本文關(guān)鍵詞：日本血吸蟲熱休克因子基因結(jié)構(gòu)特征及其可變剪切亞型分析研究

  更多相關(guān)文章： 日本血吸蟲 熱休克反應(yīng) 熱休克因子 可變剪切 熱休克蛋白

【摘要】：目的克隆、鑒定日本血吸蟲熱休克因子(Sj-hsf),并分析其基因結(jié)構(gòu)特征和可變剪切亞型。方法以日本血吸蟲尾蚴感染新西蘭白兔,42 d后剖殺,以灌注法收集雌蟲、雄蟲及感染兔肝臟,以Trizol法提取總RNA。以RT-PCR擴(kuò)增日本血吸蟲雌蟲、雄蟲、蟲卵總RNA,獲得Sj-hsf開放閱讀框(ORF)全長片段和Sj-hsf可變剪切區(qū)域片段,并進(jìn)行克隆、酶切及測序鑒定。用DNAMAN 8.0、Inter Pro、Mega 6結(jié)合日本血吸蟲和曼氏血吸蟲基因組數(shù)據(jù)庫以及Gen Bank等網(wǎng)絡(luò)分析平臺,分析Sj-hsf的基因結(jié)構(gòu)特征、功能結(jié)構(gòu)域、可變剪切模式以及不同物種間HSF序列的同源性和進(jìn)化樹。結(jié)果自雌蟲、雄蟲、蟲卵擴(kuò)增獲得靶片段,并克隆獲得陽性重組質(zhì)粒,其中含Sj-hsf ORF的p BSj HSFf-F、p BSj HSFf-M、p BSj HSFf-E以及含可變剪切片段的p BSj HSFs-F、p BSj HSFs-M、p BSj HSFs-E,酶切及測序鑒定正確。序列分析顯示Sj-hsf具有3種剪切亞型:Sj-hsf-isoform1(2 050 bp)、Sj-hsf-isoform2(2 086 bp)、Sj-hsf-isoform3(2 111 bp),Gen Bank登錄號分別為KU954546、KX119143、KX119144,均位于日本血吸蟲基因組SJC-S000780,有8個外顯子,在雌蟲、雄蟲和蟲卵階段3種亞型均存在,以Sj-hsf-isoform1表達(dá)量高。Sj-HSF-isoform1(671 aa)、Sj-HSF-isoform2(683 aa)具有HSF特征性DBD(DNA Binding Domain)、HR-A/B和HR-C結(jié)構(gòu)域,Sj-HSF-isoform3(282 aa)提前終止,無HR-C結(jié)構(gòu)域。進(jìn)化樹分析表明Sj-HSF三種剪切亞型隸屬HSF1,與曼氏血吸蟲HSF近源。結(jié)論日本血吸蟲雌蟲、雄蟲、蟲卵階段均存在3種剪切亞型的HSF,以Sj-HSF-isoform1表達(dá)量高。本研究為進(jìn)一步闡明Sj-HSF調(diào)控Sj-HSPs等應(yīng)激防御體系的分子機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院病原生物學(xué)系暨廣東普通高校新發(fā)傳染病防治重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 日本血吸蟲 熱休克反應(yīng) 熱休克因子 可變剪切 熱休克蛋白
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81071378、30872204) 廣東省廣州市對外科技合作專項(2012J5100026) 廣東省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(201412121088)
【分類號】：R383.24
【正文快照】： 生物體受外界各種刺激,會引發(fā)一系列防御性反應(yīng),其中熱休克反應(yīng)(Heat stress response,HSR)在此應(yīng)激防御過程中發(fā)揮重要作用。HSR體系包括感應(yīng)系統(tǒng)和效應(yīng)系統(tǒng),感應(yīng)系統(tǒng)包括細(xì)胞膜上鈣離子通道激活和下游通路如ROS通路(ROS/redox signaling network)和MAPK通路激活,繼而可引起

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曹玲;;我科學(xué)家公布日本血吸蟲“基因天書”[J];發(fā)明與創(chuàng)新(綜合版);2006年07期

2 ;抑制一種酶的活性可致日本血吸蟲死亡[J];山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2012年04期

3 何毅勛,彭辛午;日本血吸蟲發(fā)育的掃描電鏡觀察[J];寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;1983年04期

4 黃左鉞,勵正康,邱云,王琴美;呼吸在日本血吸蟲能量代謝中的作用[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;1987年03期

5 張萍;;日本血吸蟲的采集、固定和保存法簡介[J];寄生蟲病防治與研究;1995年03期

6 帥連云,曹建平,仇錦波;日本血吸蟲純凈活蟲卵的制備[J];鎮(zhèn)江醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1998年04期

7 沈際佳,蔣作君,余新炳,汪淵,汪學(xué)龍,吳忠道,周青;日本血吸蟲線粒體大亞基核糖體基因的亞克隆、測序及同源性分析[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2000年04期

8 王文實,李雍龍;日本血吸蟲細(xì)胞凋亡及其誘導(dǎo)的研究[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;2000年05期

9 吳忠道,余新炳,徐勁,曹愛蓮,羅建威,熊小燕,耿巖;日本血吸蟲細(xì)菌人工染色體文庫的初步構(gòu)建(英文)[J];廣東寄生蟲學(xué)會年報;2000年00期

10 卞國武,余新炳,吳忠道;日本血吸蟲(中國大陸株)成蟲表達(dá)序列標(biāo)簽的獲取及分析[J];廣東寄生蟲學(xué)會年報;2000年00期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 程國鋒;林矯矯;馮新港;傅志強;苑純秀;周元聰;蔡幼民;;日本血吸蟲性別發(fā)育蛋白質(zhì)組研究[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)首屆學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2003年

