發(fā)布時(shí)間：2017-10-11 16:39

  本文關(guān)鍵詞：基于病毒樣顆粒的檢測(cè)基孔肯雅病毒IgM抗體的MacELISA方法的建立與評(píng)價(jià)

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【摘要】：為了建立捕獲法ELISA檢測(cè)基孔肯雅病毒IgM抗體的方法,本研究分離基孔肯雅病毒結(jié)構(gòu)蛋白編碼基因CE3-E2-6K-E1基因元件,通過(guò)昆蟲細(xì)胞桿狀病毒表達(dá)體系,制備病毒樣顆粒,免疫昆明鼠制備多克隆抗體,純化后用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記,建立一種以羊抗人IgM抗體、VLPs抗原和酶標(biāo)多克隆抗體為基礎(chǔ)的MacELISA檢測(cè)基孔肯雅病毒IgM抗體的方法,通過(guò)商業(yè)化質(zhì)控血清,實(shí)驗(yàn)室確診基孔肯雅熱、腎綜合癥出血熱患者和健康人群血清標(biāo)本對(duì)所建立方法進(jìn)行優(yōu)化和初步評(píng)價(jià),并與德國(guó)歐蒙公司商業(yè)化CHIKV IgM抗體檢測(cè)試劑盒IIFA-IgM進(jìn)行比較研究。所建立方法特異性為99%(99/100),重復(fù)性檢測(cè)板內(nèi)變異性系數(shù)低于10%,板間變異系數(shù)低于15%,檢測(cè)限明顯低于IIFA-IgM商業(yè)化試劑盒(P0.0001)。結(jié)果顯示,本方法屬常規(guī)ELISA方法,操作簡(jiǎn)單,具有較高的敏感性、特異性,可用于基孔肯雅病毒IgM抗體實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),為該病的診斷和流行病學(xué)調(diào)查提供新的手段。
【作者單位】： 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所;
【關(guān)鍵詞】： 基孔肯雅病毒 病毒樣顆粒 抗體IgM MacELISA
【基金】：傳染病防治重大專項(xiàng)(2013ZX10004101,2011ZX10004-803-006)
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)屬披膜病毒科甲病毒屬,為單股正鏈RNA病毒,基因組約為11~12kb,共編碼5個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白和4個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白。CHIKV主要經(jīng)伊蚊叮咬傳播,引發(fā)以發(fā)熱、關(guān)節(jié)疼痛等為主要特征的基孔肯雅熱(Chikun-gunya fever,CHIK)。人感染CHIKV,病毒血癥期約為7天[1

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 張海林,施華芳,劉麗華,俞永新,自登云,李兆祥,張?zhí)靿?崔五全,王志偉,國(guó)正鳴,李新年,甲利;從云南省蝙蝠中分離基孔肯雅病毒及血清抗體調(diào)查[J];病毒學(xué)報(bào);1989年01期

2 張海林,張?jiān)浦?楊衛(wèi)紅,章域震,米竹青,黃文麗,袁慶虹,王靜林;云南省瀾滄江下游地區(qū)人及動(dòng)物血清蟲媒病毒抗體調(diào)查[J];醫(yī)學(xué)動(dòng)物防制;2004年04期

3 董必軍,陳文州,李秀維,劉紅兵,陳玉本,闞飆,鄺繼琛;首次從海南島蚊蟲和蝙蝠中分離出兩株基孔肯雅病毒[J];中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志;1993年03期

4 施華芳,張海林,自登云,米竹青,李兆祥,劉麗華,俞永新,王志偉,崔伍全;云南首次從患者體內(nèi)分離到基孔肯雅病毒[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1990年01期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張海林,施華芳,米竹青,龔正達(dá),國(guó)正鳴,李兆祥,自登云,甲利,刀紅兵,李新年,戴祥明;蝙蝠自然感染乙型腦炎病毒的研究[J];病毒學(xué)報(bào);1990年03期

2 張海林,米竹青,施華芳,自登云;樹，

本文編號(hào)：1013666