本文關(guān)鍵詞：5型腺病毒載體對(duì)人T淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)染及細(xì)胞毒性分析

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【摘要】：目的:利用5型腺病毒載體轉(zhuǎn)染人T淋巴細(xì)胞,對(duì)其轉(zhuǎn)染T淋巴細(xì)胞的效率以及細(xì)胞毒性進(jìn)行分析。方法:選取T淋巴瘤Jurkat細(xì)胞及原代T細(xì)胞,腺病毒按感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection,MOI)為20、50、100、200和400對(duì)其轉(zhuǎn)染,轉(zhuǎn)染48 h后利用流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染效率;選取腺病毒轉(zhuǎn)染后的不同時(shí)點(diǎn),利用碘化丙啶染色法分析轉(zhuǎn)染對(duì)于細(xì)胞周期的影響;利用Annexin V/7-AAD染色法分析轉(zhuǎn)染誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡情況;利用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)法分析轉(zhuǎn)染對(duì)活細(xì)胞數(shù)目的影響。結(jié)果:5型腺病毒載體轉(zhuǎn)染T淋巴瘤的效率最高,轉(zhuǎn)染效率隨著MOI值的增大而增加;CD8+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率大致相同,T細(xì)胞經(jīng)刺激活化后,CD8+T細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率下降;病毒轉(zhuǎn)染未導(dǎo)致明顯細(xì)胞凋亡;病毒轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞周期與活細(xì)胞數(shù)目沒有顯著影響。結(jié)論:5型腺病毒載體轉(zhuǎn)染T細(xì)胞呈現(xiàn)較低細(xì)胞毒性。
【作者單位】： 廣東藥學(xué)院生命科學(xué)與生物制藥學(xué)院;廣東藥學(xué)院廣東省生物技術(shù)候選藥物研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;永州職業(yè)技術(shù)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部;
【關(guān)鍵詞】： 腺病毒載體 T淋巴細(xì)胞 細(xì)胞毒性
【基金】：科技部“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)“十一五”計(jì)劃項(xiàng)目(No.2009ZX09103-708) 國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.31100664;No.31300737;No.81303292) 東莞市科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2011105102027)
【分類號(hào)】：R393
【正文快照】： T細(xì)胞通過膜表面的T細(xì)胞受體(T-cell recep-tor,TCR)發(fā)揮抗原識(shí)別作用[1-2]。利用抗原特異性TCR基因修飾T細(xì)胞進(jìn)行過繼性移植/回輸,在抑制腫瘤生長、控制病毒感染等方面具有良好的前景[3-4]。腺病毒載體因具有能感染增殖和非增殖細(xì)胞、無插入致突變性、能同時(shí)表達(dá)多個(gè)外源基

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