本文關(guān)鍵詞：不同接種密度對Caco-2細(xì)胞吸收模型分化及去極化評價指標(biāo)的影響

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【摘要】：為確定不同接種密度對Caco-2細(xì)胞吸收模型分化及去極化評價指標(biāo)的影響,以及細(xì)胞模型適用于吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)試驗(yàn)的時間,采用Caco-2細(xì)胞高密度(1×105cells·cm-2)、中密度(5×104cells·cm-2)和低密度(3×104cells·cm-2)等3個接種密度,分別接種于帶聚碳酸酯微孔濾膜插槽的Transwell 6孔板上,培養(yǎng)29 d,通過測定跨膜電阻值(TEER)、堿性磷酸酶活性(ALP)和酚紅透過率,評價細(xì)胞單層的完整性、極化和透過性。結(jié)果表明,高、中、低密度接種分別于第12天、第15天和第18天TEER值超過600Ω·cm2,第27天、第29天和第29天TEER值開始下降。高、中、低密度接種分別于第15天、第18天和第21天上下側(cè)堿性磷酸酶活性的比值都能達(dá)到10倍以上,第29天開始降低。高、中、低密度接種分別于第9天、第12天和第15天酚紅透過率小于0.5%。綜合以上3項(xiàng)指標(biāo),高密度接種細(xì)胞在第15天、中密度接種細(xì)胞在第18天、低密度接種細(xì)胞在第21天開始,可以用于吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)試驗(yàn),27 d以后細(xì)胞活力就開始下降,不適合做細(xì)胞模型。
【作者單位】： 河北科技師范學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所;
【關(guān)鍵詞】： Caco-細(xì)胞 跨膜電阻(TEER) 堿性磷酸酶(ALP) 酚紅
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(項(xiàng)目編號:31272465)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： Caco-2細(xì)胞在體外聚碳酸酯微孔濾膜上培養(yǎng)時,能自發(fā)分化并形成類似腸道上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特征和生化特性,如在細(xì)胞間形成緊密連接,在細(xì)胞表面形成良好的刷狀緣和微絨毛結(jié)構(gòu),并可分泌水解酶以及合成轉(zhuǎn)運(yùn)糖、氨基酸和藥物等的載體轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)等[1]。因此,該模型在藥理[2]、毒理[3]、生，

本文編號：920591