍵詞：硫代磷酸酯類殺蟲劑ScFv抗體庫的構建與初步篩選

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【摘要】：旨在構建硫代磷酸酯類殺蟲劑單鏈抗體(ScFv)庫,并對其進行初步篩選。采用RT-PCR法從牛血清蛋白(BSA)人工抗原免疫的Balb/C小鼠脾細胞中克隆出VH和VL基因,通過重疊延伸PCR方法將VH和VL基因拼接在一起,構建ScFv基因,與表達載體pCANTAB 5E連接后,在大腸桿菌中誘導表達。采用親和富集法,經6輪淘篩后用酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)測定其活性。得到滴度為2.2×106 pfu/mL噬菌體庫,ELISA檢測呈陽性。說明成功表達并篩選得到鼠源抗硫代磷酸酯類殺蟲劑ScFv抗體庫。
【作者單位】： 西北農林科技大學農藥研究所;
【基金】：國家自然科學基金項目(30900995) 陜西省科技研究發(fā)展計劃項目(2011K02-07)
【分類號】：R392
【正文快照】： 硫代磷酸酯類殺蟲劑作為一類有機磷類殺蟲劑(Ops),是一種重要的農業(yè)生產資料,在防治害蟲和增加糧食產量方面發(fā)揮了極大的作用,但由于其大量使用造成的環(huán)境問題也越來越受到人們的關注[1]。傳統(tǒng)的儀器檢測樣品前處理耗時長、操作水平要求高、操作儀器價格昂貴,難以實現(xiàn)大批量樣

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前5條

1 伍一軍,楊琳,李薇;有機磷農藥的多毒性作用[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學;2005年04期

2 溫萬東;劉喜保;高履桐;楊潤亞;祁志軍;;在離子液體中合成有機磷農藥通用半抗原[J];合成化學;2012年05期

3 紐偉民,趙曉聯(lián),趙春城,蔡建榮;有機磷農藥檢測方法綜述[J];江蘇食品與發(fā)酵;2001年01期

4 劉喜保;溫萬東;祁志軍;胡兆農;楊潤亞;;硫代磷酸酯類農藥通用抗原的合成與鑒定[J];西北農林科技大學學報(自然科學版);2012年04期

5 苗向陽,丁淑燕,朱玉良,郝慧芳,邵建軍;噬菌體抗體庫的構建及抗豬脂肪細胞膜單抗的篩選[J];中國農業(yè)科學;2005年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 信維平;;種植速生蔬菜降低大棚土壤中農藥的研究[J];安徽農學通報;2007年08期

2 梁鵬;于艷;孟輝;;微波萃取氣相色譜法測定白菜中有機磷農藥的研究[J];安徽農業(yè)科學;2007年04期

3 彭金云;趙漢民;韋良興;農克良;;超聲波萃取-氣相色譜法對甘蔗中有機磷殘留量的測定[J];安徽農業(yè)科學;2010年03期

4 魯興萌;桂文君;馮真珍;余榮峰;趙新華;;“滅蠶蠅”臨床效果的測定[J];蠶桑通報;2010年04期

5 鄭志明;金社勝;肖希龍;候曉林;;抗諾氟沙星噬菌體單鏈抗體庫的構建與篩選[J];動物醫(yī)學進展;2010年S1期

6 王超;朱惠忠;吳堅;梁吳迪;;帶有取樣比例系數校正功能的便攜式農藥殘留檢測儀研制[J];電子測量技術;2007年10期

7 丁國興;王群;宋樹強;張凱;馮振月;;酶促反應試紙條快速檢測有機磷農藥[J];中國法醫(yī)學雜志;2006年04期

8 徐遠金;李永庫;;蔬菜中闊草清等8種農藥殘留量的高效液相色譜-質譜分析[J];分析試驗室;2006年11期

9 彭金云;韋良興;農克良;林潤國;;基質固相分散-高效液相色譜法測定甘蔗中痕量甲拌磷和特丁硫磷[J];廣東農業(yè)科學;2009年11期

10 楊平;劉萍;蘇曉慶;吳建偉;;新分離的滅蚊真菌(Pythium sp.GY1938)對家蠅幼蟲的安全性檢測[J];貴陽醫(yī)學院學報;2006年03期

中國重要會議論文全文數據庫 前4條

1 劉紅麗;蘇永恒;;蔬菜、水果中有機磷農藥多殘留同時測定的氣相色譜法研究[A];首屆中國中西部地區(qū)色譜學術交流會暨儀器展覽會論文集[C];2006年

2 班付國;賈振民;陳薔;宋志超;;羊組織中有機磷農藥殘留GC檢測方法復核檢驗研究[A];首屆中國中西部地區(qū)色譜學術交流會暨儀器展覽會論文集[C];2006年

