本文關鍵詞：連接肽長度對單鏈抗體與小分子半抗原結合力的影響

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【摘要】：為了分析單鏈抗體的連接肽長度對其與小分子半抗原結合力的影響,本研究以含(G_4S)_3連接肽的伏馬菌素特異單鏈抗體基因H2為模板,PCR擴增獲得含G_4S和(G_4S)_2連接肽的單鏈抗體編碼基因,分別命名為H2-5和H2-10,通過基因工程操作構建到p HENHi載體中,轉化大腸桿菌XL1-Blue進行原核表達,純化后利用ELISA檢測單鏈抗體的親和力。結果顯示含不同長度連接肽的單鏈抗體均能在大腸桿菌中可溶性表達,單鏈抗體結合力與連接肽長度的關系為(G_4S)_3G_4S(G_4S)_2,即單鏈抗體H2與其抗原伏馬菌素的親和力最高,其次為H2-5和H2-10抗體。因此,含有較長連接肽的單鏈抗體能夠自身折疊形成有活性的蛋白,并表現出與小分子半抗原更強的結合能力。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學細胞與基因工程重點實驗室;
【關鍵詞】： 單鏈抗體 連接肽 小分子半抗原 結合力
【基金】：國家自然科學基金(31260227,31660258) 中國博士后科學基金(2015M582758XB) 貴州省科技創(chuàng)新人才團隊項目(黔科合人才團隊(2015)4021) 貴州省科技項目(黔科合J字[2013]2058號和黔科合LH字[2014]7092) 貴州省高校優(yōu)秀科技創(chuàng)新人才支持計劃(黔教合KY字[2014]244) 貴陽市科技計劃項目(筑科合同[2014]37號) 國家級大學生創(chuàng)新訓練計劃(201310660004)共同資助
【分類號】：R392
【正文快照】： *共同第一作者Effect of the Linker Length of sc Fv Antibody on Its Binding Capacity toSmall Molecular HaptenXia Xue*Shi Yuling*Yu Yanqin Feng Min Wang Tingting Fang Rong Huang Shunli Zeng Zhu HuZuquan**Key Laboratory of Cell and Gene Engineering,Guiyang,5

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