2 王欣之;矯矯;石耀軍;馮新港;苑純秀;金亞美;;日本血吸蟲7d童蟲消減cDNA文庫的構(gòu)建及測序分析[A];第二屆全國人畜共患病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

3 沈際佳;蔣作君;余新炳;汪學(xué)龍;王維;;編碼日本血吸蟲10.6KD膜蛋白基因的克隆、測序及表達(dá)[A];中國動物學(xué)會第六屆全國青年寄生蟲學(xué)工作者學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2000年

4 夏艷勛;林矯矯;趙傳壁;陳益;賀桂芬;;日本血吸蟲性別差異表達(dá)基因的篩選及研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會暨中國免疫學(xué)會獸醫(yī)免疫分會第七次研討會論文集[C];2008年

5 周立;榮秋亮;王業(yè)富;;日本血吸蟲熒光定量PCR檢測方法的建立[A];2012年湖北生物產(chǎn)業(yè)發(fā)展高端論壇暨湖北省生物工程學(xué)會2012年度學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2012年

6 楊勝輝;劉碧源;劉彥;周東明;曾慶仁;曾鐵兵;喻容;蔡力汀;張順科;方會龍;;端粒酶催化亞單位基因經(jīng)雙嗜性逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入日本血吸蟲體外培養(yǎng)細(xì)胞的研究[A];全國寄生蟲學(xué)與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

7 葉向群;;釘螺體內(nèi)葉巢外睪吸蟲與日本血吸蟲對抗性的研究[A];中國動物學(xué)會第八次全國寄生蟲學(xué)學(xué)術(shù)討論會論文摘要匯編[C];2001年

8 陸珂;苑純秀;朱傳剛;石耀軍;李浩;劉金明;林矯矯;;日本血吸蟲膜蛋白重組抗原免疫小鼠的保護(hù)力評估研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2006年

9 孔娟;馮正;徐斌;鄧王平;鞠川;胡薇;;日本血吸蟲腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶基因的克隆、表達(dá)及各蟲期轉(zhuǎn)錄和表達(dá)情況的研究[A];全國寄生蟲學(xué)與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

10 徐斌;馮正;鞠川;許學(xué)年;莫筱謹(jǐn);鄧王平;孔娟;胡薇;;日本血吸蟲金屬蛋白酶基因的克隆和表達(dá)及其對小鼠的免疫保護(hù)性研究[A];全國寄生蟲學(xué)與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 記者 陳衛(wèi)東;日本血吸蟲基因組測序完成[N];科技日報;2009年

2 通訊員 彭振 記者 程守勤;抑制一種酶的活性可致日本血吸蟲死亡[N];健康報;2012年

3 記者　曹玲娟;我科學(xué)家公布日本血吸蟲“基因天書”[N];人民日報;2006年

4 記者　 章迪思 實習(xí)生 周惠婷;血吸蟲基因“天書”全球發(fā)布[N];解放日報;2006年

5 岳陽;國內(nèi)生物信息平臺首發(fā)大規(guī)模基因組數(shù)據(jù)[N];中國醫(yī)藥報;2006年

6 記者　謝軍;我國首次向全球公布日本血吸蟲基因組工作框架圖序列數(shù)據(jù)[N];光明日報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉建;日本血吸蟲氧化還原相關(guān)蛋白功能、結(jié)構(gòu)及應(yīng)用研究[D];華東理工大學(xué);2012年

2 韓艷輝;硫氧還蛋白谷胱甘肽還原酶(TGR)在日本血吸蟲生長發(fā)育中部分功能的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 洪煬;日本血吸蟲童蟲在不同敏感性宿主體內(nèi)差異表達(dá)蛋白的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

4 劉昒;日本血吸蟲骨形成蛋白分子的鑒定和功能研究[D];武漢大學(xué);2013年

5 武闖;日本血吸蟲免疫球蛋白結(jié)合蛋白質(zhì)組的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

6 劉鋒;人CD34+造血干/祖細(xì)胞和日本血吸蟲的轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

7 何原;日本血吸蟲酚氧化酶基因結(jié)構(gòu)及其功能的研究[D];武漢大學(xué);2012年

8 徐靜瑋;日本血吸蟲抗原誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化的分子證據(jù)[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

9 朱傳剛;日本血吸蟲疫苗的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2006年

10 陳巖勤;白頭翁總皂苷對日本血吸蟲及其宿主的作用和機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王宇清;感染日本血吸蟲引起宿主循環(huán)MicroRNAs表達(dá)變化的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 刀金威;日本血吸蟲凋亡抑制因子SjBIRP功能的初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

3 劉艷濤;日本血吸蟲表膜蛋白SjOST48的初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

4 馬帥;日本血吸蟲TOR基因克隆表達(dá)及生物學(xué)功能研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

5 趙登云;日本血吸蟲蟲卵及相關(guān)抗原的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

6 杜曉峰;日本血吸蟲入侵宿主過程中關(guān)鍵尾蚴蛋白酶的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

7 趙波;吡喹酮（PZQ）衍生物對日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的生物學(xué)效應(yīng)及PZQ抗性蟲體蛋白質(zhì)組學(xué)分析[D];蘇州大學(xué);2015年

8 華夢晴;日本血吸蟲Nanos蛋白的基因定位與功能初步鑒定[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

9 邵延靖;日本血吸蟲Vasa3基因定位與功能的初步研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 卞超蓉;日本血吸蟲不同蟲株的群體遺傳學(xué)分析[D];蘇州大學(xué);2015年

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本文編號：823455