本文關(guān)鍵詞：SB203580對脾臟樹突狀細(xì)胞介導(dǎo)的OT-Ⅱ細(xì)胞增殖及分化的影響

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【摘要】：研究背景:CD4+T細(xì)胞功能失常導(dǎo)致的免疫性疾病發(fā)病率逐年增加,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、潰瘍性腸炎等。CD4+T細(xì)胞功能異常有多種誘因,抗原提呈細(xì)胞是最主要因素。樹突狀細(xì)胞是目前已知最主要的抗原提呈細(xì)胞,能夠吞噬抗原,加工處理,將抗原信息提呈給T、B細(xì)胞,從而激活機(jī)體的免疫應(yīng)答。p38 MAPK信號通路作為MAPK信號通路的一個重要分支,調(diào)控細(xì)胞的生長、活化、增殖和凋亡。SB203580是p38 MAPK的特異性抑制劑,抑制其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。本文將研究SB203580對樹突狀細(xì)胞的表型和功能的影響及可能機(jī)制。目的:探討阻斷p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信號通路對脾臟樹突狀細(xì)胞(DC)介導(dǎo)的CD4+-雞卵清蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠T(OT-Ⅱ)細(xì)胞增殖和分化的影響。方法:1應(yīng)用CD11c+免疫磁珠分選C57BL/6小鼠脾臟中DC。2應(yīng)用CD4+分離試劑盒從OT-Ⅱ轉(zhuǎn)基因小鼠脾臟中分選出OT-Ⅱ細(xì)胞。3采用流式細(xì)胞術(shù)檢測DC表面共刺激分子(CD80、CD86、CD40)、MHCⅡ分子的表達(dá)。4流式細(xì)胞術(shù)檢測DC提呈組織相容性復(fù)合體Ⅱ類分子Eα鏈第52~68位抗原肽(Eα52-68)的能力。5 ELISA法及實(shí)時(shí)熒光定量PC R檢測DC腫瘤壞死因子(TNF-α)、白介素1α(IL-1α)、IL-6、轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)的蛋白水平和mRNA水平。6流式細(xì)胞術(shù)檢測DC介導(dǎo)的OT-Ⅱ細(xì)胞增殖及Th1/Th2/Th17和抑制性細(xì)胞比例。結(jié)果:1經(jīng)磁珠分選后獲得了較高純度的DC(90%)。2經(jīng)分選試劑盒分選后獲得叫高純度的OT-Ⅱ細(xì)胞(90%)。3 SB203580降低DC表面CD80、CD86、CD40、MHC-Ⅱ的表達(dá)。4 SB203580抑制DC的抗原提呈反應(yīng)。5 SB203580使DC細(xì)胞的TNF-α、IL-1α、IL-6表達(dá)下調(diào),TGF-β表達(dá)上調(diào)。6 SB203580抑制DC介導(dǎo)的OT-Ⅱ細(xì)胞增殖,減少Th17細(xì)胞比例,增加抑制性細(xì)胞比例。結(jié)論:SB203580阻斷p38MAPK信號通路,可能通過調(diào)控DC表面CD80、CD86、CD40、MHCⅡ的表達(dá)及其抗原提呈功能和細(xì)胞因子的合成,從而抑制DC介導(dǎo)的OT-Ⅱ細(xì)胞增殖及向Th17細(xì)胞的分化,促進(jìn)其向抑制性細(xì)胞的分化。
【關(guān)鍵詞】：p38MAPK 樹突狀細(xì)胞 細(xì)胞因子 抗原提呈 T細(xì)胞增殖 T細(xì)胞分化
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R392
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-7
• 本文常用英文縮略詞7-10
• 1 前言10-19
• 2 研究目的和意義19
• 3 研究內(nèi)容和技術(shù)路線19-21
• 4 材料和方法21-44
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料21-28
• 4.2 方法28-43
• 4.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析43-44
• 5 結(jié)果44-56
• 5.1 分選后獲得高純度DC44
• 5.2 分選后獲得高純度的OT-Ⅱ細(xì)胞44-45
• 5.3 SB203580及LPS最佳處理濃度45-46
• 5.4 p38MAPK磷酸化檢測46
• 5.5 SB203580抑制DC的成熟表型46-49
• 5.6 SB203580抑制DC抗原提呈功能49-50
• 5.7 SB203580抑制DC分泌炎性因子，促進(jìn)抑炎因子的表達(dá)50-52
• 5.8 SB203580抑制DC介導(dǎo)的OT-Ⅱ細(xì)胞增殖52-53
• 5.9 SB203580降低IL-17+CD4+T細(xì)胞比例，，增加抑制性細(xì)胞比例53-55
• 5.10 SB203580增加Treg細(xì)胞百分比55-56
• 6 討論56-60
• 7 結(jié)論60
• 8 展望60-61
• 9 參考文獻(xiàn)61-73
• 10 在校期間發(fā)表文章73-74
• 11 致謝74

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本文編號：1043054