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幽門螺桿菌臨床菌株的分離培養(yǎng)和鑒定

發(fā)布時間:2017-09-14 19:43

  本文關鍵詞:幽門螺桿菌臨床菌株的分離培養(yǎng)和鑒定


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【摘要】:目的:建立一種幽門螺桿菌(H.pylori)臨床菌株的分離培養(yǎng)的方法。方法:取臨床胃黏膜組織標本88株,接種于10%綿羊全血的哥倫比亞選擇性培養(yǎng)基上,37℃、5%O2、10%CO2、85%N2培養(yǎng)3~5 d后,挑取血平板上透明細小可疑菌落進行革蘭氏染色和尿素酶試驗,對陽性菌落進行擴大純培養(yǎng),提取細菌DNA,PCR擴增H.pylori 16sRNA、Cag A基因,電泳并進行測序鑒定。結果:成功從臨床胃黏膜組織中分離培養(yǎng)出H.pylori,88例胃黏膜組織標本中分離培養(yǎng)并鑒定出H.pylori 19株,陽性率為22%;對16sRNA及Cag A基因進行擴增,電泳可見目的條帶,并對16sRNA擴增產(chǎn)物測序,與H.pylori國際標準菌株26695比對,同源性為95%~99%。結論:37℃、5%O2、10%CO2、85%N2條件下10%綿羊全血的哥倫比亞選擇性培養(yǎng)基上能成功分離培養(yǎng)出H.pylori臨床株。
【作者單位】: 貴州醫(yī)科大學;貴州醫(yī)科大學分子生物學重點實驗室;
【關鍵詞】幽門螺桿菌 分離培養(yǎng) 臨床菌株 革蘭染色 CagA基因
【基金】:國家自然科學基金(No.81260303)
【分類號】:R378.2
【正文快照】: 幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是一種呈螺旋狀或S形、微需氧的革蘭氏陰性桿菌,由澳大利亞科學家Mashall和Warren于1983年從慢性胃炎病人的胃黏膜中首次分離并成功培養(yǎng)[1-2]。H.pylori是全球最常見的感染性病原菌之一,是慢性胃炎、胃潰瘍的主要致病因素[3-4],與胃

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