本文關(guān)鍵詞：沙門菌-斑馬魚感染模型用于自噬的研究

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【摘要】：本文旨在構(gòu)建沙門菌-斑馬魚感染模型,研究幼年斑馬魚體內(nèi)的異源自噬。用不同濃度鼠傷寒沙門菌浸染受精后72h的幼年斑馬魚,繪制7d內(nèi)斑馬魚的存活率曲線以確定適宜的細(xì)菌感染量。以上述細(xì)菌量感染斑馬魚后,熒光顯微鏡下觀察沙門菌在體內(nèi)的播散情況;在不同時(shí)間點(diǎn)計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落,并用蛋白免疫印跡法檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白Lc3和p62的表達(dá),同時(shí)在電子顯微鏡下觀察自噬體結(jié)構(gòu)。結(jié)果顯示,以1×109CFU/ml細(xì)菌量感染斑馬魚后,2d內(nèi)斑馬魚存活率為100%,第3天開始出現(xiàn)死亡。熒光顯微鏡下發(fā)現(xiàn),感染后4h魚體中有細(xì)菌侵入,3d后細(xì)菌擴(kuò)散至全身。細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果顯示,整條魚感染的細(xì)菌量隨時(shí)間延長(zhǎng)不斷增加,但感染后10h侵入魚體細(xì)胞中的菌量顯著低于8h。蛋白免疫印跡結(jié)果顯示,感染后8hLc3-Ⅱ表達(dá)顯著升高,p62表達(dá)顯著降低。透射電子顯微鏡下,感染后8h幼魚細(xì)胞中可觀察到自噬體和自噬溶酶體結(jié)構(gòu)。以上結(jié)果提示,用鼠傷寒沙門菌浸染幼年斑馬魚構(gòu)建的模型可用于追蹤病原菌感染引起的異源自噬的動(dòng)態(tài)變化。
【作者單位】： 蘇州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院病原生物學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】： 鼠傷寒沙門菌 斑馬魚 自噬
【基金】：江蘇省自然科學(xué)基金(BK2011286) 江蘇省研究生創(chuàng)新研究項(xiàng)目(CXZZ12_0831)
【分類號(hào)】：R378.22
【正文快照】： 鼠傷寒沙門菌(Salmonella typhimurium,S.typhimurium)是一種重要的人畜共患病原菌,主要經(jīng)水和食物傳播,可引起食物中毒和胃腸炎等腸道傳染病,其感染發(fā)病率居沙門菌感染首位。2013年11月美國(guó)加利福尼亞州福斯特農(nóng)場(chǎng)發(fā)生了“問(wèn)題雞肉事件”,波及20多個(gè)州,近400人在進(jìn)食被沙門菌

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本文編號(hào)：1067417