本文關(guān)鍵詞：肺炎支原體鐵吸收調(diào)節(jié)蛋白基因的克隆表達與純化

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【摘要】：[目的]克隆肺炎支原體鐵吸收調(diào)節(jié)蛋白(Fur)基因并純化Fur蛋白,為研究其生物學功能奠定基礎。[方法]利用Clustal Omega分析肺炎支原體Fur蛋白及其同源序列并用MEGA6.0構(gòu)建進化樹,通過PCR擴增Fur基因并對其進行雙酶切,然后連接到p ET28a,得到重組載體p ET28a-Fur,將其轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),利用IPTG誘導Fur蛋白表達,并通過親和層析純化Fur蛋白。[結(jié)果]多序列比對和進化樹分析表明Mp含有一個Fur蛋白。克隆得到大小為477 bp的Fur基因,編碼159個氨基酸。得到重組表達質(zhì)粒p ET28a-Fur,該質(zhì)粒能在大腸桿菌中能高效表達,并純化得到重組Fur蛋白。[結(jié)論]成功克隆獲得Mp Fur基因,在大腸桿菌中高效表達并獲得高純度Fur蛋白。
【作者單位】： 邵陽醫(yī)學高等專科學校;南華大學病原生物學研究所特殊病原體防控湖南省重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 肺炎支原體 Fur蛋白 克隆 表達
【基金】：湖南省科技計劃項目(“次抑菌濃度的大環(huán)內(nèi)酯藥物誘導Mp交叉耐藥的機制研究”;No.2013FJ3067) 特殊病原體防控湖南省重點實驗室資助項目(湘科計字[2014]10號)
【分類號】：R378;Q78
【正文快照】： 鐵是細菌在生存和生長過程中必需的金屬元素之一,它參與了細菌的電子傳遞、DNA合成和氧的運輸?shù)雀鞣N生理和生化過程[1]。但是細菌胞內(nèi)高濃度的鐵離子會導致細菌內(nèi)的氧化失衡,細菌必須具備一定機制用來維持細菌體內(nèi)的鐵離子平衡[1-2]。鐵吸收調(diào)節(jié)蛋白(ferric uptake regulator

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 宋志強;李媛;孫文靜;劉洋;鄒曉輝;陳維;周玉梅;辛九慶;;牛支原體新基因(P18)的克隆表達及活性鑒定[J];中國預防獸醫(yī)學報;2012年03期

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本文編號：999733