3 馬國云;董競武;金耀球;李真觀;仲偉鑒;肖萍;姚小妹;;三唑磷農藥對大鼠的致癌性試驗病理觀察[A];上海市預防醫(yī)學會第二屆學術年會論文匯編[C];2006年

4 鄭志明;金社勝;肖希龍;候曉林;;抗諾氟沙星噬菌體單鏈抗體庫的構建與篩選[A];中國畜牧獸醫(yī)學會食品衛(wèi)生學分會第十一次學術研討會論文集[C];2010年

中國博士學位論文全文數據庫 前5條

1 陳亞紅;細胞內NAD水平分析及多酶氧化體系抑制效應的研究[D];武漢大學;2004年

2 王忠東;基于熒光機理的光纖農藥殘留測量系統(tǒng)的理論與實驗研究[D];燕山大學;2006年

3 周珊珊;手性有機磷農藥的穩(wěn)定性及立體選擇性生物行為研究[D];浙江大學;2009年

4 周珊珊;手性有機磷農藥的穩(wěn)定性及立體選擇性生物行為研究[D];浙江大學;2009年

5 伍偉民;加壓毛細管電色譜技術在貝類毒素和環(huán)境激素等食品安全分析中的應用研究[D];福州大學;2009年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 趙亞鵬;熒光法檢測有機磷殘留總量及其分析應用[D];河南師范大學;2010年

2 劉偉森;蔬菜中有機磷農藥殘留檢測方法及其應用研究[D];華南理工大學;2010年

3 袁雪嬋;煙草中菌核凈農藥殘留檢測技術的研究[D];昆明理工大學;2009年

4 武春霞;新型液相微萃取技術在環(huán)境樣品中農藥殘留測定中的應用[D];河北農業(yè)大學;2011年

5 孫春惠;有機磷農藥在蔬菜上的消解動態(tài)及安全使用分析[D];中北大學;2011年

6 劉彥釗;金屬離子在植物酯酶抑制法中活化作用的研究[D];鄭州大學;2011年

7 尚占江;石英晶體微天平快速檢測殺線蟲劑的研究[D];東北農業(yè)大學;2011年

8 王玉輝;酶抑制法檢測有機磷農藥[D];浙江師范大學;2011年

9 曾陽;神經抑制污染物連續(xù)暴露下大型n灒―aphnia magna）外在行為響應及內在機制研究[D];山東師范大學;2012年

10 黃志英;吡蟲啉、福美雙的電化學分析及六六六、甲胺磷等農藥的殘留分析[D];南京農業(yè)大學;2003年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 伍一軍,冷欣夫;有機磷化合物誘導的遲發(fā)性神經毒性的研究[J];動物學報;1996年04期

2 梁穎;劉媛;祝金鳳;樊明濤;劉賢進;;甲氧基有機磷殺蟲劑廣譜特異性抗體的制備[J];分析化學;2008年05期

3 宋娟;王榕妹;王悅秋;唐雨榕;鄧安平;;半抗原的設計、修飾及人工抗原的制備[J];分析化學;2010年08期

4 李永祥;徐振林;王弘;雷紅濤;孫遠明;沈丹;楊金易;沈玉棟;;二甲氧基硫代磷酸酯類農藥多殘留免疫分析方法研究[J];分析化學;2010年11期

5 謝桂勉;孫遠明;徐振林;李永祥;雷紅濤;王弘;沈玉棟;;硫代磷酸二乙酯類農藥半抗原設計及抗體識別特性[J];高等學�；瘜W學報;2009年11期

6 苗向陽;基因工程抗體的研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī);2003年04期

7 劉華盛;急性有機磷農藥中毒中間綜合征9例報告[J];廣西醫(yī)科大學學報;2000年01期

8 鎖安云;機械通氣救治有機磷農藥中毒中間綜合癥的護理[J];河北醫(yī)學;2002年05期

9 樓小華,梁天錫;59種農藥殘留量的毛細管氣相色譜系統(tǒng)分析[J];環(huán)境化學;1989年03期

10 李治祥,黃士忠,翟延路;測定水中農藥殘留的新方法[J];環(huán)境化學;1989年06期

中國博士學位論文全文數據庫 前2條

1 韓麗君;有機磷農藥的酶免疫化學研究[D];中國農業(yè)大學;2003年

2 王春梅;有機磷高特異性和寬譜單克隆抗體的篩選與比較研究[D];浙江大學;2010年

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 喬宏興;邊傳周;;豬圓環(huán)病毒2型Cap基因的原核表達及ELISA檢測方法的建立[J];中國免疫學雜志;2009年12期

2 裘雪梅;謝少霞;涂順;吳前輝;劉仁榮;;蘇丹紅Ⅰ直接競爭ELISA檢測方法的研究[J];時珍國醫(yī)國藥;2010年10期

3 于婧;曲娟娟;于敏;趙立平;相文華;;重組豬戊型肝炎病毒ORF2區(qū)主要抗原域的原核表達及鑒定[J];中國免疫學雜志;2008年02期

4 衛(wèi)海燕;邵華;;快速現(xiàn)場篩選農藥中毒殘留物的生物分析技術[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2010年04期

5 姚集魯;ELISA在抗-HB_c與IgM抗-HB_c檢測中的應用[J];中山大學學報(醫(yī)學科學版);1982年03期

6 H.C.VAIDYA ,D.N.DIETZLER ,J.H.LADENSON ,張利華;傳統(tǒng)ELISA篩選雜交瘤上清鼠單克隆抗體的誤差[J];細胞與分子免疫學雜志;1986年03期

7 唐家琪,李先富;ELISA捕捉法與雙抗體夾心法檢測HFRSV-IgM抗體的比較[J];細胞與分子免疫學雜志;1988年04期

8 趙樹馨,揚鐵生,郝鳳蘭,劉俊英,王漢勛;弓形體病早期診斷的研究——ELISA法檢測抗弓形體IgM抗體的研究[J];北京大學學報(醫(yī)學版);1989年04期

9 唐中;周祖寅;瞿志明;;對1557人次乙肝“兩對半”檢測結果中幾個問題的討論[J];川北醫(yī)學院學報;1989年03期

10 吳承民;郭永文;鄭煥英;黃美卿;;ELISA與HI試驗檢測麻疹抗體的比較[J];華南預防醫(yī)學;1989年01期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 邢春蓮;徐陽陽;趙蕊;楊一;崔立莉;曹健榮;;血篩產品(ELISA)檢測能力的評價[A];第五次全國免疫診斷暨疫苗學術研討會論文匯編[C];2011年

2 劉辰庚;王培昌;;血清抗碳酸酐酶Ⅲ抗體ELISA檢測方法的建立與初步應用[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術會議論文匯編[C];2011年

3 王凱;虞偉;高德玉;白彩琴;嚴孝嶺;李曉軍;;特異性ACPA免疫復合物ELISA檢測法的建立及其應用[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術會議論文匯編[C];2011年

4 劉少寧;張興曉;鄒金峰;謝之景;朱巖麗;趙欽;周恩民;姜世金;;檢測DuCV抗體ELISA方法的建立及應用[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學分會第十五次學術研討會論文集[C];2010年

5 黃立平;劉長明;危艷武;陸月華;郭龍軍;;檢測豬圓環(huán)病毒2型血清中和抗體阻斷ELISA方法的建立及應用[A];中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術學分會暨中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會第八次學術研討會論文集[C];2010年

6 王麗;朱立葦;徐霄勤;楊雪梅;王擁軍;呂杭軍;;4項目復合ELISA室內質控品制備方法的建立和評估[A];中國輸血協(xié)會第五屆輸血大會論文專集（摘要篇）[C];2010年

7 王輝;姚松濤;劉群;;檢測弓形蟲血清抗體的SPA-ELISA診斷方法的建立及應用[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜寄生蟲學分會第六次代表大會暨第十一次學術研討會論文集[C];2011年

8 喬明明;申屠芬琴;馬永纓;楊欣艷;楊璐;孫明;;豬瘟抗體間接ELISA檢測試劑盒研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會養(yǎng)豬學分會第五次全國會員代表大會暨養(yǎng)豬業(yè)創(chuàng)新發(fā)展論壇論文集[C];2010年

9 肖一紅;呂軍華;聶力;馬曉春;周恩民;;高致病性與傳統(tǒng)型PRRSV鑒別診斷間接ELISA方法的建立及初步應用[A];中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術學分會暨中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會第八次學術研討會論文集[C];2010年

10 韓金樂;賈繼宗;李川;楊亮;何德磊;李娟;葉祥忠;李益民;;腸道病毒71抗原ELISA定量檢測方法構建及其應用[A];第五次全國免疫診斷暨疫苗學術研討會論文匯編[C];2011年

中國重要報紙全文數據庫 前10條

1 本報記者 何源;走近法國軟件產業(yè)[N];電腦報;2003年

2 高彥生;OIE疫情專遞[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

3 李燕燕 熊學莉;心腦血管病相關基因被發(fā)現(xiàn)[N];健康報;2006年

4 張虎;高效菌株可以處理染料生產廢水[N];中國紡織報;2005年

5 毛玉西;未來嬰兒將有“基因說明書”[N];中國國門時報;2006年

6 記者 耿挺;為T細胞“戰(zhàn)士”打造“武器”[N];上�？萍紙�;2008年

7 高彥生;OIE疫情專遞[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

8 庾志成;全球手機電視業(yè)務發(fā)展透視[N];人民郵電;2004年

9 上海市艾滋病監(jiān)測中心供稿;迎戰(zhàn)“艾魔”二十載回眸[N];文匯報;2000年

10 高彥生;OIE疫情專遞[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 宋振梅;Clusterin在食管鱗癌中表達的研究與應用[D];山東大學;2005年

2 何繼紅;阿維菌素類藥物多殘留分析方法的研究[D];中國農業(yè)大學;2005年

3 樂濤;多西環(huán)素殘留免疫學快速檢測技術研究[D];華中農業(yè)大學;2010年

4 張愛霞;抗GP73、HDGF抗體的制備、夾心ELISA法的建立及臨床初步應用[D];南京醫(yī)科大學;2009年

5 王愛華;苦馬豆素人工抗原的合成及其免疫原性研究[D];西北農林科技大學;2008年

6 曹丙蕾;山羊IL-18定量抗原捕獲ELISA檢測方法的建立及其免疫增強作用的研究[D];山東農業(yè)大學;2010年

7 Mudasser Habib;兔出血癥病毒衣殼蛋白VP60基因片段的原核與真核表達[D];浙江大學;2006年

8 鄧省亮;己烯雌酚和雙烯雌酚單克隆抗體的制備及ELISA方法的研究[D];中國農業(yè)科學院;2011年

9 姜金慶;19-去甲睪酮免疫學檢測方法的建立及應用[D];西北農林科技大學;2011年

10 耿宏偉;藍舌病病毒群特異性構象抗原表位的初步鑒定及競爭ELISA檢測方法的建立與應用[D];東北農業(yè)大學;2012年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 范秋佳;己烯雌酚人工抗原合成研究及ELISA檢測方法的建立[D];河北農業(yè)大學;2010年

2 李海;抗恩諾沙星單克隆抗體的研制及初步應用[D];西南農業(yè)大學;2005年

3 武燕斌;漢賽巴爾通體P17基因原核表達及間接ELISA檢測方法的建立[D];內蒙古農業(yè)大學;2011年

4 邊席峰;豬圓環(huán)病毒2型ORF2基因的真核表達及間接ELISA方法的建立[D];四川農業(yè)大學;2005年

5 張景艷;喹乙醇酶聯(lián)免疫分析方法研究[D];甘肅農業(yè)大學;2009年

6 張建群;萊克多巴胺兔單抗的制備與ELISA檢測方法的建立[D];浙江大學;2006年

7 江湖;黃曲霉毒素B_1間接競爭ELISA檢測方法的建立與單克隆抗體免疫親和柱的初步研制[D];南昌大學;2005年

8 符勇耀;抗除蟲菊酯單鏈抗體文庫的構建與篩選[D];重慶大學;2009年

9 王勇鑫;SARS病毒S1基因的表達及其ELISA檢測方法的建立[D];河北師范大學;2006年

10 魏麗麗;鹽酸四環(huán)素單克隆抗體的制備及其初步應用研究[D];西南大學;2007年

，

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